余文杰+沈孝坤

[摘要] 目的 探討青年乳腺癌患者VEGF、EGFR和Ki-67的表達以及與臨床病理特征的相關(guān)性。方法 回顧性分析≤35歲乳腺癌患者的臨床資料，分析VEGF、EGFR和Ki-67的表達水平及臨床病理特征。 結(jié)果 青年組VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率顯著高于中老年組患者（P<0.01或P<0.05）。VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有相關(guān)性（P<0.01）。 結(jié)論VEGF、EGFR和Ki-67在青年乳腺癌患者中呈高表達，并且其陽性表達率與患者的TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] 乳腺癌；血管內(nèi)皮生長因子；表皮生長因子受體；非組蛋白核蛋白

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）02-0026-04

Expressions of VEGF，EGFR and Ki-67 in young breast carcinoma and relationship with the clinical pathologial stage

YU Wenjie1 SHEN Xiaokun2

1.Oncological Surgery Department， Taizhou Hospital， Linhai City in Zhejiang Province， Linhai 317000，China；2.Taizhou Hospital Affiliacted to Wenzhou Medical College， Linhai 317000， China

[Abstract] Objective To discuss expression of VEGF、EGFR and Ki-67 in youth breast cancer and the relationship with TNM. Clinical data of patients with breast cancer aged ≤35 were analyzed. Expressions of VEGF、EGFR and Ki-67 and clinicopathologic feature were analyzed. Results Expressions rates of VEGF、EGFR and Ki-67 in youth group were higher than elderly group（P<0.01 or P<0.05）. Expressions of VEGF、EGFR and Ki-67 showed correlation with TNM and the number of lymph node metastasis（P<0.01）. Conclusion Expressions of VEGF、EGFR and Ki-67 in youth breast cancer are high. Positive expressions show correlation with TNM and the number of lymph node metastasis. [Key words] Breast cancer； VEGF； EGFR； Ki-67

乳腺癌是臨床常見的惡性腫瘤，在導(dǎo)致女性腫瘤患者死亡的病因中居第二位。我國乳腺癌多發(fā)生在絕經(jīng)前的女性，發(fā)病年齡相對較早。與老年乳腺癌比較，青年乳腺癌具有發(fā)展快、侵襲性高、預(yù)后差等特點。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在腫瘤血管生長過程中發(fā)揮重要的作用[1]；上皮生長因子受體（EGFR）與腫瘤的轉(zhuǎn)移和血管形成有關(guān)[2]；腫瘤增殖抗原Ki-67的高表達反映了細胞增殖活躍。本研究分析青年乳腺癌患者VEGF、EGFR和Ki-67的表達情況，并分為其與臨床病理特征的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析2009年1月～2013年4月在我院進行診斷和治療的≤35歲乳腺癌患者的臨床資料。納入標準：（1）年齡≤35歲；（2）臨床資料完整，有可手術(shù)病歷；（3）病理診斷明確；（4）術(shù)前未進行其他治療；（5）漢族；（6）腋窩淋巴結(jié)清掃>10個。排除少數(shù)民族、資料不完整、術(shù)前接受放化療治療、復(fù)發(fā)病例等。共有58例。另選擇年齡>35歲的患者166例為對照組。

1.2免疫組化檢測方法及判定標準

1.2.1制作病理切片 載玻片經(jīng)洗滌、酸液浸泡、沖洗烘干后保存?zhèn)溆谩４龣z測組織固定、脫水、透明處理，石蠟包埋，切片，切好的組織切片貼在載玻片中烘烤2 h備用。

1.2.2檢測方法 病理切片脫蠟、水化，組織抗原修復(fù)，滅活內(nèi)源性過氧化物酶，經(jīng)一抗孵育和二抗孵育，DAB顯色，脫水、透明、封片。

1.2.3各指標判斷方法 VEGF染色的癌細胞胞漿呈棕褐色（圖1）；EGFR染色的癌細胞細胞膜或（和）胞漿呈棕色（圖2）；Ki-67染色的癌細胞細胞核內(nèi)有棕黃色顆粒（圖3）。VEGF判斷標準[3]：陰性：<25%細胞胞漿內(nèi)著色，細小顆粒狀；陽性：≥25%細胞漿內(nèi)著色，同時有細小顆粒和（或）較粗大顆粒，或者呈彌漫著色。EGFR判斷標準[4]：陰性：無陽性結(jié)果或者非特異著色；陽性：>10%區(qū)域陽性表達，胞膜不同程度顯色。Ki-67判斷標準[5]：陰性：陽性癌細胞數(shù)<10%；陽性：陽性細胞數(shù)≥10%。

圖1 VEGF在乳腺癌癌細胞中的表達

圖2 EGFR在乳腺癌癌細胞中的表達

圖3 Ki-67在乳腺癌癌細胞中的表達

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料采用卡方檢驗，計量資料采用t檢驗。VEGF、EGFR和Ki-67的表達與乳腺癌分期和腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。endprint

2結(jié)果

2.1兩組臨床資料比較

見表1。兩組均以浸潤性導(dǎo)管癌發(fā)病率最高，但中老年組的患者比例更高（P<0.01）。TNM分期：兩組均以Ⅱ期為主，但中老年患者比例更高（P<0.01）。兩組腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)比較差異也有顯著差異（P<0.01）。

2.2兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異

青年組VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率顯著高于中老年組患者（P<0.01或P<0.05）。見表2。

表2 兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異[n（%）]

2.3兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的相關(guān)性

VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期具有相關(guān)性（P<0.01）。VEGF、EGFR和Ki-67的表達與青年組和老年組腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有顯著的相關(guān)性（P<0.01）。見表3。

3討論

乳腺癌的發(fā)病率有逐漸上升的趨勢，全球大約每年有130萬人被診斷為乳腺癌，其中約40萬患者死于乳腺癌。癌癥的發(fā)生與多種基因異常有關(guān)。青年乳腺癌具有侵襲性強，發(fā)展快、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高等特點，通常預(yù)后不良。青年乳腺癌的這些特點可能與青年女性卵巢功能旺盛，內(nèi)源性雌激素水平影響到了腫瘤的惡性程度、轉(zhuǎn)移性、預(yù)后等[6]。TNM分期根據(jù)原發(fā)腫瘤的范圍、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、遠處臟器轉(zhuǎn)移情況等進行分期，對制定治療方案、評價預(yù)后具有重要的意義。

青年乳腺癌和中老年乳腺癌臨床特征存在一些差異。在本次研究中，中老年患者浸潤性導(dǎo)管癌的比例顯著高于青年乳腺癌患者，而青年乳腺癌患者浸潤性小葉癌和其他類型的癌比例則高于中老年乳腺癌的患者。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，青年乳腺癌患者4個及以上轉(zhuǎn)移比例顯著高于中老年組的患者，也反映了青年乳腺癌患者轉(zhuǎn)移性高等臨床特點。

血管內(nèi)皮生長因子（VEGFs）調(diào)節(jié)血管的發(fā)展，通過結(jié)合到受體數(shù)量的血管生成和淋巴管。受體VEGFR-1是為造血干細胞的招募和單核細胞和巨噬細胞的遷移工作需要，受體VEGFR-2調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能和VEGFR-3的調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細胞的功能。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）作為促血管生長因子，對癌細胞的生長和轉(zhuǎn)移具有重要的意義[7]。VEGF 由8 個外顯子和7 個內(nèi)含子組成，定位于染色體6p21.3，由于外顯子剪切的不同而形成不同的亞型。上皮生長因子受體（EGFR）是c-erbB1原癌基因的表達產(chǎn)物，屬于HER（表皮生長因子受體）家族的成員[8]，對細胞生理過程發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。上皮細胞、膠質(zhì)細胞、成纖維細胞等細胞表面上廣泛分布著EGFR，其對細胞的生長、增殖、分化等生理過程發(fā)揮重要的作用。EGFR功能缺失或信號通路中關(guān)鍵因子活性異?；蛘呒毎ㄎ划惓＃鶗?dǎo)致腫瘤、免疫缺陷等。EGFR表達于正常上皮細胞表面，而在一些腫瘤細胞中常過表達，EGFR的過表達與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、浸潤、預(yù)后差有關(guān)[9]。EGFR下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要有兩條：一條是Ras/ Raf/ MEK/ERK-MAPK 通路，而另一條是PI3K/Akt/mTOR通路。位于胞膜表面的EGFR與配體結(jié)合后激活，從單體轉(zhuǎn)化為二聚體。EGFR在多種實體腫瘤中表達異常或者呈高表達，與腫瘤血管生成、腫瘤細胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、抑制凋亡等相關(guān)。高表達的EGFR導(dǎo)致下游信號傳導(dǎo)作用增強，EGFR突變，配體表達增加，導(dǎo)致EGFR的持續(xù)活化等。膠質(zhì)細胞瘤中基因擴增導(dǎo)致了EGFR的高表達。EGFR的配體通過自分泌形式激活EGFR促進細胞增殖，他們的共表達往往預(yù)示腫瘤預(yù)后不良。EGFR還通過Ang-1和VEGF等調(diào)節(jié)影響腫瘤的血管生成。Ki67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細胞增殖中是不可缺少，但其確切機制尚不清楚，Ki67作為一種抗原，標記細胞的增殖狀態(tài)，與細胞周期具有相關(guān)性，檢測Ki-67抗原可以了解惡性腫瘤的細胞增殖活性[10]。Ki-67表達覆蓋腫瘤增殖細胞除G0 期外的各個增殖周期。研究顯示Ki-67 基本可以代替PCNA來檢測乳腺癌組織中的增殖細胞。在低分化腺癌組織中Ki-67的表達比中高分化腺癌組織顯著升高。Ki-67與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，提示預(yù)后不良，對乳腺癌的診斷和評價預(yù)后具有重要意義。

在本次研究中，青年乳腺癌患者和中老年乳腺癌患者VEGF、EGFR和Ki-67的表達陽性率比較差異顯著，青年乳腺癌患者的陽性表達率均顯著高于中老年乳腺癌的患者，這可能與青年乳腺癌侵襲性高、轉(zhuǎn)移性強、惡性程度高等相關(guān)。并且隨著腫瘤TNM分期的增加以及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的增加，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達顯著升高，Spearman相關(guān)分析顯示，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有相關(guān)性，并且這種相關(guān)性，青年乳腺癌患者更加顯著。

綜上所述，VEGF、EGFR和Ki-67在青年乳腺癌患者中呈高表達，并且其陽性表達率與患者的TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，對判斷患者的預(yù)后具有一定的意義。

[參考文獻]

[1] Sledge GW Jr. VEGF-targeting therapy for breast cancer[J]. J Mammary Gland Biol Neoplasia，2005，10（4）：319-323.

[2] 周泉，李艷，童永清. 腫瘤基因EGFR檢測方法的研究進展[J]. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（11）：1407-1409.

[3] 張利斌，王平，熊健，等. 非小細胞肺癌中VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3表達與微淋巴管密度的關(guān)系[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013，48（8）： 933-937.

[4] 馬桂芬，繆青，高虹，等. 人上皮生長因子受體2在胃癌發(fā)生發(fā)展中的表達及臨床意義[J]. 中華消化雜志，2012， 32（10）： 703-706.

[5] 徐婷，何奇，吳克瑾，等. 三陰性乳腺癌中p53和Ki67表達的相關(guān)研究[J]. 上海交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2013， 33（6）： 833-837.

[6] 張作文，劉勝春，吳凱南，等. 雌、孕激素受體狀況對青年乳腺癌的遠期預(yù)后價值[J]. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013， 38（1）： 94-97.

[7] 蔣洪棉，朱世龍，李辛辛，等. 三陰性乳腺癌中的VEGF表達及臨床意義[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2013，35（6）：743-744.

[8] 陶黎陽，符立梧. EGFR/HER-2雙受體酪氨酸激酶抑制劑拉帕替尼的研究進展[J]. 中國藥理學(xué)通報，2008，24（12）：1541-1544.

[9] 陸應(yīng)麟. 上皮生長因子受體在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用研究進展[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)情報，1994，8（6）：311-312.

[10] 朱麗萍，王斌，李涌濤，等. 乳腺癌易感基因1、Ki-67在青年乳腺癌患者組織中的表達及其臨床意義[J]. 中華實驗外科雜志，2012，29（5）： 830-832.

（收稿日期：2013-09-13）endprint

2結(jié)果

2.1兩組臨床資料比較

見表1。兩組均以浸潤性導(dǎo)管癌發(fā)病率最高，但中老年組的患者比例更高（P<0.01）。TNM分期：兩組均以Ⅱ期為主，但中老年患者比例更高（P<0.01）。兩組腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)比較差異也有顯著差異（P<0.01）。

2.2兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異

青年組VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率顯著高于中老年組患者（P<0.01或P<0.05）。見表2。

表2 兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異[n（%）]

2.3兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的相關(guān)性

VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期具有相關(guān)性（P<0.01）。VEGF、EGFR和Ki-67的表達與青年組和老年組腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有顯著的相關(guān)性（P<0.01）。見表3。

3討論

乳腺癌的發(fā)病率有逐漸上升的趨勢，全球大約每年有130萬人被診斷為乳腺癌，其中約40萬患者死于乳腺癌。癌癥的發(fā)生與多種基因異常有關(guān)。青年乳腺癌具有侵襲性強，發(fā)展快、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高等特點，通常預(yù)后不良。青年乳腺癌的這些特點可能與青年女性卵巢功能旺盛，內(nèi)源性雌激素水平影響到了腫瘤的惡性程度、轉(zhuǎn)移性、預(yù)后等[6]。TNM分期根據(jù)原發(fā)腫瘤的范圍、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、遠處臟器轉(zhuǎn)移情況等進行分期，對制定治療方案、評價預(yù)后具有重要的意義。

青年乳腺癌和中老年乳腺癌臨床特征存在一些差異。在本次研究中，中老年患者浸潤性導(dǎo)管癌的比例顯著高于青年乳腺癌患者，而青年乳腺癌患者浸潤性小葉癌和其他類型的癌比例則高于中老年乳腺癌的患者。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，青年乳腺癌患者4個及以上轉(zhuǎn)移比例顯著高于中老年組的患者，也反映了青年乳腺癌患者轉(zhuǎn)移性高等臨床特點。

血管內(nèi)皮生長因子（VEGFs）調(diào)節(jié)血管的發(fā)展，通過結(jié)合到受體數(shù)量的血管生成和淋巴管。受體VEGFR-1是為造血干細胞的招募和單核細胞和巨噬細胞的遷移工作需要，受體VEGFR-2調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能和VEGFR-3的調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細胞的功能。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）作為促血管生長因子，對癌細胞的生長和轉(zhuǎn)移具有重要的意義[7]。VEGF 由8 個外顯子和7 個內(nèi)含子組成，定位于染色體6p21.3，由于外顯子剪切的不同而形成不同的亞型。上皮生長因子受體（EGFR）是c-erbB1原癌基因的表達產(chǎn)物，屬于HER（表皮生長因子受體）家族的成員[8]，對細胞生理過程發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。上皮細胞、膠質(zhì)細胞、成纖維細胞等細胞表面上廣泛分布著EGFR，其對細胞的生長、增殖、分化等生理過程發(fā)揮重要的作用。EGFR功能缺失或信號通路中關(guān)鍵因子活性異?；蛘呒毎ㄎ划惓?，均會導(dǎo)致腫瘤、免疫缺陷等。EGFR表達于正常上皮細胞表面，而在一些腫瘤細胞中常過表達，EGFR的過表達與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、浸潤、預(yù)后差有關(guān)[9]。EGFR下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要有兩條：一條是Ras/ Raf/ MEK/ERK-MAPK 通路，而另一條是PI3K/Akt/mTOR通路。位于胞膜表面的EGFR與配體結(jié)合后激活，從單體轉(zhuǎn)化為二聚體。EGFR在多種實體腫瘤中表達異?；蛘叱矢弑磉_，與腫瘤血管生成、腫瘤細胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、抑制凋亡等相關(guān)。高表達的EGFR導(dǎo)致下游信號傳導(dǎo)作用增強，EGFR突變，配體表達增加，導(dǎo)致EGFR的持續(xù)活化等。膠質(zhì)細胞瘤中基因擴增導(dǎo)致了EGFR的高表達。EGFR的配體通過自分泌形式激活EGFR促進細胞增殖，他們的共表達往往預(yù)示腫瘤預(yù)后不良。EGFR還通過Ang-1和VEGF等調(diào)節(jié)影響腫瘤的血管生成。Ki67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細胞增殖中是不可缺少，但其確切機制尚不清楚，Ki67作為一種抗原，標記細胞的增殖狀態(tài)，與細胞周期具有相關(guān)性，檢測Ki-67抗原可以了解惡性腫瘤的細胞增殖活性[10]。Ki-67表達覆蓋腫瘤增殖細胞除G0 期外的各個增殖周期。研究顯示Ki-67 基本可以代替PCNA來檢測乳腺癌組織中的增殖細胞。在低分化腺癌組織中Ki-67的表達比中高分化腺癌組織顯著升高。Ki-67與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，提示預(yù)后不良，對乳腺癌的診斷和評價預(yù)后具有重要意義。

在本次研究中，青年乳腺癌患者和中老年乳腺癌患者VEGF、EGFR和Ki-67的表達陽性率比較差異顯著，青年乳腺癌患者的陽性表達率均顯著高于中老年乳腺癌的患者，這可能與青年乳腺癌侵襲性高、轉(zhuǎn)移性強、惡性程度高等相關(guān)。并且隨著腫瘤TNM分期的增加以及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的增加，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達顯著升高，Spearman相關(guān)分析顯示，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有相關(guān)性，并且這種相關(guān)性，青年乳腺癌患者更加顯著。

綜上所述，VEGF、EGFR和Ki-67在青年乳腺癌患者中呈高表達，并且其陽性表達率與患者的TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，對判斷患者的預(yù)后具有一定的意義。

[參考文獻]

[1] Sledge GW Jr. VEGF-targeting therapy for breast cancer[J]. J Mammary Gland Biol Neoplasia，2005，10（4）：319-323.

[2] 周泉，李艷，童永清. 腫瘤基因EGFR檢測方法的研究進展[J]. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（11）：1407-1409.

[3] 張利斌，王平，熊健，等. 非小細胞肺癌中VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3表達與微淋巴管密度的關(guān)系[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013，48（8）： 933-937.

[4] 馬桂芬，繆青，高虹，等. 人上皮生長因子受體2在胃癌發(fā)生發(fā)展中的表達及臨床意義[J]. 中華消化雜志，2012， 32（10）： 703-706.

[5] 徐婷，何奇，吳克瑾，等. 三陰性乳腺癌中p53和Ki67表達的相關(guān)研究[J]. 上海交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2013， 33（6）： 833-837.

[6] 張作文，劉勝春，吳凱南，等. 雌、孕激素受體狀況對青年乳腺癌的遠期預(yù)后價值[J]. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013， 38（1）： 94-97.

[7] 蔣洪棉，朱世龍，李辛辛，等. 三陰性乳腺癌中的VEGF表達及臨床意義[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2013，35（6）：743-744.

[8] 陶黎陽，符立梧. EGFR/HER-2雙受體酪氨酸激酶抑制劑拉帕替尼的研究進展[J]. 中國藥理學(xué)通報，2008，24（12）：1541-1544.

[9] 陸應(yīng)麟. 上皮生長因子受體在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用研究進展[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)情報，1994，8（6）：311-312.

[10] 朱麗萍，王斌，李涌濤，等. 乳腺癌易感基因1、Ki-67在青年乳腺癌患者組織中的表達及其臨床意義[J]. 中華實驗外科雜志，2012，29（5）： 830-832.

（收稿日期：2013-09-13）endprint

2結(jié)果

2.1兩組臨床資料比較

見表1。兩組均以浸潤性導(dǎo)管癌發(fā)病率最高，但中老年組的患者比例更高（P<0.01）。TNM分期：兩組均以Ⅱ期為主，但中老年患者比例更高（P<0.01）。兩組腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)比較差異也有顯著差異（P<0.01）。

2.2兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異

青年組VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率顯著高于中老年組患者（P<0.01或P<0.05）。見表2。

表2 兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達差異[n（%）]

2.3兩組VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的相關(guān)性

VEGF、EGFR和Ki-67的表達與腫瘤TNM分期具有相關(guān)性（P<0.01）。VEGF、EGFR和Ki-67的表達與青年組和老年組腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有顯著的相關(guān)性（P<0.01）。見表3。

3討論

乳腺癌的發(fā)病率有逐漸上升的趨勢，全球大約每年有130萬人被診斷為乳腺癌，其中約40萬患者死于乳腺癌。癌癥的發(fā)生與多種基因異常有關(guān)。青年乳腺癌具有侵襲性強，發(fā)展快、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高等特點，通常預(yù)后不良。青年乳腺癌的這些特點可能與青年女性卵巢功能旺盛，內(nèi)源性雌激素水平影響到了腫瘤的惡性程度、轉(zhuǎn)移性、預(yù)后等[6]。TNM分期根據(jù)原發(fā)腫瘤的范圍、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、遠處臟器轉(zhuǎn)移情況等進行分期，對制定治療方案、評價預(yù)后具有重要的意義。

青年乳腺癌和中老年乳腺癌臨床特征存在一些差異。在本次研究中，中老年患者浸潤性導(dǎo)管癌的比例顯著高于青年乳腺癌患者，而青年乳腺癌患者浸潤性小葉癌和其他類型的癌比例則高于中老年乳腺癌的患者。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，青年乳腺癌患者4個及以上轉(zhuǎn)移比例顯著高于中老年組的患者，也反映了青年乳腺癌患者轉(zhuǎn)移性高等臨床特點。

血管內(nèi)皮生長因子（VEGFs）調(diào)節(jié)血管的發(fā)展，通過結(jié)合到受體數(shù)量的血管生成和淋巴管。受體VEGFR-1是為造血干細胞的招募和單核細胞和巨噬細胞的遷移工作需要，受體VEGFR-2調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能和VEGFR-3的調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細胞的功能。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）作為促血管生長因子，對癌細胞的生長和轉(zhuǎn)移具有重要的意義[7]。VEGF 由8 個外顯子和7 個內(nèi)含子組成，定位于染色體6p21.3，由于外顯子剪切的不同而形成不同的亞型。上皮生長因子受體（EGFR）是c-erbB1原癌基因的表達產(chǎn)物，屬于HER（表皮生長因子受體）家族的成員[8]，對細胞生理過程發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。上皮細胞、膠質(zhì)細胞、成纖維細胞等細胞表面上廣泛分布著EGFR，其對細胞的生長、增殖、分化等生理過程發(fā)揮重要的作用。EGFR功能缺失或信號通路中關(guān)鍵因子活性異?；蛘呒毎ㄎ划惓?，均會導(dǎo)致腫瘤、免疫缺陷等。EGFR表達于正常上皮細胞表面，而在一些腫瘤細胞中常過表達，EGFR的過表達與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、浸潤、預(yù)后差有關(guān)[9]。EGFR下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要有兩條：一條是Ras/ Raf/ MEK/ERK-MAPK 通路，而另一條是PI3K/Akt/mTOR通路。位于胞膜表面的EGFR與配體結(jié)合后激活，從單體轉(zhuǎn)化為二聚體。EGFR在多種實體腫瘤中表達異?；蛘叱矢弑磉_，與腫瘤血管生成、腫瘤細胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、抑制凋亡等相關(guān)。高表達的EGFR導(dǎo)致下游信號傳導(dǎo)作用增強，EGFR突變，配體表達增加，導(dǎo)致EGFR的持續(xù)活化等。膠質(zhì)細胞瘤中基因擴增導(dǎo)致了EGFR的高表達。EGFR的配體通過自分泌形式激活EGFR促進細胞增殖，他們的共表達往往預(yù)示腫瘤預(yù)后不良。EGFR還通過Ang-1和VEGF等調(diào)節(jié)影響腫瘤的血管生成。Ki67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細胞增殖中是不可缺少，但其確切機制尚不清楚，Ki67作為一種抗原，標記細胞的增殖狀態(tài)，與細胞周期具有相關(guān)性，檢測Ki-67抗原可以了解惡性腫瘤的細胞增殖活性[10]。Ki-67表達覆蓋腫瘤增殖細胞除G0 期外的各個增殖周期。研究顯示Ki-67 基本可以代替PCNA來檢測乳腺癌組織中的增殖細胞。在低分化腺癌組織中Ki-67的表達比中高分化腺癌組織顯著升高。Ki-67與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，提示預(yù)后不良，對乳腺癌的診斷和評價預(yù)后具有重要意義。

在本次研究中，青年乳腺癌患者和中老年乳腺癌患者VEGF、EGFR和Ki-67的表達陽性率比較差異顯著，青年乳腺癌患者的陽性表達率均顯著高于中老年乳腺癌的患者，這可能與青年乳腺癌侵襲性高、轉(zhuǎn)移性強、惡性程度高等相關(guān)。并且隨著腫瘤TNM分期的增加以及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)的增加，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達顯著升高，Spearman相關(guān)分析顯示，VEGF、EGFR和Ki-67的陽性表達率與腫瘤TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)具有相關(guān)性，并且這種相關(guān)性，青年乳腺癌患者更加顯著。

綜上所述，VEGF、EGFR和Ki-67在青年乳腺癌患者中呈高表達，并且其陽性表達率與患者的TNM分期和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，對判斷患者的預(yù)后具有一定的意義。

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（收稿日期：2013-09-13）endprint