HPLC法同時(shí)測(cè)定氯雷他定糖漿中氯雷他定和苯甲酸鈉的含量

郭 玉，王瑞梅，吳善霞

（魯南制藥集團(tuán)股份有限公司，山東臨沂276000）

HPLC法同時(shí)測(cè)定氯雷他定糖漿中氯雷他定和苯甲酸鈉的含量

郭 玉，王瑞梅，吳善霞

（魯南制藥集團(tuán)股份有限公司，山東臨沂276000）

目的采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定氯雷他定糖漿中氯雷他定和苯甲酸鈉的含量。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB－pheny（4.6 mm×150 mm，3.5μm）色譜柱，以甲醇－乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5）（15∶10∶75）為流動(dòng)相；流速：1 mL·min－1，檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm，柱溫：30℃。結(jié)果氯雷他定在40.18～140.62μg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r＝0.999 9），苯甲酸鈉在39.94～139.78μg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r＝0.999 9），平均回收率分別為100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）、100.18%（RSD＝0.36%，n＝6）。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于氯雷他定糖漿中氯雷他定和苯甲酸鈉的含量測(cè)定。

高效液相色譜；氯雷他定；苯甲酸鈉；含量測(cè)定

氯雷他定為長(zhǎng)效三環(huán)類抗組胺藥，具有選擇性抗外周組胺H1受體的作用，在治療劑量范圍內(nèi)無(wú)嗜睡作用，可用于緩解過(guò)敏性鼻炎有關(guān)的癥狀，亦適用于緩解慢性蕁麻疹及其他過(guò)敏性皮膚病的癥狀［1，2］。苯甲酸鈉為食品和藥品中的常用防腐劑，被廣泛使用，也為氯雷他定糖漿中的防腐劑，但過(guò)量攝入防腐劑會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的毒性［3～6］，我國(guó)對(duì)食品及口服藥品中苯甲酸及鈉鹽的使用量均有限制，中國(guó)藥典規(guī)定不得超過(guò)0.3%［7］。目前能同時(shí)測(cè)定氯雷他定和苯甲酸鈉含量的方法尚未見(jiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道［8，9］，我們通過(guò)試驗(yàn)建立了同時(shí)測(cè)定氯雷他定糖漿中氯雷他定和苯甲酸鈉含量的HPLC法，并進(jìn)行了方法學(xué)考察研究，本方法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠，重現(xiàn)性好，可作為氯雷他定糖漿的質(zhì)量控制方法之一。

1 儀器與試藥

Agilent1200系列高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司，配四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、VWD檢測(cè)器）；十萬(wàn)分之一電子天平（Mettler Toledo XS205）；氯雷他定對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)食品藥品檢定研究院；批號(hào)：100615－200602）；苯甲酸鈉對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)食品藥品檢定研究院；批號(hào)：100433－200301）；氯雷他定糖漿（魯南貝特制藥有限公司提供，批號(hào)：130901，130902130903）；甲醇（色譜純）；磷酸二氫鉀（分析純）；磷酸（色譜純）；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Zorbax EclipseXDB－pheny（4.6 mm×150 mm，3.5μm）色譜柱；流動(dòng)相：甲醇－乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5）（15∶10∶75）；流速：1.0 mL·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL。理論塔板數(shù)按氯雷他定峰計(jì)算不低于2 000，氯雷他定與苯甲酸鈉的分離度應(yīng)符合規(guī)定。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 取氯雷他定對(duì)照品和苯甲酸鈉對(duì)照品各適量，精密稱定，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋制成每1 mL中約含氯雷他定與苯甲酸鈉均為100μg的混合溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 用內(nèi)容量移液管精密量取本品適量（約相當(dāng)于氯雷他定5 mg），置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.4 陰性空白溶液的制備 用內(nèi)容量移液管精密量取空白糖漿適量（約相當(dāng)于氯雷他定5mg），置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為陰性空白溶液。

照上述色譜條件，分別精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性空白溶液各20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明：理論板數(shù)按氯雷他定峰計(jì)算為9 912，氯雷他定與苯甲酸鈉的分離度為20.39，均符合要求；空白輔料對(duì)二者含量測(cè)定無(wú)干擾。色譜圖分別見(jiàn)圖1－A、圖1－B、圖1－C。

圖1 氯雷他定糖漿含量測(cè)定HPLC圖譜

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取氯雷他定對(duì)照品／苯甲酸鈉對(duì)照品各25 mg，置50 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2、3、4、5、6、7 mL分別置25 mL容量瓶中，用乙腈－水（40∶60）稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定。以濃度C（μg·mL－1）為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得氯雷他定和苯甲酸鈉的回歸方程分別為：A＝30.63C＋9.36（r＝0.999 9）、A＝6.00C＋1.19（r＝0.999 9）。結(jié)果表明氯雷他定和苯甲酸鈉檢測(cè)濃度線性范圍分別為：40.18～140.62μg·mL－1、39.94～139.78μg·mL－1。

2.6 精密度試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，依法測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣6次，以峰面積考察精密度，結(jié)果氯雷他定與苯甲酸鈉峰面積的 RSD分別為0.21%、0.18%。

2.7 溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液，分別在配制后0、1、2、4、6和8 h取樣測(cè)定，氯雷他定與苯甲酸鈉峰面積的RSD分別為0.12%和0.07%，表明溶液至少在8 h之內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 回收率試驗(yàn) 取氯雷他定對(duì)照品／苯甲酸鈉對(duì)照品各約25 mg，共6份，精密稱定，分別置50 mL容量瓶中，按處方量比例加入空白糖漿，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取5 mL，各置25 mL容量瓶中，加乙腈－水（40∶60）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另取氯雷他定對(duì)照品和苯甲酸鈉對(duì)照品各適量，加乙腈－水（40∶60）溶解并稀釋制成每1 mL中約含氯雷他定與苯甲酸鈉均為100μg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。取樣依法測(cè)定并計(jì)算回收率，氯雷他定與苯甲酸鈉的平均回收率分別為100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）、100.18%（RSD＝0.36%，n＝6）。

2.9 定量限與檢測(cè)限 取對(duì)照品溶液，經(jīng)逐步稀釋后測(cè)定，以信噪比S／N≈10時(shí)的濃度為定量限濃度、S／N≈3時(shí)的濃度為檢測(cè)限濃度，結(jié)果顯示：氯雷他定的定量限為2.4 ng，檢測(cè)限為0.8 ng；苯甲酸鈉的定量限為1.6 ng，檢測(cè)限為0.6 ng。

2.10 樣品測(cè)定 取本品3批，按上述方法進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 氯雷他定糖漿含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

苯甲酸鈉在《中國(guó)藥典》2010年版（二部）［7］中有收載，含量采用滴定法測(cè)定，操作比較繁瑣。本品中苯甲酸鈉含量較低，若仍采用滴定法測(cè)定，結(jié)果可能會(huì)有較大誤差，而本試驗(yàn)建立的HPLC法能同時(shí)測(cè)定氯雷他定糖漿中苯甲酸鈉與氯雷他定的含量，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠，專屬性強(qiáng)，可有效控制本品的質(zhì)量。

試驗(yàn)初期曾選用C18柱，分別以甲醇－磷酸鹽緩沖液（色譜圖見(jiàn)圖1－D）以及乙腈－磷酸鹽緩沖液作流動(dòng)相（色譜圖見(jiàn)圖1－E）試驗(yàn)，效果均不理想，苯甲酸鈉由于出峰較快，易受到溶劑峰的干擾。后換用苯基柱，以甲醇－乙腈－磷酸鹽緩沖液作流動(dòng)相試驗(yàn)，峰形良好，且能排除干擾，系統(tǒng)穩(wěn)定，可用于氯雷他定糖漿的質(zhì)量控制。

［1］應(yīng)作霖，吳瑞勤，徐曉寅，等.咪唑斯汀和氯雷他定抗炎作用的比較研究［J］.中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2006，22（5）：377－379.

［2］蔡霞，李桂冬.抗過(guò)敏新藥－地氯雷他定［J］.齊魯藥事，2006，25（6）：382.

［3］呂娜.食品防腐劑苯甲酸鈉的急性毒性及致畸性實(shí)驗(yàn)［J］.毒理學(xué)雜志，2006，20（5）：326－327.

［4］呂娜，沈明浩.食品防腐劑苯甲酸鈉的蓄積毒性及精子毒性研究［J］.毒理學(xué)雜志，2011，25（3）：241－242.

［5］鄒志飛，吳赤蓮，鄭立新，等.苯甲酸鈉的毒性興奮效應(yīng)及其所致?lián)p害［J］.毒理學(xué)雜志，2010，24（4）：300－302.［6］王思文，鞏江，高昂，等.防腐劑苯甲酸鈉的藥理及毒理學(xué)研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（30）：16724，16846.

［7］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（二部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：437.

［8］張帶榮，周利娟.高效液相色譜法測(cè)定氯雷他定糖漿中氯雷他定含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2007，27（9）：1316－1317.

［9］張德強(qiáng)，柯東華，莫祝榮.氯雷他定糖漿含量及有關(guān)物質(zhì)的HPLC測(cè)定［J］.今日藥學(xué)，2011，21（3）：167－169.

Simultaneous determ ination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup by HPLC

GUO Yu，WANG Rui-mei，WU Shan-xia
（Lunan Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Linyi276000，China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the simultaneous determination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup.M ethodsAgilent Zorbax Eclipse XDB－pheny column（4.6 mm×150 mm，3.5μm）was adopted with methanol－acetonitrile－0.05 mol·L－1potassium dihydrogen phosphate（pH was adjusted to 3.5 by phosphate）（15∶10∶75）asmobile phase.The flow rate was 1.0 mL·min－1，the detection wavelength was 254 nm and the column temperaturewas30℃.ResultsThe linear rangeswere40.18～140.62μg·mL－1for loratadine（r＝0.999 9）and 39.94～139.78μg·mL－1for sodium benzoate（r＝0.999 9），the average recoveries were 100.05%（RSD＝0.52%，n＝6）and 100.18%（RSD＝0.36%，n＝6），respectively.ConclusionThemethod was simple，sensitive and accurate，and it can be applied to the concentration determination of loratadine and sodium benzoate in Loratadine Syrup.

HPLC；Loratadine；Sodium benzoate；Determination

R927.2

A

2095－5375（2014）10－0581－003

郭玉，男，研究方向：西藥質(zhì)量控制分析，E－mail：vipguoyu＠163.com