李榮國
貝克曼庫爾特LH750血細胞分析儀HGB的檢測是利用光電比色原理,將HGB Lamp光源透過HGB cuvette比色池,經(jīng)525 nm濾光片,到達HGB preamp光電傳感器,利用吸光度與血紅蛋白的比例關(guān)系,將吸光度轉(zhuǎn)換為電壓信號并進行初級放大,再經(jīng)過COMM INTFC CARD板進行A/D轉(zhuǎn)換,通過分析計算得到血紅蛋白。LH750血細胞分析儀HGB的檢測分4個時序,需要檢測2個讀數(shù)(空白讀數(shù)和樣本讀數(shù)),通過對比2個讀數(shù)的數(shù)值最終計數(shù)出HGB 數(shù)值[1-2]。
(1)時序1——清洗比色池:用WBC計數(shù)池中的稀釋液通過管路清洗HGB比色池,儀器處于樣本吸樣狀態(tài)(introduce sample)。
該時序的工作流程:5 psi(1 psi=6.89 kPa)正壓→MF7分路集合器→VL12D壓管閥→WBC bath白細胞計數(shù)池→VL12B壓管閥→HGBcuvette(1)比色池→HGBcuvette(2)比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶。
時序2——空白讀數(shù)測定:將反沖罐內(nèi)的稀釋液注入HGB比色池,通過光度計檢測比色池中稀釋液的吸光度,進行空白讀數(shù)測定,儀器處于計數(shù)狀態(tài)(counting)。
該時序的工作流程:30 psi正壓→SOL5電磁閥→VC37(1)泡沫收集器→VC37(3)泡沫收集器→backwash tank(1)反沖罐→backwash tank(3)反沖罐→SOL18電磁閥→HGB cuvette(3)比色池→HGB cuvette(4)比色池→VL6壓管閥→VL4A壓管閥→vent。
(3)時序3——排空比色池:空白讀數(shù)測定結(jié)束后,排空HGB比色池中的稀釋液,儀器處于計數(shù)狀態(tài)(counting)。
該時序的工作流程:5 psi正壓→MF7分路集合器→VL6壓管閥→HGB cuvette(4)比色池→HGB cuvette(2)比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶。
(4)時序4——樣本讀數(shù)測定:HGB比色池與WBC計數(shù)池在同一個通道上,當(dāng)溶血劑、稀釋液、樣本同時進入WBC計數(shù)池中時,利用溶血劑破壞RBC、RBC內(nèi)的血紅蛋白與溶血劑反應(yīng)生成顏色穩(wěn)定的氰化高鐵氧合物,其顏色與HGB的含量成正比,當(dāng)WBC計數(shù)池中的樣本排入HGB比色池后,利用吸光度與血紅蛋白的比例關(guān)系進行樣本讀數(shù)測定,儀器處于分析狀態(tài)(analyzing)。
該時序的工作流程:5 psi正壓→MF7分路集合器→VL12D壓管閥→WBC bath→VL12B壓管閥→HGB cuvette(1)→HGB cuvette(4)→VL6 壓管閥→VL4A壓管閥→vent。
現(xiàn)將血細胞分析儀HGB常見故障的分析處理介紹如下,供參考。
(1)首先進入菜單 main menu→analyzer function→HGB readings(blank)&sample voltages,如果發(fā)現(xiàn)HGB的blank值低于7.5 V,則在analyzer菜單中選擇 main menu→analyzer function→HGB lamp adjust,調(diào)整到 7.5~9.5 V,故障排除。
(2)觀察RBC稀釋液泵的動作,如果發(fā)現(xiàn)泵內(nèi)有氣泡冒上來,則查看WBC計數(shù)池的液面在WBC計數(shù)時是否慢慢的升高。在WBC計數(shù)時,分血片處于交叉沖洗狀態(tài),RBC稀釋液泵與WBC計數(shù)池相連,此時RBC稀釋液泵底部的30 psi壓力將泵中的稀釋液推到WBC計數(shù)池中,使WBC計數(shù)池中的樣本被稀釋,我們可以觀察到WBC計數(shù)池的液面在WBC計數(shù)時會慢慢的升高。由于這部分慢慢升高的稀釋液沒有與原來的樣本進行充分混合,因此出現(xiàn)WBC的結(jié)果變化不大,HGB的結(jié)果明顯偏低。更換RBC稀釋液泵泵膜后,故障排除。
(3)觀察HGB比色池在測定樣本讀數(shù)時,從HGB cuvette(2)比色池→VL4A壓管閥→VC11廢液瓶這段管子,正常應(yīng)該是先有液體,然后是空氣,但故障時筆者發(fā)現(xiàn)這段管子都是液體。檢查發(fā)現(xiàn)VL4A壓管閥中工字管被壓扁,更換壓扁工字管,故障排除。
(4)仔細觀察HGB比色池在空白讀數(shù)與樣本讀數(shù)時的液面情況,如果HGB比色池的液面在時序2和時序4的工作狀態(tài)下都出現(xiàn)緩慢上升現(xiàn)象,這說明SOL18電磁閥關(guān)閉不嚴(yán),使反沖罐內(nèi)的稀釋液漏到HGB比色池中,造成樣本被稀釋。更換SOL18電磁閥,故障排除。
(5)管路脫落也會造成HGB分析結(jié)果偏低。筆者常見VC37泡沫收集器(2)端口的堵頭脫落,觀察HGB空白讀數(shù)時,反沖罐內(nèi)的稀釋液沒有完全進入HGB比色池,HGB比色池中液體會比較少,空白讀數(shù)測定偏低,其HGB結(jié)果也會偏低,而且VC37泡沫收集器(2)端口的堵頭脫落,在自動進樣時會報警“aspiration C”,進行相應(yīng)處理后,故障排除。
首先觀察WBC計數(shù)池和RBC計數(shù)池,在WBC樣本計數(shù)時,樣本、稀釋液、溶血劑分別進入WBC計數(shù)池并伴隨混勻氣泡注入后,WBC計數(shù)池的液面會明顯低于3個寶石孔墊圈位置,由于WBC計數(shù)池和HGB比色池在同一液路上,故又分2種情況:(1)查看WBC稀釋液泵,如果WBC稀釋液泵有氣泡,則說明稀釋液泵破膜。更換稀釋液泵膜,故障排除。(2)觀察分血片動作是否錯位,如果發(fā)現(xiàn)WBC稀釋液泵沒有將6 mL稀釋液全部推到WBC計數(shù)池中,筆者建議將清洗分血片全部拆開并逐片清洗,裝上后故障排除。
此故障比較復(fù)雜,筆者首先需要連續(xù)觀察10個以上進入HGB比色池中的樣本情況,并記錄比色池液面情況:
(1)如果發(fā)現(xiàn)HGB比色池在樣本讀數(shù)測定時液面忽高忽低,一般是由于SOL18電磁閥滲漏引起,更換電磁閥,故障排除。
(2)如果發(fā)現(xiàn)樣本進入HGB比色池前,HGB比色池有時排空有時沒有完全排空,一般是VL4A壓管閥動作偏慢,VL4A壓管閥工字管被壓扁,更換工字管,故障排除。
(3)還有一種可能是WBC計數(shù)池樣本計數(shù)時液面忽高忽低,主要是WBC計數(shù)池排廢液的管路有問題,VL12B壓管閥工字管被壓扁,更換VL12B壓管閥工字管,故障排除。
(1)首先查看HGB的空白電壓情況,進入菜單main menu→analyzer function →HGB readings(blank)&sample voltages,如果發(fā)現(xiàn)HGB的blank值低于7.5 V,則在analyzer菜單中選擇main menu→analyzer function→HGB lamp adjust,使其值在8.5 V左右,如不能調(diào)到7.5~9.5 V,則analyzer會提示“HGB lamp adjust out of range”。一般有2種情況:①燈泡老化。更換燈泡,故障排除。②比色光路臟。如果反沖罐內(nèi)的稀釋液進入比色池后變渾濁,則說明光路有臟東西。拆開比色池旁邊燈泡插座,用擦鏡紙擦拭光路后可修復(fù)。
(2)檢查HGB比色池?zé)襞?,如果發(fā)現(xiàn)HGB Lamp燈泡忽明忽暗,則說明燈泡的電源線接觸不良。筆者采用清理腐蝕線路后直接焊接的方式排除此故障。
(3)觀察測定空白讀數(shù)時,如果稀釋液上升偏慢,則說明與HGB比色池連通外界的回路有故障,一般是HGB比色池(4)號端口有些堵,清除堵塞管子垃圾,故障可排除。
(4)觀察空白讀數(shù)測定時如果HGB比色池內(nèi)的液體有明顯氣泡或在沸騰,可以肯定有30 psi正壓氣體進入HGB比色池內(nèi),根據(jù)經(jīng)驗,從VL4A壓管閥到VC11排廢池的單向閥很可能損壞,更換單向閥,故障排除。
(5)與VL12D壓管閥相連的氣阻有問題。觀察樣本讀數(shù)測定時樣本從WBC計數(shù)池排入HGB比色池時的流速偏快,在比色池中產(chǎn)生了一些氣泡,使樣本讀數(shù)結(jié)果偏離。進行相應(yīng)調(diào)整后,故障排除。
[1]張振光.LH750/GENS儀器檢測HGB原理及常見故障分析[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備,2009,30(11):128-129.
[2]王明利.LH500血細胞分析儀故障檢修[J].生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)進展,2011,32(3):182-184.