王彬，董慧，蔣玉蘭，劉婧

（中華全國供銷合作總社杭州茶葉研究院,浙江省茶資源跨界應用技術(shù)重點實驗室，浙江杭州 310016）

核桃樹或榿木與茶樹間作對茶葉主要生化成分的影響

王彬*，董慧，蔣玉蘭，劉婧

（中華全國供銷合作總社杭州茶葉研究院,浙江省茶資源跨界應用技術(shù)重點實驗室，浙江杭州 310016）

為提高經(jīng)濟收益，云南一些地區(qū)茶農(nóng)自發(fā)嘗試了核桃樹與茶樹間作或榿木與茶樹間作兩種間作模式。為了探究這兩種間作模式對茶葉品質(zhì)的影響，本研究采集了當?shù)?個基地的"云抗10號"茶葉樣品，以非間作純茶園為對照，分析了間作條件下茶葉主要生化成分的變化，以期對當?shù)夭鑸@管理提供指導。結(jié)果表明：不同間作模式對水浸出物、茶多酚及兒茶素總量無顯著影響，但與對照相比，間作可顯著降低粗纖維含量，提高咖啡堿、葉綠素、游離氨基酸含量，改善茶葉品質(zhì)，降低酚氨比，利于改善綠茶品質(zhì)，提高茶葉的適制性。間作模式有一定推廣借鑒意義。

核桃樹-茶樹間作，榿木-茶樹間作，云南大葉茶，影響

云南是我國最為重要的茶葉產(chǎn)區(qū)之一，出產(chǎn)的滇紅、普洱等在國內(nèi)外享有盛譽。2012年云南省茶園面積居全國首位，但茶葉總產(chǎn)量、產(chǎn)值不高[1]。大葉種茶樹（Camellia sinensis）“云抗10號”是云南省農(nóng)科院茶葉研究所1985年選育的第1批4個喬木系良種中的一個，1987年被全國茶樹良種審定委員會認定為國家級良種，也是云南省重點推廣的品種。目前“云抗10號”大葉種茶的推廣種植面積已達15萬公頃，是云南種植面積最大的茶樹品種。

雖然云南省茶園面積遼闊，但一些茶園還普遍存在低產(chǎn)低質(zhì)茶園過多、規(guī)劃不科學、生態(tài)環(huán)境惡化、管理模式較落后等問題。茶業(yè)是對資源環(huán)境依賴性相當強的產(chǎn)業(yè)，對茶園的管理有較高要求。為了增加作物品種、提高經(jīng)濟收益，云南的一些茶園內(nèi)出現(xiàn)了間作核桃樹、榿木的嘗試。林茶間作在世界范圍內(nèi)都有廣泛研究，且不同的間作樹木對茶園的土壤肥力、植物養(yǎng)分、茶葉產(chǎn)量等會產(chǎn)生不同的影響[2-3]。目前研究較多的間作模式如橡膠與茶樹間作[4]、柿子樹與茶間作[5]等，但是關(guān)于核桃樹、榿木與茶間作的研究報道較少。云南地區(qū)自發(fā)出現(xiàn)的這兩種間作模式缺乏科學的栽種技術(shù)及管理方式，且這兩種間作對茶葉品質(zhì)的影響尚不明確，難以對其進行評價和科學的茶園管理指導。本文研究了該地區(qū)核桃樹或榿木與茶樹間作對茶葉內(nèi)質(zhì)品質(zhì)的影響，為立體生態(tài)茶園建設及適制性茶產(chǎn)品的開發(fā)提供幫助。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

福林酚試劑、水合茚三酮、谷氨酸、咖啡堿標準品等，均為分析純試劑；Waters高效液相色譜儀、UV-2100型紫外可見分光光度計、SX2-12-10高溫電阻爐等。

1.2 采樣及炒青茶樣的制備

本研究選擇云南省的四個鄉(xiāng)鎮(zhèn)茶園為采樣基地，并分別編號為A、B、C、D。試驗茶園坡度約5°～10°，紅黃壤，土壤pH值為5.5～6.5，園內(nèi)通風、透光性良好，周圍生態(tài)環(huán)境良好。茶園中均種植“云抗10號”無性系良種，種植方式采用雙行條植，大行距2m，小行距40cm，種植密度為25500株/公頃。四個采樣基地中均有純茶樹單作、茶樹-核桃樹間作、茶樹-榿木間作三種模式，茶樹、核桃樹、榿木生長良好；土壤肥力和植株長勢較一致，采樣情況見表1。

表1 采樣情況記錄表Table 1 The sampling record

分別于2013年4月14日至4月16日，在四個基地的單作純茶園、茶樹-核桃樹間作、茶樹-榿木間作茶園隨機采10個30cm的茶梢，采摘后立即進行微波高火殺青、60℃烘箱烘干，用植物粉碎機粉碎，再通過40目國家標準篩、封存，用于主要生化成分分析。

1.3 主要試驗方法

茶葉中水浸出含量的測定參照國標 GB/T 8305-2002；粗纖維含量的測定參照國標GB/T 8310-2002；茶多酚含量的測定參照國標GB/T 8313-2008；兒茶素類及咖啡堿含量的測定參照ISO 14502-2；葉綠素含量的測定采用混合液法測定葉綠素含量[6]；游離氨基酸含量的測定參照國標GB/T 8314-2002。

結(jié)果采用SPSS 19.0以EXCEL分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 間作對茶葉水浸出物、兒茶素及茶多酚總量的影響

茶的水浸出物是成品茶質(zhì)量的綜合性指標，對茶葉的滋味有明顯影響。一般來說成品茶質(zhì)量越好，水浸出物含量越高[7]。而茶多酚是茶葉中最重要的一類物質(zhì)，與茶樹的生長發(fā)育、新陳代謝、茶葉品質(zhì)密切相關(guān)，除了顯著的抗氧化活性，近年來茶多酚的抗炎、防齲齒等功效也收到了廣泛的關(guān)注[7]。對不同分組采摘的茶樹鮮葉制得干茶中水浸出物、茶多酚含量，以及兒茶素總量的測定結(jié)果如表2所示。

表2 間作對茶葉中兒茶素、茶多酚總量及水浸出物含量的影響Table 2 Effects of intercrop on water soluble extracts,tea polyphenol,and catechin in tea

結(jié)果表明，所采樣品的水浸出物含量高于常見綠茶，但在統(tǒng)計學上間作組與對照組差異不顯著。這可能與茶葉水浸出物含量高、成分復雜有關(guān)；同時也可說明間作對茶葉水浸出物含量影響不明顯。純茶園樣品中茶多酚由高到低依次為CK-D＞CK-B＞CK-C＞CK-A，但含量均在25%以上；基地B的榿-茶間作采制茶葉的茶多酚含量比對照低，核-茶間作采制的茶葉，在基地A、C中茶多酚含量比對照高，在基地B、D中茶多酚含量比對照低，其他各組均無明顯差異。總體上核-茶、榿-茶間作對茶多酚總量變化影響無明顯規(guī)律。

純茶園樣品中兒茶素總量與茶多酚含量的變化規(guī)律一致；僅基地D中采制的茶葉兒茶素總量明顯比對照低，其他三個基地中兩種間作組與純茶園對照組相比差異不顯著?？傮w上，間作對兒茶素總量的影響無明顯規(guī)律。

所測樣品茶多酚含量高，也是“云抗10號”適制紅茶、普洱茶的基礎。茶多酚對茶葉品質(zhì)的影響復雜，且與茶葉的適制性密切相關(guān)。通常茶樹遇強光和日照量增大，碳素的同化量升高，茶葉中的茶多酚、兒茶素含量會明顯增加，因此遮陰會降低茶多酚、兒茶素含量[8]。但我們的研究中并未發(fā)現(xiàn)間作有明顯的降低茶多酚的作用。分析認為茶葉中茶多酚的含量受多種因素的影響，且間作不等同于簡單的遮陰，會影響到茶園的溫度、濕度、土壤條件等因素，仍需進一步探索。

2.2 間作對茶葉粗纖維含量影響

茶葉中粗纖維的含量可反映出茶葉的嫩度，是評價茶葉質(zhì)量的標準之一[9]。測定所采樣品的粗纖維含量，結(jié)果如圖1。

根據(jù)圖1，四個基地純茶園組樣品的粗纖維含量除CK-A組外，其余均不超過10.5%，柔嫩度好，粗纖維含量由高到低依次為CK-A＞CK-B＞CK-C≥CK-D；與對照相比，間作茶園中樣品的粗纖維的含量較低。分析認為是由于間作條件下，隨遮蔭時間的加長，茶樹對遮陰水平逐步適應，粗纖維含量的減少量逐漸趨于穩(wěn)定。

圖1 間作對茶葉粗纖維含量影響Fig.1 Effect of intercrop on crude fiber

2.3 間作對咖啡堿含量影響

咖啡堿也是茶葉中的特征性成分之一。茶葉的功能性物質(zhì)的研究大多集中在兒茶素類上，但目前也有研究表明，茶葉顯著的抗氧化、抗菌活性與咖啡堿和咖啡堿及兒茶素的相互作用密切相關(guān)[10]。此外咖啡堿在紅茶中與茶多酚結(jié)合形成茶湯的“冷后渾”現(xiàn)象，是優(yōu)質(zhì)紅茶的標志；在綠茶中與氨基酸、茶多酚結(jié)合形成茶湯滋味濃度及鮮爽度[11]，在一定范圍內(nèi)咖啡堿含量與茶葉品質(zhì)呈顯著正相關(guān)。采用HPLC法測定茶葉樣品中的咖啡堿，結(jié)果如圖2。

圖2 間作對茶葉咖啡堿含量影響Fig.2 Effect of intercrop on caffeine

所測樣品的咖啡堿含量均在3%以上，純茶園樣品中咖啡堿含量由大到小依次為CK-D＞CK-B＞CK-C＞CK-A；間作組茶葉中的咖啡堿含量普遍高于對照組，間作后B、C兩基地茶葉咖啡堿的含量均可達到基地D的水平；除基地C表現(xiàn)出榿-茶間作組咖啡堿含量高于基地C內(nèi)的其他兩組，差異顯著；其他基地核-茶間作與榿-茶間作兩種間作模式制得的茶葉咖啡堿含量差異并不明顯，兩種間作方式效果相當；基地D中三組均無明顯差異，分析可能是咖啡堿的合成已接近最大水平，改變環(huán)境已經(jīng)難有提高。

2.4 間作對葉綠素含量影響

茶葉中葉綠素總量依品種、季節(jié)、成熟程度等不同差異較大。一般而言，葉色黃綠的大葉種含量較低，葉色深綠的小葉種含量較高。采用混合液浸提比色法測定所采樣品的葉綠素含量，結(jié)果圖3。

圖3 間作對茶葉葉綠素含量的影響Fig.3 Effect of intercrop on chlorophyll

對茶園進行遮陰可增加茶樹的日平均凈光合速率與葉綠素總量[12]。從圖3中可以看出，四個基地的純茶園樣品的葉綠素含量均在1.65mg/g左右；核-茶間作組中葉綠素的含量明顯高于純茶園對照組，榿木與茶樹間作對采制茶葉的葉綠素含量的影響不大，可能與榿木對茶樹的遮光效果也不及核桃樹有關(guān)，這也說明光照是影響葉綠素合成重要因素。

2.5 間作對游離氨基酸含量的影響

茶葉中的游離氨基酸是構(gòu)成茶葉鮮爽香味的重要物質(zhì)之一，可緩解茶的苦澀味，與綠茶滋味等級呈強烈正相關(guān)，對茶葉品質(zhì)影響較大[13]。對所采樣品的游離氨基酸總量進行測定，結(jié)果如圖4。

圖4 間作對游離氨基酸含量的影響Fig.4 Effect of intercrop on amino acid total quantity

四個采樣基地的純茶園中茶葉的游離氨基酸含量較低；榿-茶間作組中的游離氨基酸的含量明顯高于純茶園的對照組，且差異極顯著，其中基地C與對照相比提高了42.2%；核-茶間作組與純茶園的對比中，B、D兩個基地的間作組制得的茶葉游離氨基酸含量顯著高于對照組，A、C基地無顯著差異；總體上榿-茶間作效果優(yōu)于核-茶間作，除了基地D中核-茶間作效果更佳，可能與茶園具體環(huán)境有關(guān)。

通常認為遮陰可降低茶樹體內(nèi)游離氨基酸的分解，有利于氨基酸的積累。我們的研究中，榿木的遮陰效果雖不及核桃樹，但榿-茶間作對提高茶葉中游離氨基酸的總量更為有利，分析認為是間作對土壤環(huán)境產(chǎn)生了影響。土壤條件是影響茶葉中氨基酸合成的重要因素，其作用可能在特定階段大于光照的影響。榿木的根系上含有內(nèi)生根瘤，內(nèi)有固氮菌，可提高土壤的含氮量，榿木在速生豐產(chǎn)林業(yè)中的應用是當前的研究熱點之一[14]。榿-茶間作可通過提高土壤含氮量間接提高茶樹對氨基酸的同化能力，促進其合成。

3 結(jié)論

核-茶間作與榿-茶間作對茶葉水浸出物、茶多酚、兒茶素含量無顯著影響；兩種間作方式均可在一定程度上提高茶葉中游離氨基酸總量及葉綠素含量，提高“云抗10號”大葉茶的適制性，對開發(fā)大葉種名優(yōu)綠茶有重要意義。核茶-間作與榿-茶間作均有一定的借鑒推廣意義。

[1] 農(nóng)業(yè)部種植業(yè)管理司.2012年全國茶園面積、產(chǎn)量、產(chǎn)值統(tǒng)計[J].茶葉科學,2013,(3):267.

[2]COSTAWAJMDandSURENTHRAP.Tree-cro p Interactions in Hedgerow Intercropping with Different Tree Species and Tea in Sri Lanka:1.Production and Resource Competition[J].Agroforestry Forum,2005,(63):199-209.

[3]COSTA W A J M D,SURENTHRA P,ATTANAYAKE K B.Tree-crop Interactionsin Hedgerow Intercropping with Different Tree Species and Tea in Sri Lanka:2.Soil and Plant Nutrients[J].Agroforestry Forum,2005,(63):211-218.

[4] GUO Z,ZHANG Y,Deegen P,et al.Economic Analyses of Rubber and Tea Plantations and Rubber-tea Intercropping in Hainan,China[J].Agroforestry Systems,2006,(66):117-127.

[5] ZHU H,LIU Z,WANG C,et al.Effects of Intercropping with Persimmon on the Rhizosphere EnvironmentofTea [J]. Frontiers of Biology in China,2006,(4):407-410.

[6] 陳福明,陳偉順.混合液法測定葉綠素含量的研究[J].林業(yè)科技通訊,1984,(2):19-24.

[7] SHARANG A B.Medicinal and therapeutic potentialities of tea (Camellia sinensisL.)–A review [J].Food Research International,2009,(42):529-535.

[8] 宛曉春.茶葉生物化學[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2003.

[9]SMIECHOWSKA M,DMOWSKI P.Crude Fiber as a Parameter in the Quality Evaluation of Tea[J].Food Chemistry,2006,94 (3):366-368.

[10]MICHALOWSKA A G.Caffeine in TeaCamellia sinensis—Content,Absorption,Benefits and Risks of Consumption[J].The Journal of Nutrition,Health & Aging,in press,DOI:10.1007/ s12603-013-0404-1.

[11]李家賢,黃華林,何玉媚,等.高咖啡堿茶樹品種生物學性狀及生化品質(zhì)特征研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學,2010,(3):65-68.

[12]舒華,王盈峰,張士康,等.遮蔭對茶樹新梢葉綠素及其生物合成前體的影響[J].茶葉科學,2012,32(2):115-121.

[13]黃本芬,呂小艇,何正秀.改進茶葉中游離氨基酸總量測定方法[J].食品發(fā)酵與科技,2012,48(2):94-96.

[14]URIV L,LOHNMUS K,MANDER U,etal.Long-term Effects on the Nitrogen Budget of a Short-rotation Grey Alder (Alnus incana (L.)Moench)Forest on Abandoned Agricultural land[J].Ecological Engineering,2011,(37):920-930.

Effect of Intercropping with Walnut Tree or Alder Tree in Tea Garden to the Main Biochemical Components of Tea

WANG Bin*,DONG Hui,JIANG Yu-lan,LIU Jing
(Hangzhou Tea Reserch Institute,CHINA COOP,Zhejiang Provincial Key Lab of Tea Resources Cross-Boundary Application and Technology,Hangzhou 310016,China)

In the hope of increasing income,some tea growers in Yunnan Province tried to intercrop with Alder tree or walnut tree.In order to investigate the effects of the two kinds of intercropping varieties of trees on tea quality,tea leaf samples from 4 different sampling bases were collected and the variations of main biochemical components of tea cultivar “Yunkang No.10”were analyzed in comparison with nonintercrop tea plantation.The results showed that intercrop had no significant effects on water soluble extracts, tea polyphenol,and catechin.The intercrop reduced the crude fiber,but increased the content of chlorophyll, caffeine,and amino acid total quantity of green tea significantly.So the ratio of polyphenol and amino acid was low,which benefits to improve the quality of green tea and the processing property of fresh tea leaves. In conclusion,the two intercrop patterns are significance to spread.

Intercrop tea and Walnut tree,Intercrop tea and Alder tree,Yunnan large leaf tea,Effect

S571.1

：A

2095-0306（2014）01-0029-06

中國茶葉加工 2014，（1）:29～34

2013-12-05

王彬（1980-），男，河南正陽人，副研究員，博士，研究方向為茶資源多元化利用。

*通訊作者：teaprotein@163.com