彭 程郭青春

1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，長沙410128；2.懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物科技系，湖南懷化 418000

中草藥復(fù)方劑提取物對蛋雞卵巢氧化損傷保護研究

彭 程1郭青春2

1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，長沙410128；2.懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物科技系，湖南懷化 418000

隨著人們對動物食品安全的渴求，中草藥作為畜禽飼料添加劑越來越被人們關(guān)注，本研究為探討中草藥復(fù)方劑提取物對蛋雞卵巢氧化損傷的保護作用及機制，選擇同批次羅曼粉蛋雞60只，分成每日飲用蒸餾水的空白組、模型組和每日飲用中草藥復(fù)方劑提取物的試驗組。除空白組腹腔注射生理鹽水外，其余2組腹腔注射等量四氯化碳。飼喂1周后將羅曼粉蛋雞處死取卵巢器官，檢測卵巢組織中的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)中草藥復(fù)方劑提取物治療后的試驗組，卵巢組織中的GSH-PX、SOD活性、MDA含量接近空白組；與模型組比較GSH-PX、SOD活性顯著增高（<0.01），MDA含量明顯降低（<0.05）；試驗說明中草藥復(fù)方劑提取物對蛋雞卵巢組織氧化損傷具有一定的抗氧化作用。

中草藥復(fù)方提取物；羅曼粉蛋雞；GSH-PX；SOD；MDA；抗氧化性

21世紀人類渴望健康長壽，渴求綠色安全食品。對于動物性食品的安全，首先是飼料的安全，飼料的核心是飼料添加劑，其含量、配合比和質(zhì)量直接影響畜禽飼料利用率和生產(chǎn)性能，是發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)的關(guān)鍵。長期以來飼料添加劑中的抗生素，長期應(yīng)用于飼養(yǎng)動物產(chǎn)生抗藥性和藥物殘留問題，嚴重地危害到人類健康。尋找無公害、無殘留，既能促進動物生長，又能改善動物性食品品質(zhì)的綠色飼料添加劑已經(jīng)成為國內(nèi)外近些年來研究的熱點。中草藥憑借原料來源廣泛、不易產(chǎn)生藥物殘留、抗藥性等優(yōu)點，成為替代抗生素作為飼料添加劑的研究越來越受科研工作者的關(guān)注[1]。本試驗研究利用四氯化碳（CCl4）構(gòu)造蛋雞卵巢氧化損傷模型，通過中草藥復(fù)方劑提取物的1周治療，測定卵巢組織中的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性和丙二醛（MDA）含量變化，觀察中草藥復(fù)方劑提取物對蛋雞卵巢組織抗氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的影響，從而探討中草藥對動物機體抗氧化保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

羅曼粉蛋雞，30日齡60只，湖南正大畜禽有限公司懷化分公司提供。

1.2 實驗藥品

GSH-PX、SOD、MDA試劑盒；四氯化碳為國產(chǎn)分析純；中草藥復(fù)方劑提取物；均由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院提供。

1.3 實驗方法

羅曼粉蛋雞飼養(yǎng)在青年蛋雞場內(nèi)（溫度控制在21～24℃內(nèi)），先用正大公司小雞料正常喂養(yǎng)3 d后，把蛋雞隨機分為3組：空白組、模型組、中草藥試驗組。試驗處理：模型組、中草藥試驗組腹腔內(nèi)注射CCl4溶液（1.0 mL/kg）；空白組腹腔注射等量生理鹽水。各組腹腔注射6 h后，中草藥試驗組灌喂中草藥復(fù)方提取物溶液（300 mg/kg），空白組、模型組灌喂等容積滅菌生理鹽水，以上各組每天灌喂2次，連續(xù)1周。試驗在1周后將全部蛋雞頸部放血處死，迅速取卵巢1 g，在冰冷的生理鹽水中漂洗，濾紙拭干，組織勻漿器制成10%組織勻漿，3 000 r/min，離心15 min，取上清液，用于生化指標(biāo)GSH-PX、SOD、MDA檢測。

1.4 指標(biāo)檢測

按所提供的試劑盒說明書測定卵巢中的GSHPX、SOD活性、MDA含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)分析采用DPS統(tǒng)計軟件處理。

表1 蛋雞卵巢中GSH-PX、SOD活性和MDA含量的檢測結(jié)果

2 結(jié)果與分析

中草藥復(fù)方劑提取物對致蛋雞卵巢氧化損傷組織中的GSH-PX、SOD活性和MDA含量的影響如表1所示。

由表1結(jié)果可見，模型組GSH-PX、SOD活力均明顯低于空白組，數(shù)據(jù)差異有顯著意義（<0.05）；MDA含量高于空白組（<0.05）證明本次試驗建模是成功的。中藥組GSH-PX活力明顯高于模型組，數(shù)據(jù)差異有顯著意義（<0.01）。中藥組SOD活力明顯高于模型組，數(shù)據(jù)差異有顯著意義（<0.01），且接近空白組。中藥組MDA含量都顯著低于模型組（<0.05）。

3討 論

中藥來源于植物、動物、礦物及其產(chǎn)品，作為飼料添加劑具有營養(yǎng)和藥物的雙重作用[1]。中藥含有豐富的氨基酸、維生素、微量元素及未知生長調(diào)節(jié)因子，能夠直接促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用，其所含的生物堿、多糖、揮發(fā)油、鞣質(zhì)、有機酸等生物活性物質(zhì)，通過其機體自身的整體調(diào)整以改善生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)，促進卵泡發(fā)育，調(diào)節(jié)子宮收縮，利于產(chǎn)蛋，保證和提高機體生產(chǎn)機能[2]。另外，申瑞玲等的研究中以滋陰強壯、消食利膽為主的方劑，以溫腎壯陽、健胃消食為主的方劑，結(jié)果表明能改善雞的抗氧化能力，促進了飼料中營養(yǎng)成分的吸收利用，使雞產(chǎn)蛋率顯著增加[3]。

四氯化碳常用于建立機體氧化損傷模型，它的制病機制為在機體內(nèi)經(jīng)微粒體細胞色素P450分解活化，形成三氯甲基自由基 （CCl3·）和氯自由基（Cl·），導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化。由脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強而抗氧化能力下降，導(dǎo)致自由基生成增加，通過氧化細胞膜脂質(zhì)，使細胞結(jié)構(gòu)和功能受到損害[4]。

本次提供的中草藥復(fù)方劑提取物主要成分為黃酮類物質(zhì)?，F(xiàn)已證明它是許多中草藥的有效成分，黃酮類化合物具有抗癌、抗病毒、抗菌、抗黃、抗過敏、抗血管脆性等多種生理活性與藥理作用，而這些生理活性是以黃酮類化合物的抗氧化活性為基礎(chǔ)的[5]。灌服了中草藥復(fù)方劑提取物治療的試驗組蛋雞機體清除自由基的能力提高，也增強了抗脂質(zhì)氧化和細胞膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性。并可抑制MDA在卵巢內(nèi)蓄積，提高SOD、GSH-PX活力的含量從而抑制自由基的產(chǎn)生，說明中草藥復(fù)方提取物通過提高機體抗氧化能力，對卵巢組織的氧化損傷有保護作用，提高了蛋雞的免疫能力。

[1] 胡元亮.中藥飼料添加劑的開發(fā)與應(yīng)用[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：1.

[2] 李立順，時維靜，張松杰.柴芪散對蛋雞生產(chǎn)性能的影響[J].中國家禽，1999，21（5）：104-107.

[3] 申瑞玲，王俊東.中草藥添加劑對蛋雞抗氧化作用及生產(chǎn)性能的影響[J].中國獸醫(yī)科技，2002，30（5）：27-29.

[4] 李素婷，楊鶴酶，石艷華，等.黃芩莖葉總黃酮對CCL4小鼠急性肝損傷的保護作用[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，20（4）：293-294.

[5] CAO G H，SOFIC E.Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids structure-activity relationships[J].Free Radical Bidogy Medicine，l997，22（5）：749.

2014-10-27

彭程，男，1982年生，在讀研究生。