藍小林吳偉李金偉劉聯(lián)斌周茂華曾國興

金龍膠囊對鼻咽癌患者放療期間免疫功能的影響

藍小林1吳偉2李金偉2劉聯(lián)斌3周茂華3曾國興1

目的觀察金龍膠囊對鼻咽癌患者放療期間免疫功能的影響。方法將40例初治鼻咽癌患者隨機分為治療組20例,接受常規(guī)放療加口服金龍膠囊；對照組20例，僅接受單純常規(guī)放療。于放療前及放療結束時以流式細胞術檢測患者外周血淋巴細胞和自然殺傷細胞，比較兩組結果差異。結果放療結束時，治療組和對照組CD4/CD8、CD19均值均比放療前降低（P＜0.05），但治療組較對照組下降幅度?。≒＜0.05），CD56變化組間差異不大（P＞0.05）。結論 金龍膠囊可以減緩鼻咽癌患者放療期間的免疫功能下降水平，尤以CD4/CD8和CD19明顯。

鼻咽癌；放射療法；免疫功能；金龍膠囊；療效

惡性腫瘤患者免疫功能是削弱的，T淋巴細胞亞群及NK細胞是評價人體細胞免疫功能的重要指標，B淋巴細胞是評價人體體液免疫功能的指標，放療可加劇由癌癥誘發(fā)的低免疫功能，而細胞免疫功能與患者的預后密切相關[1,2]。放療是鼻咽癌的主要治療手段，放療通過射線殺滅腫瘤細胞使患者得到康復，但又有可能抑制機體的免疫功能，造成不能完全被消滅的腫瘤細胞重新生長，導致腫瘤的復發(fā)和/或轉(zhuǎn)移。金龍膠囊是以鮮活藥用動物為原料，運用低溫冷凍及現(xiàn)代生化技術分離提取工藝制備而成的現(xiàn)代中藥，具有抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)雙重作用。本文通過流式細胞儀檢測鼻咽癌患者放療前后T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞及NK細胞的變化，以了解金龍膠囊對鼻咽癌放療免疫功能狀況的影響。

資料與方法

1 臨床資料

2012年1月～2012年6月來本院就診的隨機抽取的40例初治鼻咽癌患者，均經(jīng)病理確診為鼻咽未分化型非角化性癌，其中男23例，女17例；I期7例，II期15例，III期14例，IV期4例。年齡32～67歲，中位年齡47.5歲。將40例初治鼻咽癌患者隨機分為兩組:治療組20例,常規(guī)放療加放療期間口服金龍膠囊（北京建生藥業(yè)有限公司，國藥準字Z10980041，規(guī)格0.25g×30粒）1.0g（4粒），3次/ d，口服；對照組20例，單純常規(guī)放療。放療前及放療后收集標本，采用流式細胞術檢測T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞及NK細胞。

2 儀器和試劑

美國BD公司FACSCalibur流式細胞儀，用標準熒光微球校正光電倍增管(PMT)電壓，建立熒光補償,檢查儀器靈敏度，使流式細胞儀處于最佳工作狀態(tài)；美國BD公司配套四色試劑MUltiTESTTM IMK.KIT，貨號：340503。

3 樣本制備與檢測。

3.1 所有樣品按照要求采集外周靜脈血2ml，EDTA-K2抗凝，均在采樣48h內(nèi)完成檢測。

3.2 在檢測管中準確加入20μlMultiTEST四色試劑和50μl全血，充分混勻后置室溫陰暗處15 min。加入450μl FACS溶血劑(1x),充分混勻后室溫陰暗處15min。

3.3 標本制備后立即上機運行MultiTEST程序檢

測。

3.4 每次檢測均使用質(zhì)控品同時檢測，質(zhì)控品的檢測值均在其靶值±2s范圍內(nèi)各樣品檢測值有效。

4 放射治療

采用西門子直線加速器6MV的X線。采用體位不變的等中心照射，熱塑型面罩固定，低熔鉛個人專擋，屏蔽非照射區(qū)域。常規(guī)分割連續(xù)放療，每次2Gy，1次/天，每周5次；鼻咽靶區(qū)根治劑量為65~ 75Gy，頸淋巴結轉(zhuǎn)移灶根治劑量為60~70Gy，頸淋巴結預防性照射劑量為45~50Gy。

5 檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

結果

治療組和對照組放療后CD4/CD8、CD19的均值比放療前降低（P＜0.05），治療組較對照組下降均值減少（P＜0.05），CD56變化不大（P＞0.05）。經(jīng)統(tǒng)計學分析差異顯著，見表1-3。

表1 治療組放療前后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

表1 治療組放療前后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

表2 對照組放療前后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

表2 對照組放療前后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

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表3 治療組和對照組放療后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

表3 治療組和對照組放療后CD4/CD8、CD19和CD56細胞變化（+s）

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討論

鼻咽癌是我國南方地區(qū)的常見腫瘤，放療是其主要治療手段。在放射治療中，射線將使T細胞亞群發(fā)生變化，對細胞免疫功能和T細胞亞群產(chǎn)生影響，對淋巴細胞增殖功能有抑制作用。T淋巴細胞是來源于淋巴干樣細胞，在胸腺內(nèi)發(fā)育成熟為T細胞，然后移行至外周淋巴組織，T淋巴細胞受抗原刺激，最后形成具有免疫活性的致敏淋巴細胞，合成與免疫作用有關物質(zhì)，細胞隨血液至抗原所在處，通過與抗原、抗體接觸而發(fā)揮免疫作用[3]。T細胞亞群包括總T細胞數(shù)(CD3)、輔助T細胞數(shù)(CD4)、抑制T細胞數(shù)(CD8)以及后兩者的比值(CD4/CD8)，此四項指標中，CD3的檢測意義已逐漸減小，CD4和CD8的結果相互影響，功能相互牽制，單獨分析有一定的局限性，而CD4/CD8的值在判斷結果時相對穩(wěn)定，檢測更具有實用價值。B淋巴細胞(CD19)主要參與機體的體液免疫功能，自然殺傷細胞(CD56)對腫瘤的免疫監(jiān)視并不和T細胞完全一樣,其在體內(nèi)還需刺激因子(如白介素2等)的激活才能發(fā)揮殺傷腫瘤的作用。

金龍膠囊是一種鮮活動物藥制劑，以鮮金錢白花蛇、鮮蘄蛇和鮮守宮等新鮮動物為主要成分，在低溫下，經(jīng)現(xiàn)代生化技術分離提取工藝制備。其中守宮,入血分透筋達絡,善破血散結解毒,又能通經(jīng)活絡而止痛?！侗静萸笤贩Q其“咸寒,小毒,入血分,治血病……滋陰降痰，為瘰疬妙品……且毒能攻毒,故治癰疽”,滋陰為其扶正之功,破瘀散結、降痰解毒為其蕩邪之效,故為本方君藥。金錢白花蛇,《本草綱目》曰:“白花蛇能透骨搜風,截驚定搐,為風痹、驚搐、癩癬惡瘡要藥,取其內(nèi)走臟腑,外徹皮膚,無處不到也”。其具有破瘀、散結、降痰、解毒、通絡的作用,輔助君藥以加強破瘀散結、解郁通絡之效,且能協(xié)同蘄蛇共同引藥入肝經(jīng),故為臣藥。蘄蛇,味甘咸性溫,入肝經(jīng),性善走竄,內(nèi)走臟腑,外徹皮毛,透骨通經(jīng)散結,既可加強君藥滋陰破瘀散結功效,又可加強臣藥的通絡解郁散結力量,為方中之佐使藥。上述3藥有毒或有小毒,經(jīng)現(xiàn)代化工藝處理后,不但充分發(fā)揮“以毒攻毒”的作用,還免除了對人體的毒性[4]。藥理研究也證實，金龍膠囊保持了原藥的各種生物活性，特別體現(xiàn)在多種氨基酸、多肽、酶類、核苷酸類以及多種微量元素得以保留。不僅可以起到散結解毒，扶正祛邪，補血益氣，提高患者免疫力，改善生活質(zhì)量的作用；還能抑制腫瘤細胞生長，還可補充人體必需的氨基酸、微量元素[5]。金龍膠囊可增強機體的免疫功能,通過增加T細胞、NK細胞、LAK細胞、巨噬細胞等腫瘤殺傷細胞的數(shù)量或功能,增強抗腫瘤相關的細胞因子活性而達到抗腫瘤的作用[6-8]。

放療后由于T細胞亞群數(shù)量及比例均有改變，對患者產(chǎn)生強大而持久的抑制作用，降低其免疫功能。本研究結果示，治療組和對照組患者放療后CD4/CD8，CD19的均值比放療前明顯降低（P＜0.01），統(tǒng)計學檢測有極顯著性差異，表明放療在使鼻咽癌病灶消退的同時也損傷機體的免疫功能，致使CD4/ CD8比例降低或者倒置、機體免疫功能抑制，減弱宿主免疫細胞抗腫瘤的能力，其免疫功能顯著降低；CD56變化不大（P＞0.05），無統(tǒng)計學意義，可能與NK細胞在鼻咽癌中的作用有限相關。治療組和對照組放療后相比，治療組放療后CD4/CD8，CD19的均值比對照組下降均值減少（P＜0.05），統(tǒng)計學檢測有顯著性差異，表明金龍膠囊可以減緩放療時免疫功能的下降。

綜上所述,放射治療可以使鼻咽癌患者的免疫功能下降，金龍膠囊可以減緩放療時免疫功能的下降，從而提高臨床獲益率、改善鼻咽癌患者放療后的生活質(zhì)量,值得臨床進一步研究。

1 Sootaek U,SangML,HyeonTKet al.The effect of radiation therapy on immune function in patients with squamous cell lung carcinoma[J].Chest,1994;105:132.

2 Parkin DM.Global cancer statistics in the year 2000[J]. LancetOn-co,l 2001,2(9):533.

3 陳慰峰，主編.醫(yī)學免疫學.[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000:89-91.

4 曾寶珠,楊亞群,韓新巍.金龍膠囊聯(lián)合TACE治療原發(fā)性肝癌31例[J].中醫(yī)研究,2010,23(8):35-37.

5 賈立群,李學,萬東桂,等.金龍膠囊的免疫雙向調(diào)節(jié)作用[J].北京醫(yī)學,2005,27(9):550-552.

6 韓飛,張建東,邵震宇,等.同步放化療聯(lián)合金龍膠囊治療中晚期鼻咽鱗癌的臨床觀察[J].中華腫瘤防治雜志, 2010,17(2):138-139.

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(收稿:2014-03-21 修回：2014-04-16)

Effects of Jinlong Capsules on the immune function of patients with nasopharyngeal carcinoma undergoing radiotherapy

LAN Xiaolin,WU Wei,LI Jinwei,LIU Lianbin,ZHOU Maohua,ZENG Guoxing Department of Head and Neck Oncology,Jiangxi,341000,China

Objective To observe the protective effects of Jinlong Capsules(JLC)on the immune function of patients with nasopharyngeal carcinoma(NPC)undergoing radiotherapy.MethodsA total of 40 untreated NPC patients were randomly assigned to two groups,i.e..20 cases in treatment group(TG)treated by routine radiotherapy combined with JLC and 20 in control group(CG) treated only by routine radiotherapy.Then,detected before the treatment and by the end of therapeutic course were the numbers of lymphocytes and natural killer cells in peripheral blood by flow cytometry to compare the difference of radiation effect on the immune function of patients during the period of radiotherapy in these 2 groups.ResultsBy the end of radiotherapy,the mean values of CD4/ CD8 and CD19 were both reduced obviously in either TG or CG as compared with that of pre-treatment(P＜0.05),but the reduced extents of them were significantly smaller in TG than in CG(P＜0.05).However,there was no significant difference found in the mean values of CD56 between these two groups(P＞0.05).ConclusionsJinlong Capsules hold such an effect on the immune function of NPC patient receiving radiotherapy to lower the damaging effect on immunocytes induced by radiation during therapeutic course, especially for CD4/CD8 and CD19.

Nasopharyngeal carcinoma;Radiotherapy;Immune function;Jinlong Capsules;Therapeutic effect

10.3969/j.issn.1007-4856.2014.06.015

1江西省贛州市腫瘤醫(yī)院頭頸科（341000）

2江西省贛州市腫瘤醫(yī)院放療科

3江西省贛州市腫瘤醫(yī)院檢驗科

藍小林，主任醫(yī)師.Email::lxl3628@163.com