唐茂妍,和小明,陳旭東
(1.上海正正生物技術(shù)有限公司,上海 200433;2.北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司,北京100193)
在發(fā)現(xiàn)仔豬飼料中添加乳酸可以減少仔豬糞便中大腸桿菌的數(shù)量、提高生長(zhǎng)速度后,飼料酸化劑日益受到關(guān)注、很多研究者認(rèn)為酸化劑是抗生素的最佳替代品之一[1-5]。多數(shù)試驗(yàn)表明,乳酸對(duì)動(dòng)物特別是斷奶后仔豬的生產(chǎn)性能、飼料轉(zhuǎn)化效率等均有顯著改善[6-9]。文章旨在從乳酸的結(jié)構(gòu)、化學(xué)特性、體內(nèi)來(lái)源及功效進(jìn)一步說(shuō)明乳酸在復(fù)合酸化劑中的重要作用,同時(shí)為乳酸的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。
乳酸為無(wú)味液體,純品為無(wú)色,工業(yè)品為無(wú)色到淺黃色液體,具有強(qiáng)吸濕性。乳酸密度為1.206 g·mL-1(25/4℃),熔點(diǎn)18℃,沸點(diǎn)122℃(2 kPa)。乳酸可與水、乙醇、甘油混溶,能隨過(guò)熱水蒸氣揮發(fā),常壓蒸餾則分解。乳酸濃縮至50%時(shí)部分轉(zhuǎn)化為乳酸酐,故85%~90%的乳酸產(chǎn)品中含有乳酸酐10%~15%。
乳酸是世界公認(rèn)的三大有機(jī)酸之一,是自然界中存在的最簡(jiǎn)單且最廣泛的一種羥基羧酸。乳酸的結(jié)構(gòu)由Wislicenus在1873年提出,其分子中既有羥基又有羧基,因而乳酸可以進(jìn)行多種化學(xué)反應(yīng),如氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、縮合和羥基上的取代反應(yīng)等,可制備多種乳酸衍生物,同時(shí)也表明乳酸具備在動(dòng)物體內(nèi)參與多種生物反應(yīng)的特性。
乳酸分子中有一個(gè)不對(duì)稱的碳原子,所以有兩種旋光異構(gòu)體,即L-乳酸和D-乳酸。哺乳動(dòng)物只有分解L-乳酸的L-乳酸脫氫酶,而D-乳酸進(jìn)入機(jī)體后,由于不能代謝,使血尿酸度提高,過(guò)量的攝入就引起代謝紊亂等不良反應(yīng)。
對(duì)于幼齡哺乳動(dòng)物而言,乳酸是母乳中的乳糖在乳酸菌等細(xì)菌的作用下發(fā)酵分解得到的產(chǎn)物。乳酸菌發(fā)酵可分為同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵,同型乳酸發(fā)酵乳糖只產(chǎn)生乳酸,異型乳酸發(fā)酵除產(chǎn)生乳酸外,還生成乙醇、二氧化碳等物質(zhì)。
乳糖是通過(guò)透膜酶系統(tǒng)和群移位系統(tǒng)兩種不同的機(jī)制而進(jìn)入乳酸菌細(xì)胞的。
透膜酶系統(tǒng):在透膜酶的作用下,乳糖進(jìn)入乳酸菌細(xì)胞內(nèi),經(jīng)β-半乳糖苷酶的作用分解為葡萄糖和半乳糖,因不同乳酸菌對(duì)這兩種產(chǎn)物的優(yōu)先代謝順序不同,嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌可優(yōu)先利用葡萄糖而代謝產(chǎn)生乳酸,但對(duì)游離型半乳糖不能利用,其被排出細(xì)胞外或轉(zhuǎn)化成高分子物質(zhì)(膠糖)而蓄積起來(lái)。
群移位系統(tǒng):在細(xì)胞膜上磷酸轉(zhuǎn)移酶作用下,乳糖經(jīng)磷酸化后進(jìn)入乳酸菌細(xì)胞內(nèi)。之后經(jīng)磷酸β-半乳糖苷酶的作用,分解成葡萄糖和6-磷酸半乳糖。前者經(jīng)糖酵解途徑,后者經(jīng)6-磷酸塔格糖途徑進(jìn)行代謝。通過(guò)這樣的乳糖發(fā)酵代謝途徑,最終產(chǎn)生乳酸及其他一些小分子脂肪酸。這種乳糖代謝機(jī)制一般分布在乳酸乳球菌乳酸亞種(乳酸乳球菌)、干酪乳桿菌干酪亞種(干酪乳桿菌)等菌屬中。
雖然對(duì)于哺乳仔豬胃液組成隨時(shí)間的變化研究結(jié)論并不一致,但多數(shù)學(xué)者均認(rèn)為在仔豬出生后的一段時(shí)間內(nèi)胃液中無(wú)法檢測(cè)到游離鹽酸,一般從2~3周才開(kāi)始出現(xiàn),并隨年齡而增加,60日齡后鹽酸含量開(kāi)始接近成年豬水平。仔豬哺乳期乳酸幾乎占胃中有機(jī)酸的80%~100%,并且為維持胃中低pH起重要作用。胃中乳酸含量與pH成顯著負(fù)相關(guān),這也有助于哺乳期豬消化道有益菌(乳酸桿菌等)的繁殖生長(zhǎng),并且較低的pH也有利于乳蛋白的消化。因而,哺乳仔豬胃中乳酸的存在保證了消化道內(nèi)的適宜環(huán)境,從而保持對(duì)母乳的良好消化起到重要作用。斷奶后第1周,由于乳糖消失,乳酸濃度下降,揮發(fā)性脂肪酸(VFA)產(chǎn)生增加,鹽酸此時(shí)分泌也很少,使胃內(nèi)總酸度較低。隨后,乳酸和VFA不斷減少,鹽酸分泌緩慢增加,直到斷奶后3-4周,鹽酸可占胃內(nèi)總酸度的50%。同時(shí),飼料中一些蛋白質(zhì),尤其是無(wú)機(jī)陽(yáng)離子也會(huì)與胃酸結(jié)合,降低胃內(nèi)酸度,不利于蛋白質(zhì)消化,并對(duì)非乳酸桿菌類細(xì)菌繁殖起抑制作用。所以對(duì)早期斷奶的仔豬,采取適當(dāng)措施保證胃內(nèi)一定酸度極為重要。
自報(bào)道在畜禽飲水中添加乳酸可使得糞便中有害菌數(shù)量降低以來(lái),研究者對(duì)于乳酸的作用與飼料中的應(yīng)用研究越來(lái)越多。主要包括食品的防腐保鮮、食品調(diào)味料、釀酒時(shí)的發(fā)酵添加劑、風(fēng)味劑和酸度調(diào)節(jié)劑等;在飼料中的應(yīng)用主要包括青飼料貯藏劑、牧草成熟劑、防腐劑和促生長(zhǎng)作用等。
由于飼料中的蛋白質(zhì)原料和礦物質(zhì)原料的系酸力較高,可中和動(dòng)物胃中的鹽酸,使得幼齡動(dòng)物分泌不足的胃酸更加缺乏。飼料中添加酸化劑的目的是降低飼料pH和系酸力,緩解由于幼齡動(dòng)物消化道發(fā)育不成熟造成的消化液和消化酶特別是胃蛋白酶活性不足,從而改善動(dòng)物對(duì)植物性飼料蛋白質(zhì)的消化率,降低營(yíng)養(yǎng)性和細(xì)菌性腹瀉發(fā)生率[10-12]。多數(shù)研究認(rèn)為,飼料系酸力在一定范圍內(nèi)可改善斷奶仔豬消化道食糜酸度,維持消化道菌群平衡,保證消化系統(tǒng)正常生理功能,同時(shí)提高斷奶仔豬日增重和飼料效率[13-14]。馮尚連等報(bào)道,在基礎(chǔ)日糧中分別添加乳酸0.3%和0.6%,飼料pH分別降低0.20和0.29,系酸力分別降低4.78和3.78U[15]。
酸化劑對(duì)有害菌的抑制作用為其替代抗生素提供了可能性[16]。張軍等認(rèn)為,細(xì)菌胞內(nèi)酸根離子的聚集是有機(jī)酸抑菌作用的重要決定因素,細(xì)菌胞內(nèi)外pH梯度及胞外酸根離子濃度又是影響胞內(nèi)酸根離子聚集的主要因素[17]。有機(jī)酸的pKa關(guān)系到其殺菌、抑菌效果的有效性。消化道菌群失衡很容易引起大腸桿菌的過(guò)度繁殖和生長(zhǎng),從而造成動(dòng)物腹瀉和下痢[2]。Maribo等研究發(fā)現(xiàn),在飼料中加入乳酸0.7%可降低胃腸道pH,并且提高盲腸和結(jié)腸乳酸菌密度[18]。Tsiloyiannis等在日糧中添加乳酸1.6%,可使仔豬腹瀉率降低66%,死亡率降低60%,與不添加乳酸的對(duì)照組差異顯著(P<0.05)[6-7]。馮尚連等研究表明,在日糧中添加乳酸0.3%和0.6%均可提高回腸乳酸桿菌數(shù)量并降低大腸桿菌數(shù)量[15]。
乳酸是重要飼料添加劑,但國(guó)內(nèi)外對(duì)其作為酸化劑研究較少,多數(shù)集中在檸檬酸、延胡索酸、蘋(píng)果酸等的研究。乳酸對(duì)豬生產(chǎn)性能研究結(jié)果表明,乳酸對(duì)于幼齡動(dòng)物的生產(chǎn)性能影響正效應(yīng)明顯。日糧中添加乳酸可提高仔豬日增重2%~72%,飼料轉(zhuǎn)化率可降低0.49%~40%,礦物質(zhì)(主要為鈣、磷)消化率分別提高 4%~19%和 10%~19%[6-7,9,15,19-21]。與此相反,Partanen等報(bào)道,在斷奶仔豬日糧中添加乳酸0.8%對(duì)仔豬總增重、飼料轉(zhuǎn)化率和腹瀉指數(shù)均有不良影響,與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)[22]。乳酸在豬生產(chǎn)中的作用效果見(jiàn)附表[6-7,9,15,19-23]。從附表可知,在已查閱的試驗(yàn)數(shù)據(jù)中,乳酸對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響有正向作用。但對(duì)仔豬生產(chǎn)性能各指標(biāo)的影響差異較大,主要是與試驗(yàn)動(dòng)物日齡、體重、試驗(yàn)日糧組成、乳酸添加量等有很大關(guān)系,同時(shí)試驗(yàn)中無(wú)法反映出的飼養(yǎng)管理水平也會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成較大影響。
附表 乳酸在豬生產(chǎn)中的作用效果
乳酸是作為食品、飼料、工業(yè)中應(yīng)用最多的添加劑之一,從發(fā)酵方法到合成方法等生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展迅速。工業(yè)生產(chǎn)乳酸方法主要是發(fā)酵法和合成法。乳酸最早是由法國(guó)科學(xué)家在1881年通過(guò)發(fā)酵方法制得的,因其工藝簡(jiǎn)單,原料充足,發(fā)展較早而成為比較成熟的乳酸生產(chǎn)方法,約占乳酸生產(chǎn)的70%。但乳酸發(fā)酵法用時(shí)較長(zhǎng),而且不能連續(xù)生產(chǎn),常見(jiàn)的還是間歇或半連續(xù)化生產(chǎn),且我國(guó)發(fā)酵乳酸質(zhì)量達(dá)不到國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)?;瘜W(xué)法可實(shí)現(xiàn)乳酸的大規(guī)模連續(xù)化生產(chǎn),且合成乳酸也已得到美國(guó)食品和藥品管理局(FDA)的認(rèn)可,但原料一般具有毒性,不符合綠色化學(xué)要求。除了以上兩種常見(jiàn)方法,乳酸生產(chǎn)還有酶法生產(chǎn),但其工藝復(fù)雜,大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用還有待于進(jìn)一步研究。因而,現(xiàn)在飼料用酸化劑還主要依靠發(fā)酵法和化學(xué)合成兩種方法。
發(fā)酵法的原料一般是玉米、大米、甘薯等淀粉質(zhì)原料(也有以苜蓿、纖維素等作原料)。能夠產(chǎn)酸的乳酸菌很多,但產(chǎn)酸質(zhì)量較低,主要是根霉菌和乳酸桿菌等菌系。不同菌系其發(fā)酵途徑不同,實(shí)際由于存在微生物其他生理活動(dòng),不是單純某一種發(fā)酵途徑。這也是發(fā)酵法得到乳酸純度不高的原因之一。
用于生產(chǎn)乳酸的常見(jiàn)合成法為乳腈法和丙烯腈法。其他的還包括丙酸法、丙烯法等,但因原料或生產(chǎn)過(guò)程中有毒物質(zhì)產(chǎn)生,因而不常在乳酸生產(chǎn)中使用。
4.2.1 乳腈法
乳腈法是將乙醛和冷的氫氰酸連續(xù)送入反應(yīng)器生成乳腈(或直接用乳腈作原料),將乳腈再打入水解釜,同時(shí)注入硫酸和水,水解乳腈得到粗乳酸。再將粗乳酸送入酯化釜,注入乙醇酯化,經(jīng)精餾、濃縮、分解得精乳酸。
4.2.2 丙烯腈法
丙烯腈法是將丙烯腈和硫酸送入反應(yīng)器中反應(yīng),再水解物注入酯化反應(yīng)器中與甲醇反應(yīng),然后把硫酸氫銨分離出去,剩余物送入蒸餾塔,塔底獲精酯后再送入第二蒸餾塔,加熱分解,塔底得稀乳酸,經(jīng)真空濃縮得乳酸產(chǎn)品。
目前乳酸在飼料中的應(yīng)用已經(jīng)普及,但對(duì)于乳酸在動(dòng)物體內(nèi)的消化代謝機(jī)理、對(duì)有害菌的抑制機(jī)理,在飼料中的適宜添加量、與其他單酸之間的互作效應(yīng)等都需要做深入研究,才能真正發(fā)揮其在飼料和動(dòng)物體內(nèi)的作用,進(jìn)而為降低抗生素使用量,替代其促生長(zhǎng)作用提供理論基礎(chǔ)。
[1]Partanen K.Organic acids:The efficiency andmodes of action in pigs[M].Nottingham:Nottingham University Press,2001,201-230.
[2]Dibner JJ,PButitn.Use of organic acids as amodel to study the impact of gutmicroflora on nutrition and metabolism[J].JAppl PoultRes,2002,11:453-463.
[3]Riche SC.Perspective on the use oforganic acids and short chain fatty acids as antimicrobials[J].Poultry Science,2003,82(4):632-639.
[4]陳代文,張克英,王萬(wàn)祥,等.酸化劑、益生素和寡糖對(duì)斷奶仔豬糞中微生物菌群和免疫功能的影響及其互作效應(yīng)研究[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2006,18(3):172-178.
[5]唐福全.酸化劑在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].西華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2007,26(2):45-48.
[6]Tsiloyiannis V K,Kyriakis S,Vlemmas J,et al.The effect of organic acids on the control of porcine post-weaning diarrhoea[J].Research in Veterinary Science,2001,70(3):287-293.
[7]Tsiloyiannis V,Kyriakis S,Vlemmas J,etal.The effectoforganic acids on the control of post-weaning oedema disease of piglets[J].Research in Veterinary Science,2001,70(3):281-285.
[8]Snow JL,Baker DH,ParsonsCM.Phytase,citric acid,and 1-alpha-hydroxycholecalciferol improve phytate phosphorus utilization in chicks fed a corn-soybean meal diet[J].Poultry Science,2004,83(7):1 187-1 192.
[9]Pierce KM,Sweeney T,Brophy PO,etal.Dietarymanipulation postweaning to improve piglet performance and gastro-intestinal health[J].Animal Science,2005,81:374-356.
[10]侯水生.日糧蛋白質(zhì)對(duì)早期斷奶仔豬消化道與消化酶活性及相關(guān)激素分泌的調(diào)控作用[D].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,1999.
[11]林映才,陳建新,蔣宗勇,等.復(fù)合酸化劑對(duì)早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)、腸道形態(tài)和微生物區(qū)系的影響[J].養(yǎng)豬,2001(1):13-16.
[12]Ravindran V and E T Kornegay.Acidification ofweaner pig diets:A review[J].JSciFood Agric,2006,62(4):313-322.
[13]冷向軍,王康寧,楊鳳,等.酸化劑對(duì)仔豬生長(zhǎng)和體內(nèi)酸堿平衡的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2003,15(2):49-53.
[14]劉庚壽,龔德林,張敏賢,等.不同系酸力飼糧對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能和腹瀉的影響[J].飼料工業(yè),2006.17(1):33-34.
[15]馮尚連,尚建鋼,孫玥瀅,等.乳酸對(duì)仔豬腸道大腸桿菌和乳酸桿菌的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,23(3):506-510.
[16]Kommera SK,Mateo R D,Neher F J,et al.Phytobiotics and organic acids as potential alternatives to the use of antibiotics in nursery pig diets[J].Asian-Aust J Anim Sci,2006,19(12):1 784-1 789.
[17]張軍,田子罡,王建華,等.有機(jī)酸抑菌分子機(jī)理研究進(jìn)展[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2011,42(3):323-328.
[18]Maribo H,B B Jensen,M SHedemann.Different doses of organic acids to piglets[J].Danish Bacon and Meat Council,2000,469:23-28.
[19]郭愛(ài)英,葛殿英,郭振中.乳酸對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].現(xiàn)代化農(nóng)業(yè),1998(9):18-19.
[20]Kil D Y,Piao LG,Long H F,etal.Effectsof organic or inorganic acid supplementation on growth performance,nutrient digestibility and white blood cell counts in weanling pigs[J].Asian-Australasian JournalofAnimal Sciences,2006,19:252-261.
[21]Kemme PA,Jongbloed AW,Mroz Z,et al.Digestibility of nutrients in growing-finishing pigs is affected by Aspergillus niger phytase,phytate and lactic acid levels.2.Apparent ileal digestibility of phosphorus,calcium and magnesium and ileal degradation of phytic acid[J].Livestock Production Science,1999,58(2):119-127.
[22]Partanen K,Siljander-Rasi H,Suomi K.Dietary preferences of weaned piglets offered diets containing organic acids[J].Agriculturaland Food Scienc,2002,11(2):107-119.
[23]Jongbloed AW,Mroz Z,van derWeij-Jongbloed R,etal.The effects ofmicrobial phytase,organic acids and their interaction in diets for growing pigs[J].Livestock Production Science,2002,67:113-122.