楊 彪,周 剛,王倩倩,夏麗麗
(揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225009)
自1940年弗萊明發(fā)現(xiàn)青霉素之后,抗生素已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的基石,是治療人類和畜禽細(xì)菌感染的基本藥物。然而,近年來,抗生素的效果越來越差,且在人類和畜禽體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了大量的耐受抗生素的病原體;但有關(guān)尋找抗生素替代品的研究進(jìn)程卻極其緩慢。2013年1月,德國漢堡科學(xué)與人文學(xué)院和德國國家科學(xué)院共同發(fā)布了一份聲明,提出了6項(xiàng)關(guān)于抗生素的研究和使用建議,其中包括限制抗生素在獸醫(yī)藥物和植物保護(hù)中的使用,因此,尋找抗生素的替代品就顯得尤為重要。近些年來,微生態(tài)制劑因具有綠色環(huán)保、安全可靠、無毒無殘留等優(yōu)點(diǎn)備受關(guān)注,且枯草芽孢桿菌的無耐藥性、無毒副作用、無藥物殘留等特性使其在實(shí)際生產(chǎn)中得到廣泛應(yīng)用。
早在1835年,Ehrenberg就發(fā)現(xiàn)并將枯草芽孢桿菌命名為Vibrio subtilis。1872年,德國植物學(xué)家Cohn建立了第一個(gè)細(xì)菌分類系統(tǒng),根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)特征命名了芽孢桿菌屬(Bacillus),將枯草芽孢桿菌重命名為Bacillus subtilis,并延用至今[1]??莶菅挎邨U菌為芽孢桿菌屬,革蘭氏陽性需氧菌,單個(gè)細(xì)胞呈直桿狀,大小為(0.8~1.2)μm×(1.5~4.0)μm,無莢膜,周生鞭毛,可運(yùn)動。芽孢呈橢圓到柱狀,位于菌體中央或稍偏菌落表面粗糙且不透明,微黃色或污白色。
芽孢桿菌是一類好氧或兼性厭氧菌,在制劑中以內(nèi)生孢子形式存在,能夠忍受酸、高溫(100℃)、高壓、紫外線、電磁輻射和某些化學(xué)藥品等多種不良環(huán)境,具有良好的穩(wěn)定性,因此,在飼料加工、運(yùn)輸和儲存過程中損失較小,還具有其他益生菌所沒有的抗逆性。
枯草芽孢桿菌以孢子形式進(jìn)入家禽腸道后,其芽孢快速發(fā)芽,發(fā)芽率高達(dá)60%~70%,在短時(shí)間內(nèi)能大量繁殖含菌量較高的優(yōu)勢群種,消耗動物腸道內(nèi)多余的氧,為雙歧桿菌等其他有益厭氧菌提供一個(gè)良好的腸道環(huán)境,同時(shí)抑制大腸桿菌、沙門桿菌等有害菌種的生長。
枯草芽孢桿菌具有較強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性,還可分泌其他多種酶類如麥芽糖酶、β-葡萄糖酶、植酸酶和糖化酶,能夠有效降解非淀粉多糖及其他復(fù)雜碳水化合物。另外,枯草芽孢桿菌所產(chǎn)生的有機(jī)酸可激活酸性蛋白酶的活性,促使腸道進(jìn)行蠕動,從而促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)在小腸內(nèi)的吸收,達(dá)到提高飼料利用率的目的。
枯草芽孢桿菌在胃腸道代謝過程中可合成維生素、氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、促生長因子等多種營養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)蛋白質(zhì)、纖維素、淀粉、鈣等營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收??莶菅挎邨U菌在生長繁殖過程中產(chǎn)生的有機(jī)酸可激活蛋白酶的活性,有助于幼小動物對營養(yǎng)物質(zhì)代謝吸收,并最終提高飼料利用率[2]。
枯草芽孢桿菌作為非特異性免疫因子,可通過菌體或細(xì)胞壁成分刺激宿主細(xì)胞,激活巨噬細(xì)胞或作為非特異性免疫反應(yīng)的免疫佐劑,且芽孢能進(jìn)入淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié),促使T、B淋巴細(xì)胞數(shù)量增多,激發(fā)IgA、IgG、IgM等體液免疫[3]。此外,枯草芽孢桿菌能有效促進(jìn)機(jī)體免疫器官的生長發(fā)育和免疫系統(tǒng)的成熟。
枯草芽孢桿菌還有防治骨質(zhì)疏松、抗皮膚感染、促進(jìn)凝血、改善畜禽養(yǎng)殖環(huán)境等作用[4]。
余東游等選取1日齡羅斯308肉雞216羽,研究枯草芽孢桿菌對肉雞生產(chǎn)性能及氧化和免疫功能的影響,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,處理組在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌105cfu·g-1,飼養(yǎng)期為42 d,結(jié)果表明,日糧中添加枯草芽孢桿菌顯著提高了羅斯308肉雞全期(1~42日齡)的平均日增重,且主要是通過促進(jìn)后期的生長發(fā)育體現(xiàn)出來[5]。這與朱金林、胡長慶等的研究結(jié)果一致;枯草芽孢桿菌通過顯著增加肉雞血清及肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶活力和抗超氧陰離子能力而使其T-AOC顯著提高(P<0.05),并使脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA)含量顯著降低(P<0.05),從而有效地保護(hù)了肉雞免受氧化應(yīng)激[6-7]。董秀梅等研究表明,枯草芽孢桿菌極顯著提高血清IgG含量(P<0.01),但對其他免疫球蛋白、血清溶菌酶和細(xì)胞因子無顯著影響(P>0.05)[8]。李俊波等選擇45周齡的尼克珊瑚粉蛋雞,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑250、500 mg·kg-1,為期4周,試驗(yàn)結(jié)果表明,在蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑能改善料蛋比、降低死淘率、顯著降低蛋破損率(P<0.05)、提高個(gè)蛋重和蛋殼厚度;蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑顯著提高了日糧粗蛋白質(zhì)和有機(jī)物消化率(P<0.05)[9]。此外,由于枯草芽孢桿菌具有很強(qiáng)的生物同化作用,因此,可用于改善家禽養(yǎng)殖場的糞便惡臭,其代謝產(chǎn)物對蚊蠅等的生長繁殖也有抑制效果。在實(shí)際生產(chǎn)過程中,采用籠舍噴灑等途徑,可有效地改善家禽生長環(huán)境。王曉霞等選用1日齡AA肉公雞360只,隨機(jī)分為5個(gè)處理組,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞,試驗(yàn)飼糧分別為基礎(chǔ)日糧(對照組)、基礎(chǔ)日糧+果寡糖0.3%、基礎(chǔ)日糧+枯草芽孢桿菌0.1%、基礎(chǔ)日糧+果寡糖0.3%+枯草芽孢桿菌0.1%、基礎(chǔ)日糧+金霉素150 mg·kg-1(有效成分為15%),結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,在AA肉公雞日糧中添加果寡糖和枯草芽孢桿菌制劑可使發(fā)酵糞中NH3和H2S的散發(fā)量分別降低62.14%(P<0.05)和28.49%(P<0.05),而單獨(dú)添加枯草芽孢桿菌對發(fā)酵糞中NH3和H2S的散發(fā)量無顯著影響(P>0.05),這預(yù)示著果寡糖和枯草芽孢桿菌組成的合生元對降低雞舍中的有害氣體含量起著重要的作用[10]。
劉曉琳等選取1日齡櫻桃谷鴨1 280只研究日糧中添加枯草芽孢桿菌對肉鴨生長性能的影響,以肉鴨料全價(jià)配合飼料為基礎(chǔ)日糧,共分為4組,分別飼喂基礎(chǔ)日糧、液態(tài)芽孢制劑、金霉素和枯草芽孢桿菌,試驗(yàn)期42 d,試驗(yàn)結(jié)果表明,添加枯草芽孢桿菌0.05%組在整個(gè)試驗(yàn)過程中對肉鴨的生長有促進(jìn)作用,效果優(yōu)于液態(tài)芽孢桿菌組及抗生素組,能夠顯著提高肉鴨增重、降低料肉比(P<0.01)[11]。劉小英等研究枯草芽孢桿菌制劑在南方魚塘飼養(yǎng)肉鴨中的應(yīng)用,將1日齡櫻桃谷幼鴨360只隨機(jī)分為3組,分別設(shè)為對照組(基礎(chǔ)日糧+黃霉素5 mg·kg-1)、試驗(yàn)1組(基礎(chǔ)日糧+枯草芽孢桿菌100 g·t-1)、試驗(yàn)2組(基礎(chǔ)日糧+枯草芽孢桿菌300g·t-1),結(jié)果顯示,試驗(yàn)1、2組與對照組相比體重分別提高6.24%、6.63%,料肉比分別改善3.87%、4.50%,采食量有增加的趨勢,但試驗(yàn)1組與2組間差異不顯著(P>0.05),此外,由于枯草芽孢桿菌不在體內(nèi)寄居,在畜禽體內(nèi)大量繁殖后隨糞便排到水中,在魚塘中繼續(xù)繁殖,降解水中的氨氮、亞硝酸鹽等,促進(jìn)浮游微生物的繁衍,從而達(dá)到改良水質(zhì)目的,且在鴨魚共養(yǎng)模式中添加枯草芽孢桿菌制劑100 g·t-1最經(jīng)濟(jì)有效[12]。另外,宋俊峰等研究枯草芽孢桿菌在商品肉鴨規(guī)模化養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果,在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑300~500 g·t-1,結(jié)果顯示,飼料中添加枯草芽孢桿菌可有效降低肉鴨料肉比0.06~0.07、肉鴨藥費(fèi)成本0.08~0.30元·只-1,提高肉鴨生長速度和育成率,改善養(yǎng)殖環(huán)境[13]。
譚榮炳等選用1日齡雜交商品雛白鵝(皖西白鵝×川府白鵝)96只,分為4組,分別為基礎(chǔ)日糧、黃霉素日糧、添加枯草芽孢桿菌250、500 g·t-1日糧,試驗(yàn)期28 d,結(jié)果顯示,與基礎(chǔ)日糧相比,在0~28日齡肉鵝日糧中添加枯草芽孢桿菌250 g·t-1有良好的促進(jìn)作用,可顯著提高增重速度和飼料報(bào)酬,達(dá)到與抗生素相似的效果[14]。
張愛武等選用健康1日齡黃羽雛鶉80只,研究不同水平枯草芽孢桿菌對鵪鶉內(nèi)臟器官及小腸發(fā)育的影響,將80只1日齡黃羽雛鵪鶉隨機(jī)分成4組,每組2個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只,分別為對照組(基礎(chǔ)日糧)和在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌0.05%、0.1%、0.2%,結(jié)果表明,添加組與對照組相比胰腺鮮重都有減小趨勢,且0.1%組胰腺鮮重與對照組相比差異顯著(P<0.05);0.05%組脾臟干重與對照組相比差異顯著(P<0.05);0.1%組和0.2%組胰腺干重與對照組相比顯著降低(P<0.05);芽胞桿菌對空腸、回腸及十二指腸未見顯著影響(P>0.05)[15]。
枯草芽孢桿菌作為一種微生態(tài)制劑,已在畜牧生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用,但在實(shí)際添加過程中要選擇耐受性更好、功能更強(qiáng)的菌種,在使用前,應(yīng)充分考慮添加對象和添加目的,家禽不同的生理階段、消化特點(diǎn)要區(qū)別對待,并確保在儲存期內(nèi)有一定量的活菌數(shù),以保證活菌能到達(dá)家禽消化道;要注意飼料中的成分,因?yàn)槟承┪镔|(zhì)可能會降低其活性;盡可能在畜禽早期日糧中添加枯草芽孢桿菌,并維持長期飼喂,形成優(yōu)勢菌群。目前,在部分家禽養(yǎng)殖場的具體養(yǎng)殖過程中發(fā)現(xiàn),在治療疾病等方面以枯草芽孢桿菌為代表的益生素并不能完全替代抗生素,其原因還有待進(jìn)一步的研究。因此,在家禽早期的生長發(fā)育階段,應(yīng)二者配合使用,使其能達(dá)到更好地使用效果。另外,枯草芽孢桿菌調(diào)節(jié)家禽微生態(tài)平衡的研究僅限于效果水平,對其具體的作用機(jī)制尚不明確,還有待進(jìn)一步研究。盡管枯草芽孢桿菌在實(shí)際應(yīng)用和推廣過程中還存在一些問題,但枯草芽孢桿菌制劑具有對人畜相對安全、環(huán)境兼容性好、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn),因而更符合現(xiàn)代社會對畜牧生產(chǎn)及有害生物綜合防治的要求[16]。
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