刁艷萍，王崇磊

（連云港死海溴化物有限公司，江蘇 連云港 222002）

乙蟲腈中間體5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯基)吡唑的液相色譜分析

刁艷萍，王崇磊

（連云港死海溴化物有限公司，江蘇 連云港 222002）

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是殺蟲劑乙蟲腈的重要中間體。采用液相色譜法對其含量分析方法進行了研究。采用甲醇和水為流動相，選用Hypersil C18色譜柱，紫外檢測器進行分析。結(jié)果顯示標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.38，變異系數(shù)0.40%，回收率為99.5%，線性相關(guān)系數(shù)為0.999。在建立的分析條件下，測定5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的有效成分的方法具有較好的線性、精密度和準(zhǔn)確度，是較理想的分析方法，完全能夠滿足工業(yè)化對5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的質(zhì)量控制。

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑；液相色譜；分析

前言

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基） 吡唑，英文名稱：5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）-pyrazole，結(jié)構(gòu)式：

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是殺蟲劑乙蟲腈合成的重要中間體。乙蟲腈（Ethiprole）是由羅納普朗克發(fā)現(xiàn)、拜耳公司開發(fā)的殺蟲、殺螨劑，屬于第二代作用于GABA的殺蟲劑，低用量下對多種咀嚼式和刺吸式害蟲有效，可用于種子處理和葉面噴霧，持效期長達21～28d。有關(guān)5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的分析，目前尚未見公開的報道，本文采用液相色譜法，對其分析方法進行了研究。

1 實驗部分

1.1 主要原料與試劑

甲醇，色譜純，上海化學(xué)試劑總廠；5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%），以色列進口；5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑（湖南化工院）；2次蒸餾水，自制。

1.2 儀器與設(shè)備

液相色譜儀 Agilent 1100,安捷倫公司；泵0491-0131；2487檢測器；電子天平，上海天平儀器廠；NZ010雙通道色譜工作站；浙江化工研究院賽智科技有限公司；超聲波振動儀。

1.3 色譜操作條件

色譜柱：200mm×4.6mm（i.d）5.0μm不銹鋼柱；柱填充物：C18Hypersil；流動相：甲醇+水=70+30（V/V）；濾膜孔徑約0.45μm，經(jīng)過濾器過濾，超聲脫氣；流動相流速：1.0mL/min；柱溫：室溫（變化應(yīng)在2℃以內(nèi)）；檢測器波長：254nm；進樣體積20μL；保留時間：5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑約7.0min。

1.4 溶液的配制

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑標(biāo)樣0.1g（精確至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加甲醇30mL,超聲波震蕩1min，用甲醇定容至刻度，搖勻后用移液管吸取1.0mL于25mL容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取含5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑0.1g試樣（精確至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加甲醇30mL,超聲波震蕩1min，用甲醇定容至刻度，搖勻后用同一移液管吸取1.0mL于25mL容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻備用。

1.5 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計算各針相對響應(yīng)值，待相鄰2針的相對響應(yīng)值變化小于1.5%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進行測定。5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的色譜圖見圖1。

1.6 計算

將測得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中2-氯-6-巰基苯甲酸峰面積分別進行平均。試樣中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑質(zhì)量分?jǐn)?shù)X%。

A1-2針標(biāo)樣溶液中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑面積的平均值；

A2-2針試樣溶液中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑峰面積的平均值；

m1-標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2-試樣的質(zhì)量，g；

P-5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

圖1 5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的液相色譜圖Fig.1 The liquid chromatogram of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole

2 結(jié)果與討論

2.1 流動相的選擇

使用甲醇、乙腈和水的不同配比的流動相，進行分離，發(fā)現(xiàn)使用甲醇+水=70+30（V/V）配比的流動相，5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑能很好的分離，且保留時間較合適。

2.2 檢測波長的選擇

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑在低波長下有較好的吸收。在280、254、230nm三個波長下進樣。發(fā)現(xiàn)在254nm下試樣的靈敏度較好，且試劑干擾小。因此采用254nm為檢測波長。

2.3 方法的線性關(guān)系

在一定質(zhì)量范圍內(nèi)，稱取數(shù)個5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑標(biāo)樣，分別于50mL容量瓶內(nèi)，流動相溶解并定容，搖勻。按標(biāo)準(zhǔn)操作條件進樣分析，得到響應(yīng)值數(shù)據(jù)，做線性方程為：Y=103.53X+0.0085,相關(guān)系數(shù)0.9999。5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑濃度在0～0.024g/50mL范圍內(nèi)線性良好。

2.4 精密度的測定

按上述處理方法，同樣的儀器操作條件，稱取同一樣品，進行8次平行測定，計算標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.38，變異系數(shù)為0.40%。

表1 方法的精確度試驗Table 1 The precision test and results of this method

2.5 準(zhǔn)確度試驗

2.5.1 回收率計算方法

2.5.2 回收率測定

稱取5份不同質(zhì)量的樣品，分別加入一定的5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑標(biāo)準(zhǔn)品，按上述處理方法，同樣的儀器操作條件，進行回收率的測定，5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的平均回收率為99.5%。

表2 方法的準(zhǔn)確度試驗Table 2 The accuracy test and results of this method

3 結(jié) 論

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是殺蟲劑乙蟲腈合成的重要中間體。在本文建立的分析條件下，測定5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的有效成分的方法具有較好的線性。精密度和準(zhǔn)確度，是較理想的分析方法。

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Analysis of 5-Amino-3-Cyano-4-Ethylthio-1-（2,6-Dichloro-4-Trifluoromethylphenyl）Pyrazole by HPLC which is an Intermediate for Ethiprole

DIAO Yan-ping and WANG Chong-lei
（Lianyungang Dead Sea Bromine Compounds Co.,Ltd.,Lianyungang 222002,China）

5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole is a kind of important intermediate for ethiprole which is used as pesticide.The HPLC method used for analyzing the content of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole is studied.The methanol and water is used as mobile phase,the Hypersil C18chromatographic column and ultraviolet detector is chosen to carry out the analysis.The standard deviation,variable coefficient,recovery rate and linearly dependent coefficient are 0.38, 0.40%,99.5%and 0.9999 respectively.The linearity,accuracy and the precision of this method is better for analyzing the content of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole under the certain conditions.It is an ideal analytical method for thoroughly meeting the demand of industrial quality control for 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）-pyrazole.

5-Amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole;HPLC;analysis.

TQ459

A

1001-0017（2014）03-0194-03

2014-02-17

刁艷萍(1972-),女，陜西三原人，高級工程師，主要從事農(nóng)藥生產(chǎn)和質(zhì)量管理工作。