趙巧玲, 王文波, 陳安利, 裘智勇, 夏定國(guó), 錢荷英, 沈興家

1. 江蘇科技大學(xué)蠶業(yè)研究所, 鎮(zhèn)江 212003;

2. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所, 農(nóng)業(yè)部蠶桑遺傳改良重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室, 鎮(zhèn)江 212018

家蠶兩種新的類鶉斑突變體的遺傳分析和SSR標(biāo)記定位

趙巧玲1,2, 王文波1, 陳安利1, 裘智勇1,2, 夏定國(guó)1,2, 錢荷英1,2, 沈興家1,2

1. 江蘇科技大學(xué)蠶業(yè)研究所, 鎮(zhèn)江 212003;

2. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所, 農(nóng)業(yè)部蠶桑遺傳改良重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室, 鎮(zhèn)江 212018

在家蠶品種選育過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了兩種斑紋突變體, 與普通斑相比, 其幼蟲眼狀紋不明顯, 而半月紋和星狀紋正常, 其間有點(diǎn)和線構(gòu)成鶉狀斑紋, 第6、7腹節(jié)背面布有縱向波紋狀斑紋, 整體斑紋與鶉斑(quail,q)極其相似, 暫且命名為類鶉斑(quail-like, q-l)。其中一種突變體稚蠶期體色呈褐色, 蠶體發(fā)育正常, 蠶繭大小一致, 繭型正常, 稱為褐色類鶉斑(brown quail-like, q-lb); 另一種突變體幼蟲體色為淺粉紫色, 幼蟲食桑量少, 發(fā)育緩慢,體質(zhì)較弱, 體型較小, 繭型偏小, 稱為紫色類鶉斑(purple quail-like, q-lp)。遺傳分析表明, 兩個(gè)類鶉斑基因均為隱性基因; 褐色類鶉斑(q-lb)與紫色類鶉斑(q-lp) 為等位基因, 紫色類鶉斑(q-lp)對(duì)褐色類鶉斑(q-lb)為隱性。經(jīng)與形態(tài)標(biāo)記P3(2)、p(2)、Ze(3)、L(4)、re(5)、E(6)、q(7)、I-a(9)、ms(12)、ch(13)、oa(14)、cts(16)、mln(18)、 msn(19)、rb(21)、so(26)測(cè)驗(yàn)和SSR分子標(biāo)記多態(tài)性分析, 新發(fā)現(xiàn)的兩種類鶉斑不同于鶉斑(q), 其基因座位于第8連鎖群。

家蠶; 突變體; 類鶉斑; 等位基因; SSR分子標(biāo)記

家蠶(Bombyx mori)遺傳資源豐富, 是研究經(jīng)典遺傳學(xué)的極佳材料[1～4]。由于色素在皮膚中的沉積形成繁多的斑紋類型, 其中普通斑被作為幼蟲斑紋的正常型(+)。普通斑(+)在第2胸節(jié)背面有眼狀紋, 第2腹節(jié)背面有1對(duì)半月紋, 第5腹節(jié)背面有1對(duì)星狀紋。這 3對(duì)斑紋表現(xiàn)出多種變異類型, 例如鶉斑(quail, q：7-0.0)、眼紋全黑(bl：15-0.0)、淡眼紋(1es：14-?)、楔形眼紋 (Wes：6-24.3)[5]、心形眼紋(ces：14-50.7)[6]、附加半月紋(ECa：6-21.1)、淡半月紋(Icr：?)、Nc無(wú)半月紋(Nc：6-22.5)、無(wú)半月紋星狀紋 Nl(14-35.2)、多星紋 ms(12-5.5)[7]、新多星紋(19-45.8)等, 這些變異類型被不同學(xué)者進(jìn)行了不同程度的遺傳分析或基因定位研究。其中鶉斑常與普通斑形成復(fù)合斑紋, 如果與素斑形成復(fù)合斑紋, 可見鶉斑中眼狀紋不明顯, 有半月紋和星狀紋, 點(diǎn)和線構(gòu)成鶉狀斑紋, 半月紋和星狀紋外周的黑色素似有向后流動(dòng)狀, 是一種隱性突變[2]。最近, 本課題組在家蠶素斑品種0223金黃和932VR中分別發(fā)現(xiàn)了酷似鶉斑的突變體, 它們的半月紋和星狀紋正常,蠶體背面及側(cè)面有縱向波紋狀斑紋分布, 側(cè)面波紋較長(zhǎng), 背面波紋第5腹節(jié)后短而密。其中0223金黃中發(fā)現(xiàn)突變體稚蠶期體色呈褐色, 稱為褐色類鶉斑(Brown quail-like, q-lb); 932VR中發(fā)現(xiàn)的突變體幼蟲體色為淺紫紅色, 稱為紫色類鶉斑(Purple quail-like, q-lp)。為了研究這兩種突變體的特性, 本文對(duì)其進(jìn)行了遺傳分析和初步的基因定位。

1 材料和方法

1.1 突變體與形態(tài)標(biāo)志基因

連續(xù)自交 10代褐色類鶉斑(q-lb)、紫色類鶉斑(q-lp)和形態(tài)標(biāo)記基因普通斑P3(2)、素斑p(2)、虎斑Ze(3)、褐圓斑L(4)、紅卵re(5)、過(guò)剩肢E(6)、鶉斑q(7)、顯性赤蟻 I-a(9)、多星紋 ms(12) 、隱性赤蟻ch(13)、油蠶oa(14)、頰尾斑cts(16)、暗化型mln(18)、新多星紋msn(19)、紅血rb(21)、煤灰色so(26)及測(cè)試品種p50均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所保存。

1.2 遺傳規(guī)律分析方法

1.2.1 突變基因的顯隱性分析

褐色類鶉斑(q-lb)、紫色類鶉斑(q-lp)分別與正常型素斑(p)雜交和回交, 分別配制正反交F1、F2和BC1,調(diào)查各世代斑紋性狀表現(xiàn)及其分離比, 分析突變基因的顯隱性。

褐色類鶉斑(q-lb)和紫色類鶉斑(q-lp)雜交, 構(gòu)建正反交F1、F2和BC1, 鑒定兩者的關(guān)系。

1.2.2 形態(tài)標(biāo)記和分子標(biāo)記相結(jié)合定位突變基因的連鎖群

突變基因分別與形態(tài)標(biāo)記基因 P3(2)、p(2)、Ze(3)、L(4)、re(5)、E(6)、q(7)、I-a(9)、ms(12)、ch(13)、oa(14)、cts(16)、mln(18)、msn(19)、rb(21)、so(26)配制 F2群體, 調(diào)查突變基因所在連鎖群。每個(gè)雜交方式調(diào)查3蛾區(qū)。

采用SSR分子標(biāo)記方法定位。以正常型p50(+)為親本1, 以突變型褐色類鶉斑(q-lb)為親本2, 兩者相互雜交, 配制F1; F1再與q-lb回交, 配制[(+×q-lb) ×q-lb]BC1F群體、[q-lb×(+×q-lb)] BC1M群體。參考文獻(xiàn)[8], 用 SSRHunter1.3設(shè)計(jì) SSR引物, 進(jìn)行PCR擴(kuò)增, 在 p50、q-lb及其 F1中篩選多態(tài)性標(biāo)記,并以BC1F作驗(yàn)證。如果某一SSR標(biāo)記在p50、q-lb中只有1條差異擴(kuò)增帶, 而在F1中表現(xiàn)共顯性, 即2條擴(kuò)增帶, 1條同p50, 另一條同q-lb, 那么此標(biāo)記即為多態(tài)性標(biāo)記。根據(jù)家蠶雌完全連鎖特點(diǎn), BC1F群體分離出正常個(gè)體和褐色類鶉斑兩種個(gè)體, 且比例為1∶1。如果某個(gè)連鎖群的多態(tài)性標(biāo)記在BC1F群體中所有正常個(gè)體的 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的帶型同 F1一致、所有突變個(gè)體的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的帶型同親本褐色類鶉斑一致, 那么就可以基本確定此SSR標(biāo)記與突變基因連鎖。BC1M群體也分離出正常個(gè)體和褐色類鶉斑兩種個(gè)體, 且比例也為 1∶1, 進(jìn)一步用BC1M群體中褐色類鶉斑個(gè)體進(jìn)行檢測(cè), ＞50%的個(gè)體擴(kuò)增出與親本褐色類鶉斑一致的 1條帶, 其余個(gè)體則擴(kuò)增出與F1一致的2條帶, 說(shuō)明兩個(gè)親本間發(fā)生了部分交換, 證明該突變基因在此連鎖群上。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種突變體的性狀

褐色類鶉斑是從素斑品種 0223金黃中發(fā)現(xiàn)的,與其來(lái)源品種相比, 除了斑紋不同外(圖 1), 其幼蟲的發(fā)育經(jīng)過(guò)、發(fā)育狀況及體質(zhì)和繭質(zhì)都一致, 未見異常。紫色類鶉斑是從素斑品種 932VR中發(fā)現(xiàn)的,與其來(lái)源品種相比, 除了斑紋不同外(圖 1), 幼蟲發(fā)育經(jīng)過(guò)長(zhǎng)3～5 d, 蠶體發(fā)育不太整齊, 幼蟲體型較小,繭型也偏小, 全繭量為0.93 g, 繭層量為0.143 g, 繭層率為15.4%, 而932VR的全繭量為1.34 g, 繭層量為0.266 g, 繭層率為19.86%。

圖1 家蠶兩個(gè)新突變體5齡幼蟲斑紋左：紫色類鶉斑; 中：褐色類鶉斑; 右：鶉斑。

2.2 兩種突變體斑紋的顯隱性

2.2.1 突變體為隱性基因控制

將褐色類鶉斑與正常型素斑進(jìn)行雜交, 結(jié)果顯示：無(wú)論正反交, F1均表現(xiàn)正常型; F2出現(xiàn)分離現(xiàn)象,有正常型和褐色類鶉斑兩種表型, 其分離比為3∶1;以正常型作為回交親本, 與正反交 F1進(jìn)行回交, 回交后代均表現(xiàn)為正常型; 以褐色類鶉斑作為回交親本, 與正反交 F1進(jìn)行回交, 回交后代表現(xiàn)出正常型和褐色類鶉斑兩種表型, 其分離比為1∶1(表1)。由此可見, 褐色類鶉斑由1個(gè)隱性基因q-lb控制, 且位于常染色體上。同樣, 將紫色類鶉斑(q-lp)與正常型素斑進(jìn)行雜交, 表現(xiàn)出相同的遺傳模式, 由 1個(gè)隱性基因q-lp控制(數(shù)據(jù)略), 表現(xiàn)出非伴性遺傳。

2.2.2 褐色類鶉斑基因(q-lb)和紫色類鶉斑基因(q-lp)是等位基因

將褐色類鶉斑與紫色類鶉斑進(jìn)行雜交和回交,結(jié)果無(wú)論正交還是反交, F1均表現(xiàn)為褐色類鶉斑; F2出現(xiàn)分離現(xiàn)象, 有褐色類鶉斑和紫色類鶉斑兩種表型, 其分離比為 3∶1; 以褐色類鶉斑作為回交親本,與正反交 F1進(jìn)行回交, 回交后代均表現(xiàn)為褐色類鶉斑; 以紫色類鶉斑作為回交親本, 與正反交 F1進(jìn)行回交, 回交后代表現(xiàn)出褐色類鶉斑和紫色類鶉斑兩種表型, 其分離比為1∶1(表2)。由此可見, 褐色類鶉斑與紫色類鶉斑可能是 1對(duì)相對(duì)性狀, 紫色類鶉斑對(duì)褐色類鶉斑為隱性性狀。

2.3 兩種突變體斑紋的連鎖分析

2.3.1 用形態(tài)標(biāo)記連鎖分析

分別以P3(2)、p(2)、Ze(3)、L(4)、re(5)、E(6)、q(7)、I-a(9)、ms(12)、ch(13)、oa(14)、cts(16)、mln(18)、msn(19)、rb(21)、so(26) 為形態(tài)標(biāo)記, 與類鶉斑雜交(以褐色類鶉斑為例), 配制 F1和 F2群體, 調(diào)查分離比。F1均未分離, 且無(wú)類鶉斑出現(xiàn), 說(shuō)明類鶉斑不在第 2、3、4、5、6、7、9、12、13、14、16、18、19、21、26連鎖群。F2出現(xiàn)分離, 除了第7連鎖群外, 其余的都出現(xiàn)9∶3∶3∶1分離比, 以第2連鎖群普通斑 P3(2)檢測(cè)為例, 結(jié)果見表 3。將褐色類鶉斑與普通斑進(jìn)行雜交, 無(wú)論正反交F1均表現(xiàn)普通斑; F2出現(xiàn)分離現(xiàn)象, 有普通斑、素斑、褐色類鶉斑與普通斑疊加、褐色類鶉斑4種表型, 其分離比為9∶3∶3∶1; 以普通斑作為回交親本, 與正反交F1進(jìn)行回交, 回交后代均表現(xiàn)為普通斑; 以褐色類鶉斑作為回交親本, 與正反交 F1進(jìn)行回交, 回交后代表現(xiàn)出普通斑、素斑、褐色類鶉斑與普通斑疊加、褐色類鶉斑4種表型, 其分離比為1∶1∶1∶1。由此可見, 從素斑品種0223金黃中突變的褐色類鶉斑以素斑為基礎(chǔ)斑紋, 基因型為pp q-lbq-lb。

表1 褐色類鶉斑(q-lbq-lb)與正常型素斑(++)雜交各世代的性狀分離

表2 褐色類鶉斑和紫色類鶉斑雜交各世代性狀分離

2.3.2 用SSR分子標(biāo)記連鎖分析

在第7、8、10、11、15、17、20、22、23、24、25、27、28連鎖群設(shè)計(jì)SSR引物, 在p50、褐色類鶉斑及其F1間篩選多態(tài)性標(biāo)記。在p50、褐色類鶉斑均擴(kuò)增出 1條帶, 但兩者間具有多態(tài)性, 表現(xiàn)出分子量差異, 在 F1中擴(kuò)增出 2條帶, 共顯性兩個(gè)親本的帶型。進(jìn)一步以BC1F群體中10個(gè)正常個(gè)體和10個(gè)褐色類鶉斑個(gè)體進(jìn)行驗(yàn)證, 只有第8連鎖群的多態(tài)性標(biāo)記 S0805(引物 chr08-5F：AATAGACCCAAGACAAGG; chr08-5R：TTACTACTACGAACCGAAA)在BC1F群體中所有正常個(gè)體的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的帶型一致, 同 F1表型為 2條帶, 所有突變個(gè)體的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的帶型一致, 同親本褐色類鶉斑為1條帶(圖2A)。進(jìn)一步在第8連鎖群篩選到多態(tài)性SSR標(biāo)記W0808(引物chr08-8F： CGCTCGCATAATGTGATA; chr08-8R：CGAAGGGGCCATATTTAA),其BC1F群體驗(yàn)證結(jié)果與S0805相同(圖2B)。利用BC1M群體中45個(gè)褐色類鶉斑個(gè)體進(jìn)行檢測(cè), 有44個(gè)個(gè)體擴(kuò)增出與親本褐色類鶉斑一致的1條帶, 1個(gè)個(gè)體則擴(kuò)增出與F1一致的2條帶, 說(shuō)明兩個(gè)親本間發(fā)生了部分交換(圖3)。其他連鎖群的多態(tài)性標(biāo)記在BC1F群體中驗(yàn)證沒(méi)有呈現(xiàn)規(guī)律性。由此確定第8連鎖群的多態(tài)性SSR標(biāo)記與突變基因連鎖, 即褐色類鶉斑基因位于第8連鎖群。

表3 褐色類鶉斑與普通斑雜交各世代性狀分離

圖2 SSR標(biāo)記S0805(A)、W0808(B)在褐色類鶉斑BC1F群體中的擴(kuò)增電泳圖譜1：親本P50(P1); 2：F1代個(gè)體; 3：親本褐色類鶉斑(P2); 4～13：BC1F群體中正常型個(gè)體; 14～23：BC1F群體中突變型個(gè)體。

圖3 W0808標(biāo)記在褐色類鶉斑BC1M群體中的擴(kuò)增電泳圖譜1：親本P50(P1); 2：F1代個(gè)體; 3：親本褐色類鶉斑(P2); 4～16：BC1M群體中突變型個(gè)體。

2.3.3 褐色類鶉斑(q-lb)與鶉斑(q)的連鎖分析

鶉斑常常以普通斑或素斑為基礎(chǔ)斑紋, 為了排除普通斑的干擾, 選擇以素斑為基礎(chǔ)斑紋的鶉斑(quail, q：7-0.0)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將類鶉斑與鶉斑進(jìn)行雜交, 由于突變體斑紋與鶉斑極其類似, 肉眼無(wú)法分辨, F2出現(xiàn)素斑與(類)鶉斑(鶉斑或類鶉斑之和)的分離比為9∶7, 經(jīng)χ2測(cè)驗(yàn), P＞0.05(表4)。此現(xiàn)象類似于非等位基因間的互作關(guān)系, 類鶉斑與鶉斑有“互補(bǔ)關(guān)系” (Complementary genes)。

在第 7連鎖群篩選到多態(tài)性 SSR標(biāo)記 S39495 (引物 chr07-39495F：GGCATCCGATTGACTTGA; chr07-39495R：TGGGTAATGGCAACAACG), 在BC1F群體中用10個(gè)正常個(gè)體和10個(gè)褐色類鶉斑驗(yàn)證, 沒(méi)有呈現(xiàn)規(guī)律性(圖4)。說(shuō)明褐色類鶉斑與鶉斑不連鎖。

綜上所述, 可以看出盡管類鶉斑與鶉斑表型相似, 但為非等位基因, 也不是擬等位基因。類鶉斑是一個(gè)新基因。

3 討 論

家蠶幼蟲斑紋易于識(shí)別, 是遺傳學(xué)研究的極好材料, 其類型繁多, 有的是多種斑紋組合而成的復(fù)合斑紋, 蔣同慶[2]將第二連鎖群的 p等位基因群作為基礎(chǔ)斑紋, 將Ze、L和q等作為附加斑紋。這種方法使復(fù)雜的斑紋組合分類更清晰, 識(shí)別更容易。類鶉斑也可以理解為復(fù)合斑紋, 即在素斑基礎(chǔ)上附加了類鶉斑(在第2腹節(jié)背面有1對(duì)半月紋、在第5腹節(jié)背面有 1對(duì)星狀紋以及在側(cè)面和背面有向后流動(dòng)的短線波紋)。

褐色類鶉斑與紫色類鶉斑是 1對(duì)相對(duì)性狀, 受等位基因控制, 紫色類鶉斑對(duì)褐色類鶉斑為隱性性狀。它們不僅主體斑紋相似, 而且其雜交后代分離比例符合孟德爾1對(duì)相對(duì)性狀分離規(guī)律。但是它們?cè)谏L(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的表型有一些有差異, 紫色類鶉斑相對(duì)于褐色類鶉斑, 蠶體膚色為淺紫紅色, 稚蠶及蛻皮后特別明顯, 食桑量少, 發(fā)育緩慢且不整齊,體質(zhì)較弱, 體型較小, 大小不一, 蠶繭大小不一致,繭型偏小。家蠶中常常有同種斑紋類型, 也因溫濕度等環(huán)境條件的影響, 斑紋顏色還有濃淡差別。斑紋深淺差異還與蠶兒的發(fā)育階段有關(guān), 一般是同一齡期中起蠶濃而盛食期淡。同種斑紋內(nèi)濃淡型間相互雜交, 整體上均表現(xiàn)為等位基因的遺傳模式[9]。

通過(guò)形態(tài)標(biāo)記和分子標(biāo)記相結(jié)合連鎖分析, 類鶉斑被定位于第8連鎖群, 是不同于鶉斑 q的新基因。類鶉斑與鶉斑是非等位基因, 它們雜交的F2出現(xiàn)非鶉斑(素斑112頭)與鶉斑(鶉斑或類鶉斑共86頭)的分離比為9∶7。此現(xiàn)象類似與非等位基因間的互作關(guān)系, 類鶉斑與鶉斑有“互補(bǔ)關(guān)系”, 即兩種非等位顯性基因同時(shí)存在時(shí), 才出現(xiàn)某一性狀(非鶉斑),當(dāng)只有一種基因是顯性, 或兩對(duì)基因都是隱性時(shí),則表現(xiàn)為另一種性狀(鶉斑)。

鶉斑的表皮為淺紫紅色, 含有棕色顆粒和白黃色顆粒, 棕色顆粒中包含眼色素, 而白黃色顆粒包含有碟啶類和尿酸。在整個(gè)發(fā)育過(guò)程中鳥苷三磷酸環(huán)化水解酶 GTPCH的活性和碟啶的含量都比正常個(gè)體高, 而且四氫生物碟呤BH4含量的變化幾乎與GTPCH的活性變化一致。說(shuō)明碟啶的生物合成與黑色素和眼色素的形成密切相關(guān)[10～12]。紫色類鶉斑不僅與鶉斑斑紋相似, 其表皮同樣為淺紫紅色, 推測(cè)有同樣的色素沉積, 但與鶉斑的控制基因卻不同,它們的色素代謝途徑是不是也有所不同呢？這是值得深入研究的課題, 也是我們發(fā)現(xiàn)并分析兩個(gè)突變體的意義所在。今后, 我們將進(jìn)一步進(jìn)行類鶉斑基因的精細(xì)定位及功能研究。

表4 褐色類鶉斑(q-lbq-lb)與鶉斑(q q)雜交各世代性狀分離

圖4 S39495在褐色類鶉斑BC1F群體中的擴(kuò)增電泳圖譜1：親本P50(P1); 2：F1代個(gè)體; 3：親本褐色類鶉斑(P2); 4～13：BC1F群體中正常型個(gè)體; 14～23：BC1F群體中突變型個(gè)體。

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(責(zé)任編委: 李紹武)

Genetic analysis and gene mapping of two novel quail-like mutants from the silkworm (Bombyx mori)

Qiaoling Zhao1,2, Wenbo Wang1, Anli Chen1, Zhiyong Qiu1,2, Dingguo Xia1,2, Heying Qian1,2, Xingjia Shen1,2

1. The Sericultural Research Institute of Jiangsu University of Science and Technology, Zhenjiang 212003, China;
2. Key Laboratory of Silkworm and Mulberry Genetic Improvement, Ministry of Agriculture; Sericultural Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Zhenjiang 212018, China

Two novel body marking mutants were discovered during silkworm (Bombyx mori) breeding. The mutants have no obvious eye-spots compared with normal marking (+) individuals, but their star spots and semilunar markings on dorsal sides are normal, and there are dots and lines with longitudinal wave markings on dorsal sides of the 6thto 7thabdominal segments which consist quail markings in between star spots and semilunar markings. The whole body markings are very similar to that of quail mutant (q); thus these mutants are named as quail-like mutants (q-l). Young larvae of one mutant are in brown color, and develop normally. Their cocoons are regular and uniform in size. Thus, this mutant is designated asbrown quail-like (q-lb). Another mutant’s larvae are in light purple skin; thus this mutant is named as purple quail-like (q-lp). They take little amount of mulberry leaves, and are weak and develop slowly and unevenly. Their larval bodies and cocoons are small. Genetic analysis revealed that both q-lband q-lpwere recessive genes, and they were allelic, with q-lbrecessive to q-lp. These genes are different from quail mutant (q) and located on the chromosome 8 after tested by the morphological markers, P3(2), p(2), Ze(3), L(4), re(5), E(6), q(7), I-a(9), ms(12), ch(13), oa(14), cts(16), mln(18), msn(19), rb(21) and so(26) and SSR markers.

Bombyx mori; mutant; quail-like body marking (q-l); allele; SSR

2013-11-12;

2013-12-17

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：31372378), 江蘇省科技支撐計(jì)劃(農(nóng)業(yè))項(xiàng)目(編號(hào)：BE2011327-2)和“十二五”國(guó)家支撐計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：2011BAD33B04)資助

趙巧玲, 博士, 研究員, 研究方向：家蠶遺傳育種和分子生物學(xué)。Tel: 0511-85616707, E-mail: qlzhao302@126.com

10.3724/SP.J.1005.2014.0369

時(shí)間: 2014-3-27 14:33:47

URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1913.R.20140327.1433.004.html