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      miR—126在冠脈病變中的表達及與血脂相關性的臨床研究

      2014-06-10 16:30:46鄭煒華吳學周張愛鵬
      中國現(xiàn)代醫(yī)生 2014年12期
      關鍵詞:脂質硬化血脂

      鄭煒華 吳學周 張愛鵬

      [摘要] 目的 觀察冠心病患者血液中miR-126表達的變化,探討其與冠脈病變、血脂相關的臨床意義。方法 收集2011年3月~2013年6月我院心內科診治的冠心病患者98例,另取本院同期健康體檢者40例作為對照組。miR-126表達使用熒光定量PCR檢測。結果 對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組 (P <0.05),對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組 (P <0.05)。miR-126、TC 、LDL-C和HDL-C表達在單支病變組、雙支病變組和多支病變組之間存在顯著性差異 (P <0.05)。miR-126與TC表達呈顯著負相關(r=-0.324, P <0.05),與LDL-C表達亦呈顯著負相關(r=-0.381, P <0.05),而與HDL-C表達呈顯著正相關(r=0.416,P <0.05)。 結論 冠心病患者中miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關,與HDL-C表達呈顯著正相關,miR-126表達隨著冠脈病變分支的增加而逐漸下調,miR-126的檢測可用于冠心病患者冠脈病變程度的評估。

      [關鍵詞] 冠心??;miR-126;血脂

      [中圖分類號] R587.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2014)12-0088-02

      [Abstract] Objective To detect the expression of plasma circulating miR-126 and explore its clinical significance in patients with coronary atherosclerotic heart diease (CHD). Methods A total of 98 patients with CHD were enrolled in this study. Another 40 healthy person were collected as control. The expression of miR-126 was detected with Real time-PCR assay. Results The expression of miR-126 and HDL-C in control group was higher than that in CHD group(P <0.05). The expression of miR-126, TC, LDL-C and HDL-C were significant difference among single-vessel group, double-vessel group, and many-vessel group(P <0.05). The expression of miR-126 was significantly negative correlation with TC (r = -0.324, P <0.05) and LDL-C(r = -0.381, P <0.05). The expression of miR-126 was significantly positive correlation with HDL-C(r = 0.416, P <0.05). Conclusion The low-level expression of miR-126 is found in CHD patients. The expression of miR-126 is gradually reduced according to increased coronary artery branch lesion. Detection of miR-126 may be used for early diagnosis and evaluation of CHD.

      [Key words] Coronary atherosclerotic heart diease(CHD); The miR-126; Lipid

      microRNA(miRNA)是一類長約18~24 個核苷酸的小分子非編碼單鏈RNA,其通過與靶基因互補配對,在翻譯水平調控基因的表達[1]。miRNA廣泛表達于各種組織和器官,在細胞的增殖和凋亡、器官形成、血液形成、發(fā)育進程等生命過程中發(fā)揮著重要的作用[2]。miR-126是與血管內皮細胞以及血管功能密切相關的一種miRNA,定位于表皮生長因子樣結構域7基因7號內含子區(qū)[3,4]。以動脈粥樣硬化病變?yōu)榛A的冠心?。╟oronary heart disease,CHD)是嚴重威脅人類健康的常見心血管疾病,本研究觀察了CHD患者血液循環(huán)中miR-126表達的變化,并探討其相關臨床意義。

      1 材料與方法

      1.1 臨床資料

      收集2011年3月~2013年6月我院心內科診治的冠心病患者98例,其中男52例,女46例,年齡51~75歲,平均(61.4±11.3)歲,所有冠心病患者均經冠狀動脈造影檢查確診。根據(jù)冠脈病變范圍分為:30例單支病變組、36例雙支病變組、32例多支病變組。另取本院同期健康體檢者40例作為對照組,四組受試者在性別、年齡等一般臨床資料方面差異無統(tǒng)計學意義,具有可比性(P>0.05)。

      1.2 血脂的檢測

      總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白 (LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)生化指標的檢測由檢驗科完成。

      1.3 miR-126表達的熒光定量PCR(Real time-PCR)檢測

      參照鄭志偉等[5]的方法,采集受試者靜脈血2 mL,3000 r/min 15min分離上清,加入Trizol(大連寶生物科技有限公司),按照試劑說明提取細胞總RNA,逆轉錄莖環(huán)引物和M-MLV逆轉錄酶(北京天根生物科技技術有限公司)反轉錄,TaqDNA聚合酶、Has-miR-126莖環(huán)引物和SYBR Green熒光染料(上海吉瑪生物科技技術有限公司)定量檢測miR-126的表達量。Has-miR-126莖環(huán)引物序列為5'-TATCCAGTGATTCCGACCGCCGCATGGAGTCTG-3'(sence)和5'- TCCGCTCTTGGTGTGGTGTGAGTCGC-3'(antisence),miR-126的表達量使用2-△Ct評估。endprint

      1.4 統(tǒng)計學分析

      應用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)±標準差表示,兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗,多組均數(shù)間的比較采用方差分析,Pearson相關性分析檢測各檢測指標的相關關系,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

      2 結果

      2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關系

      從表1可見,對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組(P < 0.05),對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組(P < 0.05)。

      3 討論

      冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了,因此臨床上也缺乏有效的防治手段,探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關注,并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達,與40份健康對照的血漿樣本比較,發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組,提示了miR-126表達的下調可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導致局部血管壁的脂質沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8], TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子,HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子,相關性分析顯示,miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關,與HDL-C表達呈顯著正相關,提示了miR-126可能調控著某些脂質代謝相關的基因,冠心病患者中miR-126表達的下調可能導致了患者脂質代謝的紊亂,其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

      本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢,提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示,miR-126可以調控血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達[10],大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11],例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長,以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑,參與到血管壁的慢性炎癥中[12],這可能也是miR-126表達的下調致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint

      1.4 統(tǒng)計學分析

      應用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)±標準差表示,兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗,多組均數(shù)間的比較采用方差分析,Pearson相關性分析檢測各檢測指標的相關關系,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

      2 結果

      2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關系

      從表1可見,對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組(P < 0.05),對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組(P < 0.05)。

      3 討論

      冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了,因此臨床上也缺乏有效的防治手段,探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關注,并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達,與40份健康對照的血漿樣本比較,發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組,提示了miR-126表達的下調可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導致局部血管壁的脂質沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8], TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子,HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子,相關性分析顯示,miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關,與HDL-C表達呈顯著正相關,提示了miR-126可能調控著某些脂質代謝相關的基因,冠心病患者中miR-126表達的下調可能導致了患者脂質代謝的紊亂,其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

      本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢,提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示,miR-126可以調控血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達[10],大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11],例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長,以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑,參與到血管壁的慢性炎癥中[12],這可能也是miR-126表達的下調致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint

      1.4 統(tǒng)計學分析

      應用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)±標準差表示,兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗,多組均數(shù)間的比較采用方差分析,Pearson相關性分析檢測各檢測指標的相關關系,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

      2 結果

      2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關系

      從表1可見,對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組(P < 0.05),對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組(P < 0.05)。

      3 討論

      冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了,因此臨床上也缺乏有效的防治手段,探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關注,并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達,與40份健康對照的血漿樣本比較,發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組,提示了miR-126表達的下調可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導致局部血管壁的脂質沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8], TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子,HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子,相關性分析顯示,miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關,與HDL-C表達呈顯著正相關,提示了miR-126可能調控著某些脂質代謝相關的基因,冠心病患者中miR-126表達的下調可能導致了患者脂質代謝的紊亂,其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

      本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢,提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示,miR-126可以調控血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達[10],大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11],例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長,以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑,參與到血管壁的慢性炎癥中[12],這可能也是miR-126表達的下調致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint

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