何那拉 包明蘭 巴根那

( 內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

鐵屑為銼削加工金屬鐵所得粉末，是蒙醫(yī)藥常用藥物之一。具有解毒、清肝熱、消浮腫、醫(yī)眼疾功能［1］。臨床經(jīng)訶子湯制后應(yīng)用。據(jù)研究，鐵屑經(jīng)訶子湯制后生成易溶于水的亞鐵鹽，便于人體吸收;其傳統(tǒng)浸泡法工藝簡(jiǎn)便、省工省時(shí)、成品Fe2+含量高。但是傳統(tǒng)的炮制方法在鐵屑的粒度、訶子湯用量、浸泡時(shí)間及烘干溫度等方面無規(guī)范，本研究考慮以上4 個(gè)因素且每個(gè)因素選取3 個(gè)水平，選用L9(3)4 正交表設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案，采用比色法測(cè)定訶子湯浸泡鐵屑工藝對(duì)Fe2+含量的影響，從而建立訶子湯浸泡鐵屑的最佳炮制工藝條件。

1 材料及試劑

1.1 藥材: 鐵屑(批號(hào)2013004、2013010、2013009)、訶子(批號(hào)2013014): 由內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室提供。硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)1116 -200301): 由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供。

1.2 儀器: T6 新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)，BS224S 電子天平，JM 電子天平，DZTW 調(diào)溫電熱套，回流裝置。

1.3 試劑: 0.1%鄰二氮菲水溶液(臨用時(shí)配置);1%鹽酸羥胺水溶液(臨用時(shí)配置);醋酸- 醋酸鈉緩沖液(pH4.6)。

2 方法及結(jié)果［2 ～3］

2.1 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備: 精密稱取硫酸鐵銨0.022g，置25 mL 容量瓶中加1 mol·L-1的鹽酸10 mL，溶解后加水稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制: 精密吸取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液0.5、1.5、2.5、3.5、4.5 mL，分別置于25mL 容量瓶中，依次分別加入醋酸—醋酸鈉緩沖液2.5mL，1%鹽酸羥胺溶液1 mL，0.1%鄰二氮菲溶液2.5 mL，用水稀釋至刻度，搖勻。以試劑為空白對(duì)照，在紫外-分光光度計(jì)508 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為y =2.136 4x +0.237(r=0.9986)。結(jié)果見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)值表

2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì): 采用L9(34)正交設(shè)計(jì)法，選定鐵屑粒度、訶子湯用量、浸泡時(shí)間、烘干溫度為4 個(gè)因素，每個(gè)因素選取3 個(gè)水平，結(jié)果見表2。

表2 因素水平表

2.4 樣品制備: 根據(jù)L9(34)正交表設(shè)計(jì)方案，稱取A 粒度的鐵屑10 g，置燒杯中，加入B 倍量訶子湯煎煮液，浸泡C天，過濾，在D 溫度下烘干，備用。

2.5 供試品溶液的制備: 分別精密稱取9 份炮制樣品約2.0 g，置燒杯中，加100 mL 水，煮沸30 min，過濾，濾渣再加80 mL 水，煮沸20 min，過濾，濾渣再用水洗滌2 次，每次20 mL，合并濾液，移入250 mL 量瓶中，加1 mol·L-1鹽酸25 mL，用水稀釋至刻度，搖勻即得。

2.6 Fe2+含量測(cè)定: 精密吸取供試品溶液1mL，置25mL容量瓶中，依次分別加入乙酸-乙酸鈉緩沖液2.5 mL，1%鹽酸羥胺溶液1mL，0.1%鄰二氮菲溶液2.5mL，用水稀釋至刻度，搖勻即得。在紫外-分光光度計(jì)508 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。按外表一點(diǎn)法計(jì)算Fe2+含量，結(jié)果見表3。

方差分析結(jié)果表明，A 因素即鐵屑粒度對(duì)Fe2+含量有顯著性差異(P＜0.05)，即鐵屑過40 目篩子，其他因素對(duì)Fe2+含量無差異。從表3，直觀分析結(jié)果表明A3B3C3D2為最好。在9 個(gè)試驗(yàn)中A3B1C3D2 方案的Fe2+含量最高(4.92%)。于是我們比較研究了A3B3C3D2 與A3B1C3D2工藝制鐵屑的Fe2+含量，含量分別為4.09%、1.09%。故選擇了訶子湯浸泡鐵屑的最佳炮制工藝為: A3B3C3D2，即鐵屑過40 目篩子，訶子湯用量為藥材的15 倍，浸泡時(shí)間為7d，烘干溫度為50℃。

表3 正交試驗(yàn)中Fe2+含量結(jié)果

表4 Fe2+含量方差分析表

2.7 制鐵屑中Fe2+含量測(cè)定: 精密稱取最佳炮制工藝炮制的鐵屑粉末2.0 g，按上述方法提取，在紫外-分光光度計(jì)508 nm 處檢測(cè)吸光度，計(jì)算Fe2+含量。結(jié)果見表5。

表5 制鐵屑中Fe2+含量測(cè)定結(jié)果

3 討 論

3.1 鐵屑為銼削加工金屬鐵所得粉末，是蒙醫(yī)藥常用藥物之一。具有解毒、清肝熱、消浮腫、醫(yī)眼疾功能。鐵是生命體不可缺少的必需元素，也是人體中最豐富的微量金屬。鐵對(duì)保持機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的平衡，維持人體的健康起著至關(guān)重要的作用。鐵屑的傳統(tǒng)炮制方法有訶子湯浸泡、水柏枝湯浸泡和訶子湯煎煮等［4～5］。訶子湯制鐵屑是為了促進(jìn)Fe2+的溶出，制鐵屑中Fe2+含量為4.09%而生鐵屑中Fe2+含量為0.02%，故訶子制鐵屑促進(jìn)了Fe2+的溶出，有利于人體對(duì)鐵的吸收而發(fā)揮療效。

3.2 訶子湯的提取方面，我們摸索了50g 訶子，加10 倍量水煎煮1 次;加8 ～10 倍量水煎煮2 次;加6 ～10 倍量水煎煮3 次，結(jié)果以加8 ～10 倍量水煎煮2 次的訶子湯浸泡后的鐵屑中Fe2+含量最好。故選用了加訶子藥材的8 ～10倍量水，煎煮2 次。

3.3 訶子制鐵屑的工藝在古籍書中均有記載，但沒有統(tǒng)一的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和炮制規(guī)范。本文在傳統(tǒng)工藝基礎(chǔ)上對(duì)鐵屑粒度、訶子湯用量、浸泡時(shí)間及烘干溫度等因素進(jìn)行篩選研究，確定對(duì)炮制結(jié)果有明顯影響的指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法，對(duì)訶子制鐵屑的工藝進(jìn)行優(yōu)化和規(guī)范。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鐵屑粒度對(duì)Fe2+含量有顯著性差異(P＜0.05)，即鐵屑過40 目篩子，其他因素對(duì)Fe2+含量無差異。綜合考慮，訶子湯浸泡鐵屑的最佳炮制工藝為: A3B3C3D2，即鐵屑過40 目篩子，訶子湯用量為藥材的15 倍，浸泡時(shí)間為7d，烘干溫度為50℃。

［1］清·伊舍巴拉珠爾著.認(rèn)藥白晶鑒［M］. 1966：50.

［2］白明綱，貧鋒嘎. 正交試驗(yàn)法研究蒙藥鐵屑炮制工藝［J］. 中藥材，1991，14(2) ：26 -28.

［3］國(guó)家藥典委員會(huì)，中華人民共和國(guó)藥典［S］. 二部. 北京：中醫(yī)藥科技出版社，2010：168，173，175，179.

［4］紅梅，烏仁圖雅.鐵粉的炮制［J］. 中國(guó)蒙醫(yī)藥，2007，1：66 -67.

［5］畢力夫.蒙藥炮制文獻(xiàn)研究［M］. 內(nèi)蒙古人民出版社，2007：198.

［6］吳香杰. 蒙藥炮制學(xué)［M］. 內(nèi)蒙古人民出版社，2011：301.