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      中國石蒜不同居群的花色變異

      2014-07-18 04:06:19鄭玉紅李瑩陳默束曉春彭峰夏冰
      江蘇農(nóng)業(yè)科學 2014年2期
      關(guān)鍵詞:花色素花色

      鄭玉紅+李瑩+陳默+束曉春+彭峰+夏冰

      摘要:觀察了5個中國石蒜居群的花色和花型,采用RHSCC比色卡比對后發(fā)現(xiàn)其花色屬黃色和橙黃色系;花瓣在寬度及卷曲和皺縮的程度上也存在變異;部分居群花瓣背面淡綠色的中肋與忽地笑相似?;ㄉ仫@色反應結(jié)果表明中國石蒜居群間花色素組分在羥基化方面發(fā)生了明顯的變異。

      關(guān)鍵詞:中國石蒜;花色;花色素;顯色反應

      中圖分類號: S682.2+90.1文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2014)02-0141-02

      收稿日期:2013-06-18

      基金項目:江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號:CX(11)1016];江蘇省科技支撐計劃(編號:BE2011440)。

      作者簡介:鄭玉紅(1976—),女,河南潢川人,博士,副研究員,主要從事觀賞植物資源收集評價和改良等方面的研究。E-mail:friend266@163.com。

      通信作者:夏冰,博士,研究員,從事植物分子生物學方面的研究。E-mail:xiabingnbg@ sina.com。中國石蒜(Lycoris chinensis)為石蒜科(Amaryllidaceae)石蒜屬(Lycoris Herb.)植物,其葉片線形,深綠色;花黃色,花期在7-8月,早春出葉[1-2]。分布于河南、江蘇、浙江。其抗逆性和適應性強,對土壤要求不嚴,可用做林下地被,花境叢植或山石間自然式栽植,也可作盆栽或切花等,具有很高的觀賞價值。

      花色是花卉最重要的觀賞性狀,也是花卉新品種培育最重要的目標性狀之一。石蒜屬植物的花色主要隸屬紅色、黃色和白色3個色系。如石蒜(L.radiata)為紅色花,忽地笑(L.aurea)、中國石蒜為黃色花,長筒石蒜(L.longituba)、江蘇石蒜(L. houdyshelii)為白色花。也有部分種類為復色花,如換錦花(L. sprengeri)花淡紫紅色,花被片的頂端帶有藍色;稻草石蒜(L.straminea)花稻草色,但在花被片的腹面散生粉紅色的條紋或斑點[1-2]。石蒜屬花色素的主要成分為矢車菊素、天竺葵素的3-O葡萄糖苷和3-木糖基葡萄糖苷等三糖苷類化合物[3]。He等[4]發(fā)現(xiàn)長筒石蒜花色除了白色及其變種黃長筒(L. longituba var. flava)的黃色外,還存在紫色和橙色;并使用分光色差儀測定了其花色CIELAB表色系統(tǒng)的各個參數(shù),采用HPLC-DAD/ESI-MS確定長筒石蒜中的花青素組成,首次在石蒜屬植物中鑒定出矢車菊-3-槐糖苷(Cy3So)和矢車菊素-3-接骨木二糖苷(Cy3Sa);同時還克隆到了與長筒石蒜花色相關(guān)的6個基因的全長cDNA序列,并用RT-PCR方法分析了其在不同花色長筒石蒜中的時空表達;轉(zhuǎn)長筒石蒜花色基因的矮牽牛的花色也發(fā)生了一定的變化[5]。

      由于我國對石蒜屬植物研究起步晚,研究的系統(tǒng)性和深度均遠遠不夠,尚未見用于觀賞的石蒜屬新品種培育成功。因此,對石蒜屬植物的花型、花色進行詳細、系統(tǒng)的觀察和研究,對于其新品種的選育和培育具有重要的意義。我們在中國石蒜資源調(diào)查過程中,發(fā)現(xiàn)不同居群花色存在明顯的變異。本研究以不同居群的中國石蒜為材料,對其花色素組分進行初步分析,為中國石蒜花色新品種的選育和培育提供依據(jù)。

      1材料與方法

      1.1材料

      供試中國石蒜分別采自浙江杭州、江蘇宜興、江蘇寶華山、江蘇南京和安徽瑯琊山,并種植于江蘇省中國科學院植物研究所苗圃內(nèi)。

      1.2方法

      1.2.1比色卡(RHSCC)比色取供試中國石蒜不同居群的花瓣,在室內(nèi)靠近由北面射入的日光光源下避免日光直射,將花瓣中上部分與英國皇家園藝協(xié)會比色卡(RHSCC)進行對比,描述花色;同時根據(jù)《中國植物志》[1]和《Flora of China》[2]的記載,對各居群花瓣的卷曲和皺縮情況及背面中肋的顏色進行描述。

      1.2.2花色素組分測定在盛花期采集中國石蒜的花瓣,去掉雄蕊和雌蕊,放入50 ℃烘箱中烘24 h,然后研成粉末放入牛皮紙袋中,放入干燥器中避光干燥保存。

      1.2.2.1花色素的定性分析取中國石蒜不同居群的花瓣粉末各0.10 g,分別用鹽酸化甲醇溶液VHCl ∶VMeOH=1 ∶99提取15 h,過濾,定容至25 mL,各取2 mL提取液,參照安田齊[6]的方法進行顯色反應。

      1.2.2.2類胡蘿卜素檢測取花瓣粉末0.10 g,用 石油醚 ∶丙酮=1 ∶1(體積比)提取,定容至10 mL,采用 Beckman公司生產(chǎn)的 DU 800型紫外-可見分光光度計在400~500 nm 掃描。

      2結(jié)果與分析

      2.1中國石蒜不同居群的花色及其花部性狀

      目測結(jié)果(表1)表明,中國石蒜5個居群中,2個居群的花色屬于黃色組,3個居群的花色屬于黃橙色組,在RHSCC比色卡上分別對應黃色組11A、6B和黃橙色16A、21A、23B。

      從花部性狀上看,來自安徽瑯琊山居群的花瓣比其他居群窄,而且反卷和皺縮的程度不如其他居群;來自江蘇南京居群的花冠筒略短于其他居群;除浙江杭州居群的花瓣背面中居群RHSCC顏色花色花部性狀浙江杭州 黃橙色組23B橘黃色花瓣高度反卷和皺縮,背面中肋淡黃色,雄蕊不伸出或略伸出花被外?;ü谕?~2.5 cm江蘇南京 黃色組6B檸檬黃色花瓣中度反卷和皺縮,基部淡綠色,背面中肋淡綠色,雄蕊與花被片近等長。花冠筒1.5~2 cm安徽瑯琊山黃色組11A哈密瓜黃色花瓣較窄且中度反卷和皺縮,背面中肋明顯淡綠色,雄蕊不伸出或略伸出花被外。花冠筒2~2.5 cm江蘇寶華山黃橙色組16A橘黃色花瓣高度反卷和皺縮,背面中肋基部淡綠色,雄蕊不伸出或略伸出花被外?;ü谕?~2.5 cm江蘇宜興黃橙色組21A橘黃色花瓣高度反卷和皺縮,背面中肋基部淡綠色,雄蕊略伸出花被外?;ü?.5~3 cm肋為淡黃色,與《中國植物志》中的記載相同外,其余居群花瓣背面中肋均為淡綠色,與忽地笑的相似。endprint

      2.2中國石蒜不同居群花瓣色素提取物的顯色反應

      5個中國石蒜居群的花瓣提取物的顯色反應結(jié)果見表2。由表2及黃酮類化合物的顯色反應特點[7]可知,石油醚反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在石油醚中呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,表明其含有類胡蘿卜素;來自江蘇寶華山的居群黃綠色最深,表明其類胡蘿卜素含量最高。鹽酸反應:浙江杭州居群的花瓣色素提取物在10%的鹽酸中呈無色,說明其花色苷含量極低或無;江蘇宜興居群呈淺棕黃色略帶粉色,說明其含有花色苷;江蘇南京居群呈棕黃色帶粉色,說明其含有花色苷及其他類黃酮類化合物;安徽瑯琊山居群呈棕黃帶粉色說明其含有黃酮類化合物。氨水反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在氨水中無紅、紫色出現(xiàn),說明它們可能不含有查爾酮、橙酮;浙江杭州和江蘇寶華山居群均呈現(xiàn)不同的黃色,表明其含有黃酮類化合物;江蘇南京、安徽瑯琊山和江蘇宜興呈現(xiàn)不同程度的棕色,表明其含有鄰二酚羥基黃酮。濃鹽酸-鎂粉反應:5個中國石蒜居群的花瓣提取物在濃鹽酸-鎂粉呈現(xiàn)不同程度的淺黑色略帶藍色,可能是其所含類黃酮類化合物中B環(huán)中含有-OH、-OCH3取代基,因而顏色深。江蘇南京居群還略帶褐色,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。濃鹽酸-鋅粉反應:江蘇南京和江蘇寶華山居群花瓣提取物在濃鹽酸-鋅粉中呈淺棕色和淡黃色,顯色比較明顯,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。醋酸鉛反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在醋酸鉛溶液中呈現(xiàn)不同程度的黃色沉淀,說明其花色素中含花色素苷,且所含的黃酮類化合物中可能具有鄰二酚羥基,還可能兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基結(jié)構(gòu)。三氯化鐵反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在三氯化鐵溶液中都呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,說明其花色素分子中存在酚羥基;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色較深,表明其可能含有形成分子內(nèi)氫鍵的酚羥基。三氯化鋁反應:江蘇宜興居群的花瓣色素提取物在三氯化鋁溶液中呈極淡紅色,說明其含有少量的花色苷,其余居群呈無色或不同程度的棕色、黃色,說明其含有黃酮醇類化合物。濃硫酸反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在濃硫酸中均呈不同程度的棕色,表明其可能含有二氫黃酮(醇)、查爾酮、橙酮;安徽瑯琊山、江蘇寶華山和江蘇宜興居群顏色偏黃,表明其可能含有黃酮類化合物。堿性反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在碳酸鈉溶液中無紅-紫色出現(xiàn),說明其均不含有查爾酮、橙酮;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色明顯,呈淺棕色,表明其可能含有黃酮醇類和二氫黃酮類化合物。氨性氯化鍶反應:除浙江杭州居群外,其余4個居群的花瓣色素提取物在氨性氯化鍶溶液中顯色明顯,尤其是江蘇南京和寶華山居群,表明其所含化合物分子中可能存在鄰二羥基。四氫硼鈉反應:此反應是鑒別二氫黃酮類化合物的專異性反應。江蘇寶華山居群的花瓣色素提取物呈現(xiàn)淡黃色,說明其含有二氫黃酮類化合物;江蘇南京居群呈淺棕色略帶粉色,其余居群呈無色或不同程度的黃色,表明其含有花色苷和黃酮醇類化合物。硼酸反應:來自浙江杭州、安徽瑯琊山和江蘇宜興居群花瓣色素提取物在硼酸溶液中呈無色,表明其所含黃酮類化合物中無C2和C5羥基;江蘇南京和江蘇寶華山居群呈淡棕色和淡黃色,表明其含有花色苷。

      2.3中國石蒜不同居群花瓣中的類胡蘿卜素

      5個中國石蒜居群花瓣色素的提取液在類胡蘿卜素的特征吸收峰440 nm和470 nm附近都有吸收,說明這些花瓣中均含有類胡蘿卜素。

      3討論

      3.1中國石蒜花色素成分的變異及其與花色的關(guān)系

      從花色上看,5個中國石蒜居群分屬于黃色系和橙黃色系。在顯色反應試驗中,除了在三氯化鐵、濃鹽酸-鎂粉、濃硫酸和石油醚中顯色差異不大外,在其余試劑中的顯色差異十分明顯,說明中國石蒜花色素的成分在居群內(nèi)發(fā)生了變異。但從顯色反應的結(jié)果看,變異主要發(fā)生在色素分子的羥基化等方面,這與Arisumi的結(jié)論[3]一致。Arisumi通過紙層析法對石蒜屬的花色素成分進行了分離,其結(jié)果表明不考慮羥基化作用,本屬種間花色素成分基本上不存在差異。除花色素外,中國石蒜的花瓣中還存在類胡蘿卜素。自然界中類胡蘿卜素在黃色系和橙色系花的形成過程中起主導作用。由此可知中國石蒜的黃色和橙黃色主要是類胡蘿卜素的作用;同時花色素和pH的輔助效應也是必不可少的因素。

      3.2基于花色變異的石蒜屬植物的新品種選育

      石蒜屬植物為東亞特有,主要分布于亞熱帶和溫帶地區(qū),分布范圍不廣,但適應性強,耐旱、耐澇、耐貧瘠。本研究中,中國石蒜的花色除《中國植物志》[1]和《Flora of China》[2]中記載的黃色系外還有橙黃色系,來自安徽瑯琊山居群的花瓣比其他居群窄,而且反卷和皺縮的程度不如其他居群,可見除花色外,中國石蒜在花型上也發(fā)生了顯著的變異。何秋玲[5]收集了300多份長筒石蒜種質(zhì)材料,其中有70余份為花色變異類型,其花色除常見的白色系和黃色系(黃長筒)外,還有紫色系和橙色系,并有罕見的翠綠色花,且花型也存在較大變異,有的還具幽香,這為通過系統(tǒng)選育培育石蒜屬新品種奠定了基礎(chǔ)。

      參考文獻:

      [1]中國植物志編寫委員會.中國植物志:第16卷第一分冊[M]. 北京:科學出版社,1985:18-27.

      [2]Ji Z,Amaryllidaceae M A. Flora of China[M]. St Louis:Missouri Botanical Garden Press,2000:264-273.

      [3]Arisumi K. Flower colors in amaryllidaceae Ⅱ:Anthocyanin constitution of lycoris[J]. Yamaguchi Daigaku Nogakubu Gakjustsu Hokoku,1971,22:171-180.

      [4]He Q,Shen Y,Wang M,et al. Natural variation in petal color in Lycoris longituba revealed by anthocyanin components[J]. PloS One,2011,6(8):e22098.

      [5]何秋伶.長筒石蒜花色變異的分子基礎(chǔ)[D]. 南京:南京林業(yè)大學,2009.

      [6]安田齊. 花色的生理生物化學[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,1989:15-54.

      [7]馬卡姆. 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)[M]. 北京:科學出版社,1990:42-58.endprint

      2.2中國石蒜不同居群花瓣色素提取物的顯色反應

      5個中國石蒜居群的花瓣提取物的顯色反應結(jié)果見表2。由表2及黃酮類化合物的顯色反應特點[7]可知,石油醚反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在石油醚中呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,表明其含有類胡蘿卜素;來自江蘇寶華山的居群黃綠色最深,表明其類胡蘿卜素含量最高。鹽酸反應:浙江杭州居群的花瓣色素提取物在10%的鹽酸中呈無色,說明其花色苷含量極低或無;江蘇宜興居群呈淺棕黃色略帶粉色,說明其含有花色苷;江蘇南京居群呈棕黃色帶粉色,說明其含有花色苷及其他類黃酮類化合物;安徽瑯琊山居群呈棕黃帶粉色說明其含有黃酮類化合物。氨水反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在氨水中無紅、紫色出現(xiàn),說明它們可能不含有查爾酮、橙酮;浙江杭州和江蘇寶華山居群均呈現(xiàn)不同的黃色,表明其含有黃酮類化合物;江蘇南京、安徽瑯琊山和江蘇宜興呈現(xiàn)不同程度的棕色,表明其含有鄰二酚羥基黃酮。濃鹽酸-鎂粉反應:5個中國石蒜居群的花瓣提取物在濃鹽酸-鎂粉呈現(xiàn)不同程度的淺黑色略帶藍色,可能是其所含類黃酮類化合物中B環(huán)中含有-OH、-OCH3取代基,因而顏色深。江蘇南京居群還略帶褐色,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。濃鹽酸-鋅粉反應:江蘇南京和江蘇寶華山居群花瓣提取物在濃鹽酸-鋅粉中呈淺棕色和淡黃色,顯色比較明顯,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。醋酸鉛反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在醋酸鉛溶液中呈現(xiàn)不同程度的黃色沉淀,說明其花色素中含花色素苷,且所含的黃酮類化合物中可能具有鄰二酚羥基,還可能兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基結(jié)構(gòu)。三氯化鐵反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在三氯化鐵溶液中都呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,說明其花色素分子中存在酚羥基;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色較深,表明其可能含有形成分子內(nèi)氫鍵的酚羥基。三氯化鋁反應:江蘇宜興居群的花瓣色素提取物在三氯化鋁溶液中呈極淡紅色,說明其含有少量的花色苷,其余居群呈無色或不同程度的棕色、黃色,說明其含有黃酮醇類化合物。濃硫酸反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在濃硫酸中均呈不同程度的棕色,表明其可能含有二氫黃酮(醇)、查爾酮、橙酮;安徽瑯琊山、江蘇寶華山和江蘇宜興居群顏色偏黃,表明其可能含有黃酮類化合物。堿性反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在碳酸鈉溶液中無紅-紫色出現(xiàn),說明其均不含有查爾酮、橙酮;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色明顯,呈淺棕色,表明其可能含有黃酮醇類和二氫黃酮類化合物。氨性氯化鍶反應:除浙江杭州居群外,其余4個居群的花瓣色素提取物在氨性氯化鍶溶液中顯色明顯,尤其是江蘇南京和寶華山居群,表明其所含化合物分子中可能存在鄰二羥基。四氫硼鈉反應:此反應是鑒別二氫黃酮類化合物的專異性反應。江蘇寶華山居群的花瓣色素提取物呈現(xiàn)淡黃色,說明其含有二氫黃酮類化合物;江蘇南京居群呈淺棕色略帶粉色,其余居群呈無色或不同程度的黃色,表明其含有花色苷和黃酮醇類化合物。硼酸反應:來自浙江杭州、安徽瑯琊山和江蘇宜興居群花瓣色素提取物在硼酸溶液中呈無色,表明其所含黃酮類化合物中無C2和C5羥基;江蘇南京和江蘇寶華山居群呈淡棕色和淡黃色,表明其含有花色苷。

      2.3中國石蒜不同居群花瓣中的類胡蘿卜素

      5個中國石蒜居群花瓣色素的提取液在類胡蘿卜素的特征吸收峰440 nm和470 nm附近都有吸收,說明這些花瓣中均含有類胡蘿卜素。

      3討論

      3.1中國石蒜花色素成分的變異及其與花色的關(guān)系

      從花色上看,5個中國石蒜居群分屬于黃色系和橙黃色系。在顯色反應試驗中,除了在三氯化鐵、濃鹽酸-鎂粉、濃硫酸和石油醚中顯色差異不大外,在其余試劑中的顯色差異十分明顯,說明中國石蒜花色素的成分在居群內(nèi)發(fā)生了變異。但從顯色反應的結(jié)果看,變異主要發(fā)生在色素分子的羥基化等方面,這與Arisumi的結(jié)論[3]一致。Arisumi通過紙層析法對石蒜屬的花色素成分進行了分離,其結(jié)果表明不考慮羥基化作用,本屬種間花色素成分基本上不存在差異。除花色素外,中國石蒜的花瓣中還存在類胡蘿卜素。自然界中類胡蘿卜素在黃色系和橙色系花的形成過程中起主導作用。由此可知中國石蒜的黃色和橙黃色主要是類胡蘿卜素的作用;同時花色素和pH的輔助效應也是必不可少的因素。

      3.2基于花色變異的石蒜屬植物的新品種選育

      石蒜屬植物為東亞特有,主要分布于亞熱帶和溫帶地區(qū),分布范圍不廣,但適應性強,耐旱、耐澇、耐貧瘠。本研究中,中國石蒜的花色除《中國植物志》[1]和《Flora of China》[2]中記載的黃色系外還有橙黃色系,來自安徽瑯琊山居群的花瓣比其他居群窄,而且反卷和皺縮的程度不如其他居群,可見除花色外,中國石蒜在花型上也發(fā)生了顯著的變異。何秋玲[5]收集了300多份長筒石蒜種質(zhì)材料,其中有70余份為花色變異類型,其花色除常見的白色系和黃色系(黃長筒)外,還有紫色系和橙色系,并有罕見的翠綠色花,且花型也存在較大變異,有的還具幽香,這為通過系統(tǒng)選育培育石蒜屬新品種奠定了基礎(chǔ)。

      參考文獻:

      [1]中國植物志編寫委員會.中國植物志:第16卷第一分冊[M]. 北京:科學出版社,1985:18-27.

      [2]Ji Z,Amaryllidaceae M A. Flora of China[M]. St Louis:Missouri Botanical Garden Press,2000:264-273.

      [3]Arisumi K. Flower colors in amaryllidaceae Ⅱ:Anthocyanin constitution of lycoris[J]. Yamaguchi Daigaku Nogakubu Gakjustsu Hokoku,1971,22:171-180.

      [4]He Q,Shen Y,Wang M,et al. Natural variation in petal color in Lycoris longituba revealed by anthocyanin components[J]. PloS One,2011,6(8):e22098.

      [5]何秋伶.長筒石蒜花色變異的分子基礎(chǔ)[D]. 南京:南京林業(yè)大學,2009.

      [6]安田齊. 花色的生理生物化學[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,1989:15-54.

      [7]馬卡姆. 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)[M]. 北京:科學出版社,1990:42-58.endprint

      2.2中國石蒜不同居群花瓣色素提取物的顯色反應

      5個中國石蒜居群的花瓣提取物的顯色反應結(jié)果見表2。由表2及黃酮類化合物的顯色反應特點[7]可知,石油醚反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在石油醚中呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,表明其含有類胡蘿卜素;來自江蘇寶華山的居群黃綠色最深,表明其類胡蘿卜素含量最高。鹽酸反應:浙江杭州居群的花瓣色素提取物在10%的鹽酸中呈無色,說明其花色苷含量極低或無;江蘇宜興居群呈淺棕黃色略帶粉色,說明其含有花色苷;江蘇南京居群呈棕黃色帶粉色,說明其含有花色苷及其他類黃酮類化合物;安徽瑯琊山居群呈棕黃帶粉色說明其含有黃酮類化合物。氨水反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在氨水中無紅、紫色出現(xiàn),說明它們可能不含有查爾酮、橙酮;浙江杭州和江蘇寶華山居群均呈現(xiàn)不同的黃色,表明其含有黃酮類化合物;江蘇南京、安徽瑯琊山和江蘇宜興呈現(xiàn)不同程度的棕色,表明其含有鄰二酚羥基黃酮。濃鹽酸-鎂粉反應:5個中國石蒜居群的花瓣提取物在濃鹽酸-鎂粉呈現(xiàn)不同程度的淺黑色略帶藍色,可能是其所含類黃酮類化合物中B環(huán)中含有-OH、-OCH3取代基,因而顏色深。江蘇南京居群還略帶褐色,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。濃鹽酸-鋅粉反應:江蘇南京和江蘇寶華山居群花瓣提取物在濃鹽酸-鋅粉中呈淺棕色和淡黃色,顯色比較明顯,可能含有黃酮(醇)或二氫黃酮(醇)。醋酸鉛反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在醋酸鉛溶液中呈現(xiàn)不同程度的黃色沉淀,說明其花色素中含花色素苷,且所含的黃酮類化合物中可能具有鄰二酚羥基,還可能兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基結(jié)構(gòu)。三氯化鐵反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在三氯化鐵溶液中都呈現(xiàn)不同程度的黃綠色,說明其花色素分子中存在酚羥基;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色較深,表明其可能含有形成分子內(nèi)氫鍵的酚羥基。三氯化鋁反應:江蘇宜興居群的花瓣色素提取物在三氯化鋁溶液中呈極淡紅色,說明其含有少量的花色苷,其余居群呈無色或不同程度的棕色、黃色,說明其含有黃酮醇類化合物。濃硫酸反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在濃硫酸中均呈不同程度的棕色,表明其可能含有二氫黃酮(醇)、查爾酮、橙酮;安徽瑯琊山、江蘇寶華山和江蘇宜興居群顏色偏黃,表明其可能含有黃酮類化合物。堿性反應:5個中國石蒜居群的花瓣色素提取物在碳酸鈉溶液中無紅-紫色出現(xiàn),說明其均不含有查爾酮、橙酮;江蘇南京和安徽瑯琊山居群顯色明顯,呈淺棕色,表明其可能含有黃酮醇類和二氫黃酮類化合物。氨性氯化鍶反應:除浙江杭州居群外,其余4個居群的花瓣色素提取物在氨性氯化鍶溶液中顯色明顯,尤其是江蘇南京和寶華山居群,表明其所含化合物分子中可能存在鄰二羥基。四氫硼鈉反應:此反應是鑒別二氫黃酮類化合物的專異性反應。江蘇寶華山居群的花瓣色素提取物呈現(xiàn)淡黃色,說明其含有二氫黃酮類化合物;江蘇南京居群呈淺棕色略帶粉色,其余居群呈無色或不同程度的黃色,表明其含有花色苷和黃酮醇類化合物。硼酸反應:來自浙江杭州、安徽瑯琊山和江蘇宜興居群花瓣色素提取物在硼酸溶液中呈無色,表明其所含黃酮類化合物中無C2和C5羥基;江蘇南京和江蘇寶華山居群呈淡棕色和淡黃色,表明其含有花色苷。

      2.3中國石蒜不同居群花瓣中的類胡蘿卜素

      5個中國石蒜居群花瓣色素的提取液在類胡蘿卜素的特征吸收峰440 nm和470 nm附近都有吸收,說明這些花瓣中均含有類胡蘿卜素。

      3討論

      3.1中國石蒜花色素成分的變異及其與花色的關(guān)系

      從花色上看,5個中國石蒜居群分屬于黃色系和橙黃色系。在顯色反應試驗中,除了在三氯化鐵、濃鹽酸-鎂粉、濃硫酸和石油醚中顯色差異不大外,在其余試劑中的顯色差異十分明顯,說明中國石蒜花色素的成分在居群內(nèi)發(fā)生了變異。但從顯色反應的結(jié)果看,變異主要發(fā)生在色素分子的羥基化等方面,這與Arisumi的結(jié)論[3]一致。Arisumi通過紙層析法對石蒜屬的花色素成分進行了分離,其結(jié)果表明不考慮羥基化作用,本屬種間花色素成分基本上不存在差異。除花色素外,中國石蒜的花瓣中還存在類胡蘿卜素。自然界中類胡蘿卜素在黃色系和橙色系花的形成過程中起主導作用。由此可知中國石蒜的黃色和橙黃色主要是類胡蘿卜素的作用;同時花色素和pH的輔助效應也是必不可少的因素。

      3.2基于花色變異的石蒜屬植物的新品種選育

      石蒜屬植物為東亞特有,主要分布于亞熱帶和溫帶地區(qū),分布范圍不廣,但適應性強,耐旱、耐澇、耐貧瘠。本研究中,中國石蒜的花色除《中國植物志》[1]和《Flora of China》[2]中記載的黃色系外還有橙黃色系,來自安徽瑯琊山居群的花瓣比其他居群窄,而且反卷和皺縮的程度不如其他居群,可見除花色外,中國石蒜在花型上也發(fā)生了顯著的變異。何秋玲[5]收集了300多份長筒石蒜種質(zhì)材料,其中有70余份為花色變異類型,其花色除常見的白色系和黃色系(黃長筒)外,還有紫色系和橙色系,并有罕見的翠綠色花,且花型也存在較大變異,有的還具幽香,這為通過系統(tǒng)選育培育石蒜屬新品種奠定了基礎(chǔ)。

      參考文獻:

      [1]中國植物志編寫委員會.中國植物志:第16卷第一分冊[M]. 北京:科學出版社,1985:18-27.

      [2]Ji Z,Amaryllidaceae M A. Flora of China[M]. St Louis:Missouri Botanical Garden Press,2000:264-273.

      [3]Arisumi K. Flower colors in amaryllidaceae Ⅱ:Anthocyanin constitution of lycoris[J]. Yamaguchi Daigaku Nogakubu Gakjustsu Hokoku,1971,22:171-180.

      [4]He Q,Shen Y,Wang M,et al. Natural variation in petal color in Lycoris longituba revealed by anthocyanin components[J]. PloS One,2011,6(8):e22098.

      [5]何秋伶.長筒石蒜花色變異的分子基礎(chǔ)[D]. 南京:南京林業(yè)大學,2009.

      [6]安田齊. 花色的生理生物化學[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,1989:15-54.

      [7]馬卡姆. 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)[M]. 北京:科學出版社,1990:42-58.endprint

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