李迎梅 孫曉紅 劉彤 鄧美榮 趙悅

隨著社會的發(fā)展, 食品安全問題已成為全社會關(guān)注的熱點。黃曲霉毒素作為一種致癌物, 已成為食品日常監(jiān)測工作中的重點。在黃曲霉檢測中, 多采用柱后衍生［1］, 而無需衍生的則采用超高效液相色譜［2］,本文采用高效液相色譜法測定食品中黃曲霉毒素的含量, 無需衍生, 操作更加簡單。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Waters e2695高效液相色譜儀,2475熒光檢測器, J2 正壓固相萃取, AflaTest免疫親和柱。黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液：B1, G1：1.0 mg/L, B2, G2：0.3 mg/L。甲醇為色譜純。

1.2 黃曲霉毒素的檢測方法 色譜柱：Waters Xbridge C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流動相：甲醇 -水(40+60)。流速 1ml/min, 柱溫 35℃ , 進(jìn)樣量 10 μl, 運行時間30min。熒光檢測器：激發(fā)波長：365 nm, 發(fā)射波長：455 nm。

1.3 樣品前處理方法 稱取25 g樣品(精確至0.001 g)于250ml具塞錐形瓶中, 加入5 g氯化鈉及125ml甲醇-水(7+3)混勻, 超聲提取后進(jìn)行過濾。取15ml濾液加入30ml去離子水稀釋。準(zhǔn)確吸稀釋液15ml緩慢通過免疫親和柱后, 用10ml去離子水淋洗, 棄去全部淋洗液后用1ml甲醇洗脫, 經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后上機(jī)分析。

1.4 色譜分析 分別吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液及處理后的樣品進(jìn)行分析, 峰面積外標(biāo)法定量, 計算樣品中黃曲霉毒素的含量。

2 結(jié)果

2.1 黃曲霉毒素的色譜圖 見圖1。

2.2 方法的精密度和回收率 實驗結(jié)果顯示檢測限為 B1、G1在 1.5 ng/ml, B2、G2在 0.5 ng/ml。對樣品進(jìn)行高、中、低三個濃度的加標(biāo)實驗, 其加標(biāo)回收率在72.7%～98.7%之間, 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.52%～9.05%。

2.3 樣品測定 采用本方法共測定食品100份, 四種黃曲霉毒素均未檢出。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

3 討論

該方法建立了用HPLC檢測四種黃曲霉毒素的含量, 該方法操作簡單, 測定結(jié)果可靠, 能夠完成對黃曲霉毒素的檢測, 適用于食品中黃曲霉毒素的檢測。色譜柱后衍生熒光檢測花生中黃曲霉毒素B1, B2, G1,G2.色譜, 2004,22(6):658.

［1］于彥彬,萬述偉.OASIS HLB固相萃取-高效液相

［2］蔡志斌,張英.無需衍生-超高效液相色譜法快速測定食品中黃曲霉毒素.中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2012,23(2):312-315.