陳科力,李 芳,劉義梅,靳李娜,崔瑞勤

(湖北中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院, 武漢 430065)

木瓜為薔薇科植物貼梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sweet) Nakai 的干燥近成熟的果實(shí)，味酸性溫，歸肝、脾經(jīng)，具有舒筋活絡(luò)、健脾開(kāi)胃、祛風(fēng)除濕等功效，主要用于治療濕痹拘攣、腰膝關(guān)節(jié)酸重疼痛、吐瀉轉(zhuǎn)筋、腳氣水腫等[1].木瓜長(zhǎng)期以來(lái)一直作為傳統(tǒng)中藥使用，也是一種可食用的中藥品種，含有黃酮類、有機(jī)酸類、多糖類、萜類、皂苷類等多種化學(xué)成分[2-5]，其中主要成分熊果酸和齊墩果酸具有顯著的抗炎和抗氧化作用，具有較好的保健功效.木瓜是藥食兩用的品種，但對(duì)木瓜重金屬殘留的測(cè)定研究尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，本文參照中國(guó)藥典2010年版附錄重金屬測(cè)定法及相關(guān)方法[1]，對(duì)產(chǎn)于湖北長(zhǎng)陽(yáng)榔坪鎮(zhèn)資丘木瓜基地的皺皮木瓜藥材進(jìn)行了3種重金屬的含量測(cè)定，旨在了解資丘木瓜藥材的安全性，為其質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù).

1 儀器、試藥與材料

1.1 儀器

原子分光光度計(jì)(AA-7003W北京東西分析儀器有限公司)，銅、鉛、鎘空心陰極燈(北京東西分析儀器有限公司)，電子分析天平(德國(guó)賽多利斯Sartorius BP61S電子天平)，電子萬(wàn)用爐(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)，馬弗爐(天津市泰斯特儀器有限公司).

1.2 試劑

銅、鉛、鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg /mL)，購(gòu)于阿拉丁(aladdin)試劑公司，批號(hào)分別為1313090、8329073、1301021.硝酸(GR)，高氯酸(GR)，超純水.

1.3 樣品

資丘木瓜藥材樣品2013年7月采自湖北長(zhǎng)陽(yáng)縣榔坪鎮(zhèn)的3個(gè)產(chǎn)區(qū)(關(guān)口埡、燕子崖、渠安頭)，每區(qū)取樣2份.

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 樣品預(yù)處理

將采集的木瓜樣品用雙蒸水洗凈，置沸水中燙至外皮灰白色，對(duì)半縱剖曬干，然后將樣品粉碎，于65℃烘12h，備用.

2.2 消解方法

取供試品粗粉1g，精密稱定，置凱氏燒瓶(250mL)中，加硝酸-高氯酸(4:1)混合溶液10mL，混勻，瓶口加一小漏斗，浸泡過(guò)夜(約10h).置電爐上加熱消解，保持微沸，持續(xù)加熱至溶液澄明后升高溫度至冒濃煙，直至白煙散盡，消解液呈無(wú)色透明，放冷，轉(zhuǎn)入25mL量瓶中，用2%硝酸溶液適量洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻即得.以相應(yīng)試劑同法同時(shí)制備空白溶液.

2.3 測(cè)定方法

采用火焰原子吸收法測(cè)定樣品中銅，采用石墨爐原子吸收法測(cè)定樣品中的鉛和鎘，具體操作參照《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅨB，經(jīng)試驗(yàn)選擇的最佳測(cè)定條件見(jiàn)表1、表2.

表1 原子吸收法測(cè)定銅、鉛、鎘的最佳測(cè)定條件

表2 石墨爐升溫程序 Tab.2 Temperature program of graphite furnace

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察

精密量取銅、鉛、鎘、汞、砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用2%硝酸溶液分別配制成每1mL含銅0.0、0.1、0.5、1.0、2.0、3.0 μg的溶液，含鉛0.0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 ng的溶液，含鎘0.0、0.1、0.5、0.8、1.0、2.0 ng的溶液，在最佳測(cè)定條件下，按照各自測(cè)定方法測(cè)定吸光度A.以濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.計(jì)算回歸方程，結(jié)果見(jiàn)表3.

表3 銅、鉛和鎘的線性回歸方程Tab.3 Linear regression equation of Cu Pb and Cd

2.4.2 檢測(cè)限確定

對(duì)消化處理的空白溶液分別測(cè)定11次，按空白信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S)的3倍計(jì)算檢測(cè)限.結(jié)果銅的檢測(cè)限0.0006μg/mL，鉛的檢測(cè)限為0.0030ng/mL，鎘的檢測(cè)限為0.0024 ng/mL.

2.4.3 精密度試驗(yàn)

取線性關(guān)系考察項(xiàng)下的銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0μg/mL)、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0ng/mL)、鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.8ng/mL)，分別在各自最佳條件下測(cè)定吸光度，各測(cè)5次，求5次測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，結(jié)果銅、鉛、鎘的精密度的RSD分別為0.7%、2.4%、2.2%(n=5).

2.4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

按2.4.1項(xiàng)下的方法分別制備銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0μg/mL)、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0ng/mL)、鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.8ng/mL)，分別在各自最佳條件下的0h、2h、4h、8h、10h時(shí)測(cè)定吸光度，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD).結(jié)果銅、鉛、鎘的RSD分別為0.5%、2.2%、2.3%(n=5).

2.4.5 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取同一批樣(關(guān)口埡村)，平行制備5份供試品溶液，依照各自方法在各自最佳條件下測(cè)定吸光度，結(jié)果銅、鉛、鎘的RSD分別為2.7%、2.9%、1.2%(n=5).

2.4.6 加樣回收試驗(yàn)

精密量取已知銅含量的同一批樣品供試液(關(guān)口埡村)適量，分別精密加入含等量的銅標(biāo)準(zhǔn)液6份，按供試品溶液測(cè)定方法測(cè)定.同法對(duì)關(guān)口埡村木瓜分別加含等量鉛、鎘標(biāo)準(zhǔn)液各6份，按各自方法測(cè)定.結(jié)果見(jiàn)表4.

表4 銅、鉛、鎘加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.5 樣品含量測(cè)定

按上述規(guī)定的方法制備各樣品供試液，按2.3項(xiàng)下的方法測(cè)定，每個(gè)樣品各取2份，測(cè)定5次，取平均值作為測(cè)定結(jié)果.結(jié)果見(jiàn)表5.

表5 3批木瓜中重金屬含量

3 討論

本文參照藥典法及相關(guān)方法建立了資丘木瓜3種重金屬的原子吸收分光光度測(cè)定法，確定了檢測(cè)限.方法學(xué)考察表明，測(cè)定銅和鉛、鎘的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性相關(guān)系數(shù)r分別大于0.999和0.990；回收率為100%～105%；測(cè)定變異系數(shù)RSD分別為2.7%、2.9%、1.2%(n=5)；該選定的方法具有較好的穩(wěn)定性和精密度.在選擇消解方法時(shí)，由于干法消解得到的供試品溶液有殘?jiān)?，并且同一樣品測(cè)定5次結(jié)果的RSD值為9.09%，偏差太大不符合要求，所以本文采用濕法用于木瓜的消解.

產(chǎn)于湖北宜昌的榔坪鎮(zhèn)的資丘木瓜是我國(guó)著名的藥食兩用道地藥材，依據(jù)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定：重金屬總量≤20.0mg/kg,其中Cu≤20.0 mg/kg，Pb≤5.0mg/kg，Cd≤0.3mg/kg.由本文測(cè)定結(jié)果(表5)可知，采自宜昌資丘木瓜種植基地的3批資丘木瓜樣品(關(guān)口埡村、燕子巖村、渠安頭村)，其3種重金屬的含量均符合此規(guī)定.

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].北京，化學(xué)工業(yè)出版社,2010:57,附錄48-50.

[2] 吳 虹,魏 偉,吳成義.木瓜化學(xué)成分及藥理活性的研究[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,23(2):62.

[3] 嚴(yán)睿文,張秀真,陳 勤.宣木瓜中齊墩果酸的分離提取及含量測(cè)定[J].現(xiàn)代科學(xué)儀器.2008(05):83-85.

[4] 韓立敏.木瓜有效成分的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2009,37(23):10969-10970.

[5] 呂美紅,謝曉梅,查孝柱,等.反相高效液相色譜法測(cè)定木瓜藥材及飲片齊墩果酸和熊果酸含量[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010, 29(3):72.