房麗 王軼楠 馬守東 肖建波 李海麗 王玲玲 劉翠華

·論著·

血清腫瘤標(biāo)志物NSE、CA-125在非霍奇金淋巴瘤診斷及預(yù)后判定中的臨床價(jià)值

房麗 王軼楠 馬守東 肖建波 李海麗 王玲玲 劉翠華

目的探討血清腫瘤標(biāo)志物NSE和CA-125在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表達(dá)情況及臨床意義。方法采用電化學(xué)發(fā)光免疫測定法測定56例NHL患者血清腫瘤標(biāo)志物NSE和CA-125的表達(dá)水平，判定NSE和CA-125的表達(dá)與NHL患者臨床特征及其預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果56例NHL患者化療前血清NSE值(34.63±8.54)μg/L，CA-125(47.59±9.53)μg/L，均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；且NSE、CA-125表達(dá)水平的高低與NHL患者B癥狀、臨床分期、IPI預(yù)后指數(shù)及治療效果等臨床特征相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論血清腫瘤標(biāo)志物NSE、CA-125聯(lián)合定量檢測可提高NHL診斷敏感性，同時(shí)對(duì)NHL臨床分期、療效判定及預(yù)后等方面具有一定臨床意義。

神經(jīng)元特異性烯醇化酶；糖鏈核心蛋白抗原；非霍奇金淋巴瘤；腫瘤標(biāo)志物

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是來源于造血淋巴組織、異質(zhì)性非常強(qiáng)的一類腫瘤，近年來發(fā)病率呈逐年升高趨勢；目前，NHL的診斷主要依據(jù)組織病理學(xué)結(jié)果，而病理檢查手段并不能反映臨床分期、腫瘤負(fù)荷、侵襲能力和浸潤程度以及治療的反應(yīng)等。所以，臨床上除結(jié)合疾病特征和影像學(xué)檢查外，一些血清腫瘤標(biāo)志物也越來越多顯示其在淋巴瘤的早期診斷、監(jiān)測治療、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后判定和預(yù)測復(fù)發(fā)中的臨床意義。本文通過探討NSE、CA-125與NHL的關(guān)系，擬尋找一種或多種和腫瘤生物學(xué)行為相關(guān)、特異性較強(qiáng)、易于檢測、適合隨訪的分子蛋白水平的檢測指標(biāo)，以便為臨床實(shí)現(xiàn)個(gè)體化診治提高可靠實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2008年1月至2011年1月唐山市人民醫(yī)院收治初診NHL 56例(NHL組)，男42例，女14例；年齡19～76歲，平均52歲；病例均經(jīng)組織病理活檢及免疫組織學(xué)檢查確診為NHL，B細(xì)胞亞型44例(彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤32例，結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤5例，濾泡性淋巴瘤和套細(xì)胞淋巴瘤各3例，小淋巴細(xì)胞淋巴瘤1例)；T細(xì)胞亞型12例(非特異性外周T細(xì)胞淋巴瘤6例，NT/T細(xì)胞淋巴瘤5例，T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤1例)。原發(fā)結(jié)內(nèi)和結(jié)外NHL分別為32例和24例。按Ann Arbor分期，Ⅰ、Ⅱ期患者32例，Ⅲ、Ⅳ期患者24例。按國際預(yù)后指數(shù)IPI評(píng)分，低危-低中危35例，高中危-高危21例。所有患者均有明確可評(píng)價(jià)的病灶。詳細(xì)記錄每位患者年齡、性別、病理分型、臨床分期、是否有B癥狀、LDH水平、β2-MG水平、血常規(guī)、IPI評(píng)分、治療方案、化療周期數(shù)、療效評(píng)價(jià)等觀察指標(biāo)，建立數(shù)據(jù)庫。另選取同期有高熱癥狀、查體淋巴結(jié)腫大、最后病理診斷排除惡性疾病的淋巴結(jié)良性病變患者12例(良性淋巴結(jié)組)；男8例，女4例；年齡16～64歲，平均46歲；其中，急性反應(yīng)性淋巴結(jié)炎6例，慢性淋巴結(jié)炎和淋巴結(jié)結(jié)核患者各3例。健康對(duì)照組20例為唐山市人民醫(yī)院體檢中心健康體檢者，男12例，女8例；年齡24～72歲，平均50歲。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 有嚴(yán)重合并癥、重要臟器器質(zhì)性病變以及有神經(jīng)系統(tǒng)疾病者。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)本采集：分別于化療前和4～6周期CHOP/R-CHOP或EPOCH方案化療后采集NHL組患者靜脈全血各2 ml，健康對(duì)照組和淋巴結(jié)良性組分別于入院初期采全血2 ml。3 500 r/min離心5 min后分離上清液，置于-80℃冰柜凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 采用電化學(xué)發(fā)光免疫測定法測定血清NSE、CA125值；試劑盒購自羅氏公司；實(shí)驗(yàn)步驟：按說明書操作，以全自動(dòng)Labsystems 352型酶標(biāo)儀測定。用常規(guī)法測定外周全血常規(guī)、血清LDH和β2-MG水平。試劑盒測定的正常人血清NSE范圍：0～18.0 μg/L；CA125：0～35 μg/L。

1.4 療效評(píng)價(jià) 療效評(píng)價(jià)按國際淋巴瘤工作組制定的NHL治療反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，分為完全緩解(CR)、不確定的完全緩解(CRU)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)和進(jìn)展(PD)；其中，CR+CRU+PR為治療有效組，SD+PD為治療無效組。

2 結(jié)果

2.1 NHL組、良性淋巴結(jié)組與健康對(duì)照組間血清NSE和CA-125標(biāo)志物表達(dá)水平的比較 NHL組化療前血清NSE和CA-125水平明顯升高，與良性淋巴結(jié)組和健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；良性淋巴結(jié)組與健康對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組兩種血清腫瘤標(biāo)志物水平比較 ±s

注：與NHL組比較，*P<0.05

2.2 NHL患者臨床特征與血清NSE、CA-125表達(dá)相關(guān)性分析 56例NHL患者中，血清NSE、CA-125表達(dá)水平靈敏度分別為57.14%和41.07%，兩種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測靈敏度和特異度分別為75.6%和93.8%，NHL患者的性別、年齡、病理亞型、淋巴結(jié)類型等臨床特征與血清NSE、CA-125的陽性表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而臨床分期越晚、IPI評(píng)分越高、有B癥狀的NHL患者血清NSE、CA-125表達(dá)多陽性。見表2。

表2 NHL患者臨床特征與血清NSE、CA-125表達(dá)相關(guān)性分析 例(%)

2.3 NHL不同分期間血清NSE、CA-125水平的比較 Ⅲ、Ⅳ期NHL患者化療前血清NSE和CA125水平較Ⅰ、Ⅱ期患者明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 血清NSE、CA-125水平與NHL分期的關(guān)系

2.4 NHL不同療效組間血清NSE、CA-125水平的比較 56例NHL患者經(jīng)4～6個(gè)周期CHOP/R-CHOP或ECHOP等方案化療后，48例獲得CR或PR(有效組)，8例為SD或PD(無反應(yīng)組)；與化療前比較，化療后有效組血清NSE、CA125水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而無反應(yīng)組化療前后則無明顯變化(P>0.05)。見表4。

3 討論

惡性淋巴瘤預(yù)后評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)多數(shù)以臨床表現(xiàn)為主；NHL國際預(yù)后指數(shù)為年齡>60歲，血清LDH>1倍正常值，一般狀況評(píng)分2～4分，臨床分期Ⅲ-Ⅳ期，結(jié)外受累部位>1個(gè)。而推薦較多的LDH、β2微球蛋白干擾因素太多，特異性差；如肝炎、心肌損傷、感染、血液系統(tǒng)疾病等均可致LDH升高；β2微球蛋白測定主要用于監(jiān)測近端腎小管的功能，糖尿病腎病、血液系統(tǒng)腫瘤等均可使其升高。隨著現(xiàn)代生物化學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)研究的迅速發(fā)展，一些具有潛在前景的標(biāo)志物正逐漸為人們所認(rèn)識(shí)和評(píng)估；血清腫瘤標(biāo)志物檢測具有損傷性小、敏感性高、操作過程簡便、費(fèi)用成本低、出結(jié)果快等優(yōu)點(diǎn)；因此，在惡性淋巴瘤輔助診斷中有其獨(dú)特優(yōu)勢。有研究顯示，不同類型腫瘤標(biāo)志物可出現(xiàn)于不同類型的腫瘤細(xì)胞，而同一種腫瘤細(xì)胞也可出現(xiàn)2種及以上的腫瘤標(biāo)志物[1]。

表4 NHL患者不同療效組間血清NSE、CA-125表達(dá)情況

注：與治療前比較，*P<0.05

烯醇化酶是糖元酵解關(guān)鍵酶，由α、β、γ 3個(gè)亞型組成。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)是烯醇化酶的γ型同工酶，是一種能量代謝酶，可以反映細(xì)胞更新和凋亡率；主要特異性的存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞胞質(zhì)中[2]，如APUD細(xì)胞；它被發(fā)現(xiàn)在與神經(jīng)內(nèi)分泌組織起源有關(guān)的腫瘤中，特別是SCLC中有過量表達(dá)；目前NSE主要作為神經(jīng)系統(tǒng)損失和小細(xì)胞肺癌的標(biāo)志物。近年來隨著研究的深入，已有多項(xiàng)NSE與NHL的相關(guān)性研究。1987年即有文獻(xiàn)顯示NSE在惡性淋巴瘤中有表達(dá)(11/23)[3]；1999年Massarelli等[4]測定了51例惡性淋巴瘤患者淋巴標(biāo)本中NSE的表達(dá)，16例HL患者中，NSE陽性12例；35例NHL患者中，13例NSE陽性，且NSE陽性病例均在CD30(+)的R-S細(xì)胞中有表達(dá)，提示惡性淋巴瘤中NSE表達(dá)與CD30表達(dá)密切相關(guān)。2011年Liang等[5]研究顯示：NSE和彌漫大B細(xì)胞的關(guān)系：NSE高水平組預(yù)后更差，美羅華作用有限。綜上研究顯示，NSE在霍奇金淋巴瘤以及非霍奇金淋巴瘤中均有不同程度的表達(dá)，且和預(yù)后差相關(guān)。國內(nèi)樊慧杰等[6]曾報(bào)道NSE在非霍奇金淋巴瘤中的臨床意義：40例NHL中25例患者血清NSE濃度高于正常值上限(占所有病例的62.5%)。

糖鏈核心蛋白抗原(CA125)為一種來自體腔上皮的可微量存在于正常組織的蛋白，是卵巢癌和宮頸癌的首選腫瘤標(biāo)志物。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，CA125在NHL患者中顯著增高，且與臨床分期、疾病進(jìn)展、腫瘤浸潤等相關(guān)[7]；NHL最重要的血清學(xué)標(biāo)志物中，β2-MG反映腫瘤負(fù)荷，LDH反映腫瘤增生活性，而CA125則反映腫瘤侵襲潛能[8]。實(shí)際上CA125并非由NHL細(xì)胞直接表達(dá)，而可能是NHL細(xì)胞釋放的淋巴因子刺激間皮細(xì)胞，使后者表達(dá)和分泌CA125；所以，CA125不同于由淋巴瘤細(xì)胞直接釋放的β2-MG和LDH，而是反映間皮細(xì)胞對(duì)腫瘤的反應(yīng)性[9]。錢思軒等[10]報(bào)道結(jié)果表明，約42% NHL患者血清CA125陽性，而且CA125升高與患者病變范圍、程度、治療有關(guān)；在化療后則下降，當(dāng)達(dá)到完全緩解時(shí)，CAA125可降至正常。

本研究結(jié)果顯示，血清NSE、CA125在56例NHL患者中表達(dá)陽性率為57.14%和41.07%；而在健康患者及淋巴結(jié)良性患者中含量比較穩(wěn)定，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測靈敏度和特異度分別為75.6%和93.8%；陽性率高于單一檢測，靈敏度及特異度均明顯提高；而且NHL臨床分期越晚，IPI評(píng)分越高，上述兩項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)水平越高，患者預(yù)后也越差；而治療有效患者中，治療后的血清NSE、CA-125表達(dá)水平較治療前明顯下降(P<0.05)。因此，我們認(rèn)為聯(lián)合檢測血清NSE、CA-125含量可作為NHL患者輔助診斷、療效觀察和預(yù)后判定的重要指標(biāo)之一。因考慮到腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的多樣化和治療過程中異質(zhì)化的可能，我們建議腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該多項(xiàng)聯(lián)合、多次檢測，以動(dòng)態(tài)反映腫瘤細(xì)胞學(xué)的變化。

綜上所述，血清NSE、CA-125可能是與惡性淋巴瘤疾病侵襲性相關(guān)的、新的分子標(biāo)志物；兩種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可明顯提高NHL診斷的靈敏度，在NHL診斷、臨床分期、療效判定及預(yù)后評(píng)估中將具有重要臨床價(jià)值，而且可能是美羅華時(shí)代新的預(yù)后因子，值得臨床進(jìn)一步關(guān)注。

1 宋紅偉,王雅杰.三種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測對(duì)惡性腫瘤的診斷價(jià)值.實(shí)用癌癥雜志，2009,24:483-485.

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10 錢思軒，李建勇，吳漢新，等.非霍奇金淋巴瘤血清CA125測定的臨床意義.臨床血液學(xué)雜志，2004,17：37-38.

ClinicalsignificanceofserumtumormakersNSE,CA125inthediagnosisandprognosisassessmentofnon-Hodgkin’slymphoma

FANGLi,WANGYinan,MAShoudong,etal.

DepartmentofRadio-Chemotherapy,TangshanPeople’sHospital,Hebei,Tangshan063000,China

ObjectiveTo investigate the clinical significance of the two serum tumor markers-neuron specific enolase(NSE)and carbohydrate antigen 125(CA-125) in the diagnosis and prognosis evaluation of non-Hodgkin’s lymphoma (NHL).MethodsThe serum levels of NSE and CA-125 in 56 patients with NHL were measured by electrochemiluminescence immunoassay.The correlation between the expressions of NSE,CA125 and clinical characteristics as well as prognosis of patients with NHL were analyzed.ResultsBefore chemotherapy the serum levels of NSE [(34.63±8.54)μg/L] and CA-125 [(47.59±9.53)μg/L] in 56 patients with NHL were significantly higher than those in control group (P<0.05),furthermore,the expression levels of NSE and CA-125 were correlated with patient’s symptoms,clinical stage,IPI prognosis index and therapeutic effect.ConclusionThe quantitive detection of NSE combined with CA125 plays an important role in diagnosis,clinical staging and prognosis assessment for patients with NHL,which can increase diagnostic sensitivity.

neuron specigic enolase；carbohydrate antigen 125；non-Hodgkin’s lymphoma；tumor markers

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.20.003

063000 河北省唐山市人民醫(yī)院放化科(房麗、王軼楠、馬守東、肖建波、李海麗、王玲玲)；河北省唐山市豐潤區(qū)韓城醫(yī)院(劉翠華)

R 730.4

A

1002-7386(2014)20-3051-04

2014-06-01)