劉煒

[摘要] 目的 評(píng)價(jià)國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口微柱凝膠卡鑒定嬰幼兒ABO及RhD血型的應(yīng)用效果。 方法 分別采用國(guó)產(chǎn)微柱凝膠血型鑒定卡和進(jìn)口血型鑒定卡對(duì)早產(chǎn)兒、足月新生兒、血液病患兒及其他患兒進(jìn)行A抗原、B抗原以及D抗原鑒定，比較兩種方法的符合情況以及凝集強(qiáng)度。 結(jié)果 國(guó)產(chǎn)微柱凝膠血型鑒定卡與進(jìn)口血型鑒定卡對(duì)嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡鑒定結(jié)果與進(jìn)口微柱凝膠卡相似，并且費(fèi)用更低，值得臨床推廣使用。

[關(guān)鍵詞] 國(guó)產(chǎn)； 進(jìn)口；微柱凝膠卡；ABO；RhD

[中圖分類號(hào)] R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）22-0142-03

[Abstract] Objective To evaluate application of domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood types. Methods ABO and RhD blood types of premature， full-term newborns， blood diseases infants and infants with other diseases were detected by domestic and import micro column gel card. Consistency and agglutination intensity were analyzed. Results Domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood type showed no significant difference（P>0.05）. Conclusion Detection of domestic micro column gel card in infant ABO and RhD blood types shows similar results with import micro column gel card， with less cost， worthy of clinical application.

[Key words] Domestic； Import； Micro column gel card； ABO； RhD

微柱凝膠卡是目前臨床上用于鑒定ABO血型和RhD血型的主要方法，但臨床上主要還是使用進(jìn)口的微柱凝膠卡進(jìn)行鑒定[1，2]。隨著國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡技術(shù)的發(fā)展，生產(chǎn)工藝的改進(jìn)，國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡也逐漸在臨床檢驗(yàn)中占據(jù)一席之地。本研究通過(guò)對(duì)比分析國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡和進(jìn)口微柱凝膠卡在鑒定嬰幼兒ABO血型和RhD血型的效果，探討兩種鑒定卡鑒定結(jié)果的一致性和存在的差異?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

選擇2013年1～12月在我院住院的3歲以下患兒8 944例，其中男5 351例，女3 593例?！?個(gè)月齡者2 142例，其中早產(chǎn)兒53例，足月新生兒195例，需要化療或者反復(fù)輸血者311例，其他疾病患兒1 583例。7個(gè)月～3歲患兒6 802例。

1.2檢測(cè)方法

將被測(cè)血標(biāo)本用生理鹽水配制成5%的紅細(xì)胞懸液，采用國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡初步鑒定抗凝血標(biāo)本A抗原、B抗原和D抗原，所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，卡式離心機(jī)為廠商配套階梯式離心機(jī)。另將被檢測(cè)血標(biāo)本采用低離子介質(zhì)配制成5%的紅細(xì)胞懸液，采用進(jìn)口微柱凝膠血型鑒定卡對(duì)A抗原、B抗原、D抗原進(jìn)行復(fù)核，所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，離心機(jī)為廠商提供的配套的離心機(jī)。凝集強(qiáng)度判定：強(qiáng)凝集：+++～++++，弱凝集：+～++。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩種方法對(duì)不同組A抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果

兩種方法對(duì)不同A抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2.2兩種方法對(duì)不同組B抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果

兩種方法對(duì)不同B抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.3兩種方法對(duì)不同組RhD抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果

兩種方法對(duì)不同RhD抗原凝集強(qiáng)度鑒定結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

3討論

維也納大學(xué)的Karl Landsteiner于1900年發(fā)現(xiàn)了人類紅細(xì)胞的同種凝集現(xiàn)象，隨后發(fā)現(xiàn)了人類第1個(gè)血型系——ABO血型系。A抗原和B抗原的構(gòu)成受控于H座位基因和ABO座位基因。H基因編碼巖藻糖轉(zhuǎn)移酶，形成H抗原，A基因和B基因編碼糖基轉(zhuǎn)移酶分別產(chǎn)生A抗原和B抗原。O基因是無(wú)效基因。ABO抗原在胚胎早期產(chǎn)生，2～4歲發(fā)育完成。在出生時(shí)ABO抗體沒(méi)有產(chǎn)生，或者產(chǎn)生較弱，3個(gè)月時(shí)反應(yīng)和成年人一樣，5～10歲時(shí)抗體產(chǎn)生達(dá)到高峰，老年時(shí)抗體水平較年輕人低。A型血指紅細(xì)胞上有A抗原，血清中有抗B抗體，B血型為紅細(xì)胞上有B抗原，血清中有抗A抗體，AB型為紅細(xì)胞上有A抗原和B抗原，血清中沒(méi)有抗A抗體和抗B抗體，O型血為紅細(xì)胞上無(wú)A抗原和B抗原，血清中有抗A抗體和抗B抗體。Landsteiner原則指只有在ABO血型系統(tǒng)紅細(xì)胞缺乏某抗原的血清中一定預(yù)計(jì)地含有該抗原的抗體[3]。ABO鑒定的原理是根據(jù)ABO血型的分型原則及其獨(dú)特的特質(zhì)，利用凝集試驗(yàn)技術(shù)通過(guò)紅細(xì)胞定型和血清定型兩組試驗(yàn)并核對(duì)結(jié)果，從而鑒定ABO血型。對(duì)新生兒ABO血型的鑒定紅細(xì)胞定型常常反應(yīng)較弱，而血清定型不可靠。ABO血型鑒定的方法主要有玻片法、試管法、凝膠法。endprint

Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名稱的頭兩個(gè)字母。蘭德斯坦納等科學(xué)家在1940年做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)恒河猴和多數(shù)人體內(nèi)的紅細(xì)胞上存在Rh血型的抗原物質(zhì)，故而命名[4]。凡是人體血液紅細(xì)胞上有Rh凝集原者，為Rh陽(yáng)性，反之為陰性。這樣就使已發(fā)現(xiàn)的紅細(xì)胞A、B、O及AB四種主要血型的人，又都分別被劃分為Rh陽(yáng)性和陰性兩種。隨著對(duì)Rh血型的不斷研究，認(rèn)為Rh血型系統(tǒng)可能是紅細(xì)胞血型中最為復(fù)雜的一個(gè)血型系統(tǒng)。Rh血型的發(fā)現(xiàn)，對(duì)更加科學(xué)地指導(dǎo)輸血工作和進(jìn)一步提高新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)診斷和維護(hù)母嬰健康都有非常重要的作用。Rh血型鑒定一般指Rh系統(tǒng)中D抗原的檢測(cè)，根據(jù)患者紅細(xì)胞是否帶有D抗原分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。

微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發(fā)明，用于檢測(cè)紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)，具有操作簡(jiǎn)單、結(jié)果直觀、容易標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，并且能夠自動(dòng)化檢測(cè)，因此在臨床上迅速得到推廣應(yīng)用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應(yīng)用于血型鑒定、不規(guī)則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實(shí)驗(yàn)中的檢驗(yàn)方法，其原理是通過(guò)在微柱中加入凝膠，紅細(xì)胞膜抗原與相應(yīng)的抗體在凝膠介質(zhì)中發(fā)生免疫反應(yīng)，利用凝膠的分子篩作用，通過(guò)調(diào)節(jié)凝膠孔徑，只允許紅細(xì)胞通過(guò)，而紅細(xì)胞的凝塊不能通過(guò)，利用重力的作用將凝集紅細(xì)胞和游離紅細(xì)胞分離[9，10]。1994 年微柱凝膠技術(shù)獲得美國(guó) FDA批準(zhǔn)為免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)將微柱凝膠技術(shù)作為常規(guī)性的檢測(cè)技術(shù)而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術(shù)的核心技術(shù)是凝膠分子篩，凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠?qū)l(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯在凝膠內(nèi)，而未發(fā)生凝集的單個(gè)紅細(xì)胞則可以穿過(guò)微孔運(yùn)動(dòng)到達(dá)柱底，從而辨別是否存在凝集反應(yīng)。紅細(xì)胞與抗體發(fā)生凝集時(shí)，紅細(xì)胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中，則判斷存在凝集，為陽(yáng)性，未發(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞則沉積于管底，則判斷無(wú)凝集反應(yīng)，為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性，尤其是檢測(cè)規(guī)則抗體時(shí)，對(duì)反定型弱凝集也具有不錯(cuò)的優(yōu)勢(shì)。微柱凝集卡倒置會(huì)導(dǎo)致分子膠及上層黏液層發(fā)生變化，凝膠空隙發(fā)生不規(guī)則變化，會(huì)在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，因此在運(yùn)輸、儲(chǔ)存微柱凝膠卡時(shí)應(yīng)嚴(yán)禁劇烈的顛簸以及倒置，對(duì)于已經(jīng)發(fā)生倒置的微柱凝膠卡，通過(guò)離心的方法可以恢復(fù)[11，12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統(tǒng)方法對(duì)的抗球蛋白的篩選以及不規(guī)則抗體的檢測(cè)，認(rèn)為柱凝膠法具有對(duì)抗體敏感性高的優(yōu)點(diǎn)，并且反應(yīng)結(jié)果容易判讀，在操作過(guò)程中采用微柱凝膠法對(duì)間接抗人球蛋白進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)可以不同進(jìn)行洗滌紅細(xì)胞的步驟，傳統(tǒng)抗球蛋白試驗(yàn)需要加入質(zhì)控細(xì)胞，但是微柱凝膠法不用，其還可以檢出傳統(tǒng)方法不能檢測(cè)出的抗體，微柱凝膠法更容易自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。微柱凝膠技術(shù)屬于微試管柱凝集技術(shù)，該技術(shù)國(guó)外已經(jīng)成為紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)的常規(guī)方法。國(guó)內(nèi)的微柱凝集技術(shù)主要是凝膠凝集技術(shù)、玻璃珠柱凝集技術(shù)以及國(guó)產(chǎn)Bioxnn微柱凝膠免疫檢測(cè)試劑卡等[13，14]。

目前進(jìn)口微柱凝膠卡在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣，但是費(fèi)用相對(duì)較高。隨著我國(guó)國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡生產(chǎn)技術(shù)的改進(jìn)，其在臨床上的應(yīng)用也逐漸推廣。本研究主要采用兩種微柱凝膠卡對(duì)嬰幼兒ABO和RhD血型的鑒定。結(jié)果顯示，兩種方法對(duì)不同年齡段以及6個(gè)月以下不同病因的患者鑒定結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。凝集效應(yīng)為弱凝集的患兒多為早產(chǎn)兒。除了早產(chǎn)兒，兩種方法ABO血型鑒定中達(dá)到強(qiáng)凝集的比例均超過(guò)了95%，而RhD血型鑒定中，除了早產(chǎn)兒和少量足月新生兒為弱凝集，其他均為強(qiáng)凝集，也說(shuō)明RhD抗原在出生時(shí)基本已發(fā)育完成。

綜上所述，微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果直觀等優(yōu)點(diǎn)，而國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡鑒定結(jié)果與進(jìn)口微柱凝膠卡沒(méi)有顯著差異，并且費(fèi)用更低，值得臨床推廣使用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 袁曉華，胡惠萍. 國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡對(duì)血型鑒定的結(jié)果分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（12）： 1585-1586.

[2] 安勤發(fā)，胡志紅，崔慧芹. 微柱凝膠卡式法檢測(cè)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的效果[J]. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2013，26（6）： 880-882.

[3] 楊寶成，蘇宇清，魏天莉，等. Landsteiner-Wiener血型系統(tǒng)測(cè)序分型技術(shù)的建立[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（3）：206，223-224.

[4] Urbaniak SJ. Alloimmunity to RhD in humans[J]. Transfus Clin Biol，2006，12（13）：19-22.

[5] 金鑫，沈健，施欣慰. 輸血與檢驗(yàn)[J]. 臨床血液學(xué)雜志，2012，25（4）： 491-494.

[6] 閆朝春，蔣玲，陳麗梅，等.導(dǎo)致微柱凝膠卡式交叉配血試驗(yàn)假陽(yáng)性結(jié)果的原因分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（15）： 1737-1738.

[7] Reis KJ，Chahowski A，Cupido A，et al. Column agglutination technology：The antiblubulin test[J]. Transfusion，1993， 33（8）：639-643.

[8] Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al. The gel test：A new way to detected cell antigen-antibody reactions[J]. Transfusion，1990，30（2）：109-113.

[9] Novaretti MC，Jens E，Pagliarini T，et al. Comparison of conventional tube test technique and gel microcolumn assay fordirect antiglobulin test：a large study[J]. J Clin Lab Anal，2004，18（5）：255-258.

[10] 周安祥，王思麗，張默吟. 微柱凝膠卡式血型鑒定的干擾因素分析及處理[J]. 吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（23）： 5044-5045.

[11] 陳維佳，王冬倩，童軍. 微柱凝膠免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)[M]//李勇，馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用免疫血液學(xué)[M]. 第2版.西安：科學(xué)出版社，2006：562-570.

[12] 趙祥勝. 柱凝聚技術(shù)檢測(cè)孕婦血清IgG抗體水平[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2000，2（3）：32-33.

[13] 吳定昌，江慧. 微柱凝膠法檢測(cè)201例孕婦ABO血結(jié)果分析[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（1）：82，91.

[14] 武建. 柱凝集技術(shù)的臨床應(yīng)用及其實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀[J]. 中國(guó)輸血雜志，2003，16（5）：369-370.

（收稿日期：2014-04-08）endprint

Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名稱的頭兩個(gè)字母。蘭德斯坦納等科學(xué)家在1940年做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)恒河猴和多數(shù)人體內(nèi)的紅細(xì)胞上存在Rh血型的抗原物質(zhì)，故而命名[4]。凡是人體血液紅細(xì)胞上有Rh凝集原者，為Rh陽(yáng)性，反之為陰性。這樣就使已發(fā)現(xiàn)的紅細(xì)胞A、B、O及AB四種主要血型的人，又都分別被劃分為Rh陽(yáng)性和陰性兩種。隨著對(duì)Rh血型的不斷研究，認(rèn)為Rh血型系統(tǒng)可能是紅細(xì)胞血型中最為復(fù)雜的一個(gè)血型系統(tǒng)。Rh血型的發(fā)現(xiàn)，對(duì)更加科學(xué)地指導(dǎo)輸血工作和進(jìn)一步提高新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)診斷和維護(hù)母嬰健康都有非常重要的作用。Rh血型鑒定一般指Rh系統(tǒng)中D抗原的檢測(cè)，根據(jù)患者紅細(xì)胞是否帶有D抗原分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。

微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發(fā)明，用于檢測(cè)紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)，具有操作簡(jiǎn)單、結(jié)果直觀、容易標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，并且能夠自動(dòng)化檢測(cè)，因此在臨床上迅速得到推廣應(yīng)用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應(yīng)用于血型鑒定、不規(guī)則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實(shí)驗(yàn)中的檢驗(yàn)方法，其原理是通過(guò)在微柱中加入凝膠，紅細(xì)胞膜抗原與相應(yīng)的抗體在凝膠介質(zhì)中發(fā)生免疫反應(yīng)，利用凝膠的分子篩作用，通過(guò)調(diào)節(jié)凝膠孔徑，只允許紅細(xì)胞通過(guò)，而紅細(xì)胞的凝塊不能通過(guò)，利用重力的作用將凝集紅細(xì)胞和游離紅細(xì)胞分離[9，10]。1994 年微柱凝膠技術(shù)獲得美國(guó) FDA批準(zhǔn)為免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)將微柱凝膠技術(shù)作為常規(guī)性的檢測(cè)技術(shù)而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術(shù)的核心技術(shù)是凝膠分子篩，凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠?qū)l(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯在凝膠內(nèi)，而未發(fā)生凝集的單個(gè)紅細(xì)胞則可以穿過(guò)微孔運(yùn)動(dòng)到達(dá)柱底，從而辨別是否存在凝集反應(yīng)。紅細(xì)胞與抗體發(fā)生凝集時(shí)，紅細(xì)胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中，則判斷存在凝集，為陽(yáng)性，未發(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞則沉積于管底，則判斷無(wú)凝集反應(yīng)，為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性，尤其是檢測(cè)規(guī)則抗體時(shí)，對(duì)反定型弱凝集也具有不錯(cuò)的優(yōu)勢(shì)。微柱凝集卡倒置會(huì)導(dǎo)致分子膠及上層黏液層發(fā)生變化，凝膠空隙發(fā)生不規(guī)則變化，會(huì)在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，因此在運(yùn)輸、儲(chǔ)存微柱凝膠卡時(shí)應(yīng)嚴(yán)禁劇烈的顛簸以及倒置，對(duì)于已經(jīng)發(fā)生倒置的微柱凝膠卡，通過(guò)離心的方法可以恢復(fù)[11，12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統(tǒng)方法對(duì)的抗球蛋白的篩選以及不規(guī)則抗體的檢測(cè)，認(rèn)為柱凝膠法具有對(duì)抗體敏感性高的優(yōu)點(diǎn)，并且反應(yīng)結(jié)果容易判讀，在操作過(guò)程中采用微柱凝膠法對(duì)間接抗人球蛋白進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)可以不同進(jìn)行洗滌紅細(xì)胞的步驟，傳統(tǒng)抗球蛋白試驗(yàn)需要加入質(zhì)控細(xì)胞，但是微柱凝膠法不用，其還可以檢出傳統(tǒng)方法不能檢測(cè)出的抗體，微柱凝膠法更容易自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。微柱凝膠技術(shù)屬于微試管柱凝集技術(shù)，該技術(shù)國(guó)外已經(jīng)成為紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)的常規(guī)方法。國(guó)內(nèi)的微柱凝集技術(shù)主要是凝膠凝集技術(shù)、玻璃珠柱凝集技術(shù)以及國(guó)產(chǎn)Bioxnn微柱凝膠免疫檢測(cè)試劑卡等[13，14]。

目前進(jìn)口微柱凝膠卡在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣，但是費(fèi)用相對(duì)較高。隨著我國(guó)國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡生產(chǎn)技術(shù)的改進(jìn)，其在臨床上的應(yīng)用也逐漸推廣。本研究主要采用兩種微柱凝膠卡對(duì)嬰幼兒ABO和RhD血型的鑒定。結(jié)果顯示，兩種方法對(duì)不同年齡段以及6個(gè)月以下不同病因的患者鑒定結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。凝集效應(yīng)為弱凝集的患兒多為早產(chǎn)兒。除了早產(chǎn)兒，兩種方法ABO血型鑒定中達(dá)到強(qiáng)凝集的比例均超過(guò)了95%，而RhD血型鑒定中，除了早產(chǎn)兒和少量足月新生兒為弱凝集，其他均為強(qiáng)凝集，也說(shuō)明RhD抗原在出生時(shí)基本已發(fā)育完成。

綜上所述，微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果直觀等優(yōu)點(diǎn)，而國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡鑒定結(jié)果與進(jìn)口微柱凝膠卡沒(méi)有顯著差異，并且費(fèi)用更低，值得臨床推廣使用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 袁曉華，胡惠萍. 國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡對(duì)血型鑒定的結(jié)果分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（12）： 1585-1586.

[2] 安勤發(fā)，胡志紅，崔慧芹. 微柱凝膠卡式法檢測(cè)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的效果[J]. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2013，26（6）： 880-882.

[3] 楊寶成，蘇宇清，魏天莉，等. Landsteiner-Wiener血型系統(tǒng)測(cè)序分型技術(shù)的建立[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（3）：206，223-224.

[4] Urbaniak SJ. Alloimmunity to RhD in humans[J]. Transfus Clin Biol，2006，12（13）：19-22.

[5] 金鑫，沈健，施欣慰. 輸血與檢驗(yàn)[J]. 臨床血液學(xué)雜志，2012，25（4）： 491-494.

[6] 閆朝春，蔣玲，陳麗梅，等.導(dǎo)致微柱凝膠卡式交叉配血試驗(yàn)假陽(yáng)性結(jié)果的原因分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（15）： 1737-1738.

[7] Reis KJ，Chahowski A，Cupido A，et al. Column agglutination technology：The antiblubulin test[J]. Transfusion，1993， 33（8）：639-643.

[8] Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al. The gel test：A new way to detected cell antigen-antibody reactions[J]. Transfusion，1990，30（2）：109-113.

[9] Novaretti MC，Jens E，Pagliarini T，et al. Comparison of conventional tube test technique and gel microcolumn assay fordirect antiglobulin test：a large study[J]. J Clin Lab Anal，2004，18（5）：255-258.

[10] 周安祥，王思麗，張默吟. 微柱凝膠卡式血型鑒定的干擾因素分析及處理[J]. 吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（23）： 5044-5045.

[11] 陳維佳，王冬倩，童軍. 微柱凝膠免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)[M]//李勇，馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用免疫血液學(xué)[M]. 第2版.西安：科學(xué)出版社，2006：562-570.

[12] 趙祥勝. 柱凝聚技術(shù)檢測(cè)孕婦血清IgG抗體水平[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2000，2（3）：32-33.

[13] 吳定昌，江慧. 微柱凝膠法檢測(cè)201例孕婦ABO血結(jié)果分析[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（1）：82，91.

[14] 武建. 柱凝集技術(shù)的臨床應(yīng)用及其實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀[J]. 中國(guó)輸血雜志，2003，16（5）：369-370.

（收稿日期：2014-04-08）endprint

Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名稱的頭兩個(gè)字母。蘭德斯坦納等科學(xué)家在1940年做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)恒河猴和多數(shù)人體內(nèi)的紅細(xì)胞上存在Rh血型的抗原物質(zhì)，故而命名[4]。凡是人體血液紅細(xì)胞上有Rh凝集原者，為Rh陽(yáng)性，反之為陰性。這樣就使已發(fā)現(xiàn)的紅細(xì)胞A、B、O及AB四種主要血型的人，又都分別被劃分為Rh陽(yáng)性和陰性兩種。隨著對(duì)Rh血型的不斷研究，認(rèn)為Rh血型系統(tǒng)可能是紅細(xì)胞血型中最為復(fù)雜的一個(gè)血型系統(tǒng)。Rh血型的發(fā)現(xiàn)，對(duì)更加科學(xué)地指導(dǎo)輸血工作和進(jìn)一步提高新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)診斷和維護(hù)母嬰健康都有非常重要的作用。Rh血型鑒定一般指Rh系統(tǒng)中D抗原的檢測(cè)，根據(jù)患者紅細(xì)胞是否帶有D抗原分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。

微柱凝膠法由Lpierre博士于1986年發(fā)明，用于檢測(cè)紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)，具有操作簡(jiǎn)單、結(jié)果直觀、容易標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，并且能夠自動(dòng)化檢測(cè)，因此在臨床上迅速得到推廣應(yīng)用[5-8]。微柱凝膠卡法目前被廣泛應(yīng)用于血型鑒定、不規(guī)則抗體篩選、交叉配合、鑒定及直接或間接抗人球白實(shí)驗(yàn)中的檢驗(yàn)方法，其原理是通過(guò)在微柱中加入凝膠，紅細(xì)胞膜抗原與相應(yīng)的抗體在凝膠介質(zhì)中發(fā)生免疫反應(yīng)，利用凝膠的分子篩作用，通過(guò)調(diào)節(jié)凝膠孔徑，只允許紅細(xì)胞通過(guò)，而紅細(xì)胞的凝塊不能通過(guò)，利用重力的作用將凝集紅細(xì)胞和游離紅細(xì)胞分離[9，10]。1994 年微柱凝膠技術(shù)獲得美國(guó) FDA批準(zhǔn)為免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)將微柱凝膠技術(shù)作為常規(guī)性的檢測(cè)技術(shù)而在臨床廣泛推廣。微柱凝膠技術(shù)的核心技術(shù)是凝膠分子篩，凝膠分子之間存在的間隙排阻能夠?qū)l(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯在凝膠內(nèi)，而未發(fā)生凝集的單個(gè)紅細(xì)胞則可以穿過(guò)微孔運(yùn)動(dòng)到達(dá)柱底，從而辨別是否存在凝集反應(yīng)。紅細(xì)胞與抗體發(fā)生凝集時(shí)，紅細(xì)胞聚集分布在凝膠的上部或凝膠中，則判斷存在凝集，為陽(yáng)性，未發(fā)生凝集反應(yīng)的紅細(xì)胞則沉積于管底，則判斷無(wú)凝集反應(yīng)，為陰性。微柱凝膠卡有較高的靈敏度和特異性，尤其是檢測(cè)規(guī)則抗體時(shí)，對(duì)反定型弱凝集也具有不錯(cuò)的優(yōu)勢(shì)。微柱凝集卡倒置會(huì)導(dǎo)致分子膠及上層黏液層發(fā)生變化，凝膠空隙發(fā)生不規(guī)則變化，會(huì)在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，因此在運(yùn)輸、儲(chǔ)存微柱凝膠卡時(shí)應(yīng)嚴(yán)禁劇烈的顛簸以及倒置，對(duì)于已經(jīng)發(fā)生倒置的微柱凝膠卡，通過(guò)離心的方法可以恢復(fù)[11，12]。有研究比較微柱凝膠卡與傳統(tǒng)方法對(duì)的抗球蛋白的篩選以及不規(guī)則抗體的檢測(cè)，認(rèn)為柱凝膠法具有對(duì)抗體敏感性高的優(yōu)點(diǎn)，并且反應(yīng)結(jié)果容易判讀，在操作過(guò)程中采用微柱凝膠法對(duì)間接抗人球蛋白進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)可以不同進(jìn)行洗滌紅細(xì)胞的步驟，傳統(tǒng)抗球蛋白試驗(yàn)需要加入質(zhì)控細(xì)胞，但是微柱凝膠法不用，其還可以檢出傳統(tǒng)方法不能檢測(cè)出的抗體，微柱凝膠法更容易自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。微柱凝膠技術(shù)屬于微試管柱凝集技術(shù)，該技術(shù)國(guó)外已經(jīng)成為紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)的常規(guī)方法。國(guó)內(nèi)的微柱凝集技術(shù)主要是凝膠凝集技術(shù)、玻璃珠柱凝集技術(shù)以及國(guó)產(chǎn)Bioxnn微柱凝膠免疫檢測(cè)試劑卡等[13，14]。

目前進(jìn)口微柱凝膠卡在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣，但是費(fèi)用相對(duì)較高。隨著我國(guó)國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡生產(chǎn)技術(shù)的改進(jìn)，其在臨床上的應(yīng)用也逐漸推廣。本研究主要采用兩種微柱凝膠卡對(duì)嬰幼兒ABO和RhD血型的鑒定。結(jié)果顯示，兩種方法對(duì)不同年齡段以及6個(gè)月以下不同病因的患者鑒定結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。凝集效應(yīng)為弱凝集的患兒多為早產(chǎn)兒。除了早產(chǎn)兒，兩種方法ABO血型鑒定中達(dá)到強(qiáng)凝集的比例均超過(guò)了95%，而RhD血型鑒定中，除了早產(chǎn)兒和少量足月新生兒為弱凝集，其他均為強(qiáng)凝集，也說(shuō)明RhD抗原在出生時(shí)基本已發(fā)育完成。

綜上所述，微柱凝膠卡在嬰幼兒ABO和RhD血型鑒定中具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果直觀等優(yōu)點(diǎn)，而國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡鑒定結(jié)果與進(jìn)口微柱凝膠卡沒(méi)有顯著差異，并且費(fèi)用更低，值得臨床推廣使用。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 袁曉華，胡惠萍. 國(guó)產(chǎn)微柱凝膠卡對(duì)血型鑒定的結(jié)果分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（12）： 1585-1586.

[2] 安勤發(fā)，胡志紅，崔慧芹. 微柱凝膠卡式法檢測(cè)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的效果[J]. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2013，26（6）： 880-882.

[3] 楊寶成，蘇宇清，魏天莉，等. Landsteiner-Wiener血型系統(tǒng)測(cè)序分型技術(shù)的建立[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（3）：206，223-224.

[4] Urbaniak SJ. Alloimmunity to RhD in humans[J]. Transfus Clin Biol，2006，12（13）：19-22.

[5] 金鑫，沈健，施欣慰. 輸血與檢驗(yàn)[J]. 臨床血液學(xué)雜志，2012，25（4）： 491-494.

[6] 閆朝春，蔣玲，陳麗梅，等.導(dǎo)致微柱凝膠卡式交叉配血試驗(yàn)假陽(yáng)性結(jié)果的原因分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（15）： 1737-1738.

[7] Reis KJ，Chahowski A，Cupido A，et al. Column agglutination technology：The antiblubulin test[J]. Transfusion，1993， 33（8）：639-643.

[8] Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al. The gel test：A new way to detected cell antigen-antibody reactions[J]. Transfusion，1990，30（2）：109-113.

[9] Novaretti MC，Jens E，Pagliarini T，et al. Comparison of conventional tube test technique and gel microcolumn assay fordirect antiglobulin test：a large study[J]. J Clin Lab Anal，2004，18（5）：255-258.

[10] 周安祥，王思麗，張默吟. 微柱凝膠卡式血型鑒定的干擾因素分析及處理[J]. 吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（23）： 5044-5045.

[11] 陳維佳，王冬倩，童軍. 微柱凝膠免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)[M]//李勇，馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用免疫血液學(xué)[M]. 第2版.西安：科學(xué)出版社，2006：562-570.

[12] 趙祥勝. 柱凝聚技術(shù)檢測(cè)孕婦血清IgG抗體水平[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2000，2（3）：32-33.

[13] 吳定昌，江慧. 微柱凝膠法檢測(cè)201例孕婦ABO血結(jié)果分析[J]. 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25（1）：82，91.

[14] 武建. 柱凝集技術(shù)的臨床應(yīng)用及其實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀[J]. 中國(guó)輸血雜志，2003，16（5）：369-370.

（收稿日期：2014-04-08）endprint