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      幾種不同產(chǎn)地枸杞中甜菜堿含量的比較

      2014-09-02 09:16郝鳳霞李宏燕
      江蘇農(nóng)業(yè)科學 2014年7期
      關(guān)鍵詞:提取工藝甜菜堿枸杞

      郝鳳霞 李宏燕

      摘要:根據(jù)《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的相應(yīng)方法提取枸杞中的甜菜堿,通過單因素試驗優(yōu)化其主要工藝條件,如料液比、提取時間、絡(luò)合劑加入量、絡(luò)合時間等。結(jié)果表明,甜菜堿提取的最佳工藝條件為:料液比1 g ∶60 mL,提取時間 2 h,提取液與絡(luò)合劑的比為 1 ∶5,絡(luò)合時間2 h,在此條件下,3種不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量由大到小排序為:甘肅枸杞(9.26%)>青海枸杞(8.73%)>寧夏中寧枸杞(8.71%)。

      關(guān)鍵詞:枸杞;甜菜堿;單因素;提取工藝

      中圖分類號: Q946.88;R284.2 文獻標志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)07-0330-02

      收稿日期:2013-09-24

      基金項目:寧夏自然科學基金(編號:NZ12122)。

      作者簡介:郝鳳霞(1978—),女,寧夏中寧人,碩士,講師,研究方向為天然產(chǎn)物有效成分提取與分離及藥物檢測。Tel:(0951)2062322;E-mail:hao_fx@nxu.edu.cn。枸杞子為茄科植物枸杞(Lycium chinense Mill.)或?qū)幭蔫坭剑↙yciumbarbarum L.)的干燥成熟果實,在國內(nèi)外均有分布,其在國內(nèi)的產(chǎn)區(qū)主要集中在西北地區(qū),其中寧夏產(chǎn)的枸杞最為著名,是寧夏的“五寶”之一,此外甘肅、青海等地的枸杞品質(zhì)也很高?,F(xiàn)在醫(yī)學研究表明,枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等作用[1-3]。甜菜堿是枸杞果、葉、柄中主要的生物堿之一,具有強烈的吸濕性能,此外還可以抗腫瘤、降血壓、抗消化性潰瘍及胃腸功能障礙,并且可以治療肝臟疾病[4],2010版《中華人民共和國藥典》中以甜菜堿和枸杞多糖作為評價枸杞質(zhì)量的2個重要指標[5]。本試驗首先以寧夏中寧枸杞為研究對象,對其中的甜菜堿進行提取,并采用不同方法進行測定,采用單因素試驗等多種方法優(yōu)化其主要影響因素如料液比、提取時間、絡(luò)合劑用量、絡(luò)合時間等,初步建立從中寧枸杞中提取分離甜菜堿的工藝;再對甘肅和青海的枸杞進行測定,以比較不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量,找出品種、產(chǎn)地對枸杞質(zhì)量造成的差異性,以期為甜菜堿的進一步開發(fā)利用提供一定的參考。

      1材料與方法

      1.1試驗材料

      中寧枸杞采自寧夏中寧縣舟塔鄉(xiāng),青海枸杞、甘肅枸杞購自寧夏中寧枸杞交易市場。將枸杞置于電熱鼓風干燥箱中,60 ℃連續(xù)烘干20 h后粉碎,過40目篩,放于冰箱中保存。

      濃鹽酸、飽和雷氏鹽溶液(15 g/L)、99%乙醚溶液、70%丙酮溶液、甜菜堿標準品(純度>99.99%)等試劑均為分析純;實驗室用水為蒸餾水。相應(yīng)溶液的配制方法為:(1)99%乙醚溶液:吸取1 mL水,加入到99 mL無水乙醚中;(2)70%丙酮溶液:量取30 mL水,加入到70 mL丙酮中;(3)1.5 g/L甜菜堿標準溶液:稱取0.150 0 g甜菜堿標準品,置于100 mL燒瓶中,再加少量蒸餾水攪拌使之溶解,將溶液轉(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中用蒸餾水定容;(4)15 g/L飽和雷氏鹽溶液:稱取1.500 0 g雷氏鹽,加90 mL蒸餾水攪拌,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0,于室溫下不斷攪拌45 min后抽濾,定容至100 mL(現(xiàn)配現(xiàn)用)。

      1.2試驗儀器

      UV2450紫外-可見分光光度計(日本島津公司);L/L-S 電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);DZF-6020電熱鼓風干燥箱(鞏義市英峪予華儀器廠);7DL80-2B臺式離心機(上海安亭科技儀器廠);SHB-Ⅱ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。

      1.3試驗方法

      稱取2.000 0 g甜菜堿烘干樣品,用80 mL蒸餾水溶解后于室溫放置3 h,不停地攪拌、混勻、抽濾、棄殘渣。用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1.0左右,抽濾后定容至100 mL;吸取3.00 mL移入10 mL離心管中,加蓋后在冰箱中存放15 min;加入 5 mL 雷氏鹽溶液,加蓋后再置于冰箱內(nèi)存放1 h;取出在 1 000 r/min 條件下離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚5 mL搖勻,1 000 r/min條件下離心15 min;棄去上清液,加入5.0 mL 70%的丙酮溶液,測定吸光度。

      2結(jié)果與分析

      2.1甜菜堿標準曲線的繪制

      取6支試管,分別加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL甜菜堿標準溶液,再分別加入2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0 mL蒸餾水,使最終總體積為3 mL,使其濃度分別為:0.25、0.30、035、0.40、0.45、0.50 mg/mL。在冰箱中存放15 min后分別滴加5 mL雷氏鹽溶液,再置于冰箱中3 h,取出后在 1 000 r/min 離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚 5 mL,1 000 r/min離心15 min,自然揮發(fā)至干。以70%丙酮溶液作為空白,用紫外-可見分光光度計測定吸光度,確定甜菜堿標準溶液的最大吸收波長為523 nm,在此波長處測定各個濃度的吸光度值,并繪制甜菜堿的標準曲線。甜菜堿紫外色譜圖及甜菜堿標準曲線分別見圖1、圖2,甜菜堿標準曲線為y=0500 24x-0.095 02,r2=0.994 5。

      2.2甜菜堿提取的單因素試驗

      3結(jié)論

      提取甜菜堿時采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的《蒸餾水冷浸法》和《中華人民共和國藥典》中的《80%乙醇熱回流法》這2種方法作為提取甜菜堿的方法,比較這2種方法的甜菜堿得率發(fā)現(xiàn),采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》的方法,甜菜堿得率為3.35%,而采用《中華人民共和國藥典》的方法,甜菜堿得率3.13%,且蒸餾水冷浸法比80%乙醇熱回流法提取方法安全、簡單易操作,成本低,因此選用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》作為提取甜菜堿的方法。

      不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量不同,可能與枸杞生長地域、環(huán)境、濕度、日照等生態(tài)環(huán)境因素有關(guān),如枸杞作為中成藥配伍使用時,應(yīng)嚴格控制及規(guī)范枸杞產(chǎn)地、采摘期等,使中成藥中枸杞的甜菜堿和多糖等指標符合藥典規(guī)定。

      參考文獻:

      [1]謝忱,徐麗珍,李憲銘,等. 枸杞子化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2001,26(5):35-36.

      [2]江蘇新醫(yī)學院. 中藥大辭典[M]. 上海:上??茖W技術(shù)出版社,1979:1518.

      [3]徐月紅,何嵐,徐蓮英,等. 枸杞的免疫藥理研究進展[J]. 中藥材,2000,23(5):295-298.

      [4]張宇金,高世勇,何立巍. 甜菜堿的生物活性研究[J]. 哈爾濱商業(yè)大學學報:自然科學版,2006,22(1):13-16.

      [5]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京:化學工業(yè)出版社,2009:232-233.endprint

      摘要:根據(jù)《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的相應(yīng)方法提取枸杞中的甜菜堿,通過單因素試驗優(yōu)化其主要工藝條件,如料液比、提取時間、絡(luò)合劑加入量、絡(luò)合時間等。結(jié)果表明,甜菜堿提取的最佳工藝條件為:料液比1 g ∶60 mL,提取時間 2 h,提取液與絡(luò)合劑的比為 1 ∶5,絡(luò)合時間2 h,在此條件下,3種不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量由大到小排序為:甘肅枸杞(9.26%)>青海枸杞(8.73%)>寧夏中寧枸杞(8.71%)。

      關(guān)鍵詞:枸杞;甜菜堿;單因素;提取工藝

      中圖分類號: Q946.88;R284.2 文獻標志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)07-0330-02

      收稿日期:2013-09-24

      基金項目:寧夏自然科學基金(編號:NZ12122)。

      作者簡介:郝鳳霞(1978—),女,寧夏中寧人,碩士,講師,研究方向為天然產(chǎn)物有效成分提取與分離及藥物檢測。Tel:(0951)2062322;E-mail:hao_fx@nxu.edu.cn。枸杞子為茄科植物枸杞(Lycium chinense Mill.)或?qū)幭蔫坭剑↙yciumbarbarum L.)的干燥成熟果實,在國內(nèi)外均有分布,其在國內(nèi)的產(chǎn)區(qū)主要集中在西北地區(qū),其中寧夏產(chǎn)的枸杞最為著名,是寧夏的“五寶”之一,此外甘肅、青海等地的枸杞品質(zhì)也很高。現(xiàn)在醫(yī)學研究表明,枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等作用[1-3]。甜菜堿是枸杞果、葉、柄中主要的生物堿之一,具有強烈的吸濕性能,此外還可以抗腫瘤、降血壓、抗消化性潰瘍及胃腸功能障礙,并且可以治療肝臟疾病[4],2010版《中華人民共和國藥典》中以甜菜堿和枸杞多糖作為評價枸杞質(zhì)量的2個重要指標[5]。本試驗首先以寧夏中寧枸杞為研究對象,對其中的甜菜堿進行提取,并采用不同方法進行測定,采用單因素試驗等多種方法優(yōu)化其主要影響因素如料液比、提取時間、絡(luò)合劑用量、絡(luò)合時間等,初步建立從中寧枸杞中提取分離甜菜堿的工藝;再對甘肅和青海的枸杞進行測定,以比較不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量,找出品種、產(chǎn)地對枸杞質(zhì)量造成的差異性,以期為甜菜堿的進一步開發(fā)利用提供一定的參考。

      1材料與方法

      1.1試驗材料

      中寧枸杞采自寧夏中寧縣舟塔鄉(xiāng),青海枸杞、甘肅枸杞購自寧夏中寧枸杞交易市場。將枸杞置于電熱鼓風干燥箱中,60 ℃連續(xù)烘干20 h后粉碎,過40目篩,放于冰箱中保存。

      濃鹽酸、飽和雷氏鹽溶液(15 g/L)、99%乙醚溶液、70%丙酮溶液、甜菜堿標準品(純度>99.99%)等試劑均為分析純;實驗室用水為蒸餾水。相應(yīng)溶液的配制方法為:(1)99%乙醚溶液:吸取1 mL水,加入到99 mL無水乙醚中;(2)70%丙酮溶液:量取30 mL水,加入到70 mL丙酮中;(3)1.5 g/L甜菜堿標準溶液:稱取0.150 0 g甜菜堿標準品,置于100 mL燒瓶中,再加少量蒸餾水攪拌使之溶解,將溶液轉(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中用蒸餾水定容;(4)15 g/L飽和雷氏鹽溶液:稱取1.500 0 g雷氏鹽,加90 mL蒸餾水攪拌,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0,于室溫下不斷攪拌45 min后抽濾,定容至100 mL(現(xiàn)配現(xiàn)用)。

      1.2試驗儀器

      UV2450紫外-可見分光光度計(日本島津公司);L/L-S 電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);DZF-6020電熱鼓風干燥箱(鞏義市英峪予華儀器廠);7DL80-2B臺式離心機(上海安亭科技儀器廠);SHB-Ⅱ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。

      1.3試驗方法

      稱取2.000 0 g甜菜堿烘干樣品,用80 mL蒸餾水溶解后于室溫放置3 h,不停地攪拌、混勻、抽濾、棄殘渣。用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1.0左右,抽濾后定容至100 mL;吸取3.00 mL移入10 mL離心管中,加蓋后在冰箱中存放15 min;加入 5 mL 雷氏鹽溶液,加蓋后再置于冰箱內(nèi)存放1 h;取出在 1 000 r/min 條件下離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚5 mL搖勻,1 000 r/min條件下離心15 min;棄去上清液,加入5.0 mL 70%的丙酮溶液,測定吸光度。

      2結(jié)果與分析

      2.1甜菜堿標準曲線的繪制

      取6支試管,分別加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL甜菜堿標準溶液,再分別加入2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0 mL蒸餾水,使最終總體積為3 mL,使其濃度分別為:0.25、0.30、035、0.40、0.45、0.50 mg/mL。在冰箱中存放15 min后分別滴加5 mL雷氏鹽溶液,再置于冰箱中3 h,取出后在 1 000 r/min 離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚 5 mL,1 000 r/min離心15 min,自然揮發(fā)至干。以70%丙酮溶液作為空白,用紫外-可見分光光度計測定吸光度,確定甜菜堿標準溶液的最大吸收波長為523 nm,在此波長處測定各個濃度的吸光度值,并繪制甜菜堿的標準曲線。甜菜堿紫外色譜圖及甜菜堿標準曲線分別見圖1、圖2,甜菜堿標準曲線為y=0500 24x-0.095 02,r2=0.994 5。

      2.2甜菜堿提取的單因素試驗

      3結(jié)論

      提取甜菜堿時采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的《蒸餾水冷浸法》和《中華人民共和國藥典》中的《80%乙醇熱回流法》這2種方法作為提取甜菜堿的方法,比較這2種方法的甜菜堿得率發(fā)現(xiàn),采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》的方法,甜菜堿得率為3.35%,而采用《中華人民共和國藥典》的方法,甜菜堿得率3.13%,且蒸餾水冷浸法比80%乙醇熱回流法提取方法安全、簡單易操作,成本低,因此選用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》作為提取甜菜堿的方法。

      不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量不同,可能與枸杞生長地域、環(huán)境、濕度、日照等生態(tài)環(huán)境因素有關(guān),如枸杞作為中成藥配伍使用時,應(yīng)嚴格控制及規(guī)范枸杞產(chǎn)地、采摘期等,使中成藥中枸杞的甜菜堿和多糖等指標符合藥典規(guī)定。

      參考文獻:

      [1]謝忱,徐麗珍,李憲銘,等. 枸杞子化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2001,26(5):35-36.

      [2]江蘇新醫(yī)學院. 中藥大辭典[M]. 上海:上海科學技術(shù)出版社,1979:1518.

      [3]徐月紅,何嵐,徐蓮英,等. 枸杞的免疫藥理研究進展[J]. 中藥材,2000,23(5):295-298.

      [4]張宇金,高世勇,何立巍. 甜菜堿的生物活性研究[J]. 哈爾濱商業(yè)大學學報:自然科學版,2006,22(1):13-16.

      [5]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京:化學工業(yè)出版社,2009:232-233.endprint

      摘要:根據(jù)《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的相應(yīng)方法提取枸杞中的甜菜堿,通過單因素試驗優(yōu)化其主要工藝條件,如料液比、提取時間、絡(luò)合劑加入量、絡(luò)合時間等。結(jié)果表明,甜菜堿提取的最佳工藝條件為:料液比1 g ∶60 mL,提取時間 2 h,提取液與絡(luò)合劑的比為 1 ∶5,絡(luò)合時間2 h,在此條件下,3種不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量由大到小排序為:甘肅枸杞(9.26%)>青海枸杞(8.73%)>寧夏中寧枸杞(8.71%)。

      關(guān)鍵詞:枸杞;甜菜堿;單因素;提取工藝

      中圖分類號: Q946.88;R284.2 文獻標志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)07-0330-02

      收稿日期:2013-09-24

      基金項目:寧夏自然科學基金(編號:NZ12122)。

      作者簡介:郝鳳霞(1978—),女,寧夏中寧人,碩士,講師,研究方向為天然產(chǎn)物有效成分提取與分離及藥物檢測。Tel:(0951)2062322;E-mail:hao_fx@nxu.edu.cn。枸杞子為茄科植物枸杞(Lycium chinense Mill.)或?qū)幭蔫坭剑↙yciumbarbarum L.)的干燥成熟果實,在國內(nèi)外均有分布,其在國內(nèi)的產(chǎn)區(qū)主要集中在西北地區(qū),其中寧夏產(chǎn)的枸杞最為著名,是寧夏的“五寶”之一,此外甘肅、青海等地的枸杞品質(zhì)也很高?,F(xiàn)在醫(yī)學研究表明,枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等作用[1-3]。甜菜堿是枸杞果、葉、柄中主要的生物堿之一,具有強烈的吸濕性能,此外還可以抗腫瘤、降血壓、抗消化性潰瘍及胃腸功能障礙,并且可以治療肝臟疾病[4],2010版《中華人民共和國藥典》中以甜菜堿和枸杞多糖作為評價枸杞質(zhì)量的2個重要指標[5]。本試驗首先以寧夏中寧枸杞為研究對象,對其中的甜菜堿進行提取,并采用不同方法進行測定,采用單因素試驗等多種方法優(yōu)化其主要影響因素如料液比、提取時間、絡(luò)合劑用量、絡(luò)合時間等,初步建立從中寧枸杞中提取分離甜菜堿的工藝;再對甘肅和青海的枸杞進行測定,以比較不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量,找出品種、產(chǎn)地對枸杞質(zhì)量造成的差異性,以期為甜菜堿的進一步開發(fā)利用提供一定的參考。

      1材料與方法

      1.1試驗材料

      中寧枸杞采自寧夏中寧縣舟塔鄉(xiāng),青海枸杞、甘肅枸杞購自寧夏中寧枸杞交易市場。將枸杞置于電熱鼓風干燥箱中,60 ℃連續(xù)烘干20 h后粉碎,過40目篩,放于冰箱中保存。

      濃鹽酸、飽和雷氏鹽溶液(15 g/L)、99%乙醚溶液、70%丙酮溶液、甜菜堿標準品(純度>99.99%)等試劑均為分析純;實驗室用水為蒸餾水。相應(yīng)溶液的配制方法為:(1)99%乙醚溶液:吸取1 mL水,加入到99 mL無水乙醚中;(2)70%丙酮溶液:量取30 mL水,加入到70 mL丙酮中;(3)1.5 g/L甜菜堿標準溶液:稱取0.150 0 g甜菜堿標準品,置于100 mL燒瓶中,再加少量蒸餾水攪拌使之溶解,將溶液轉(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中用蒸餾水定容;(4)15 g/L飽和雷氏鹽溶液:稱取1.500 0 g雷氏鹽,加90 mL蒸餾水攪拌,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.0,于室溫下不斷攪拌45 min后抽濾,定容至100 mL(現(xiàn)配現(xiàn)用)。

      1.2試驗儀器

      UV2450紫外-可見分光光度計(日本島津公司);L/L-S 電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);DZF-6020電熱鼓風干燥箱(鞏義市英峪予華儀器廠);7DL80-2B臺式離心機(上海安亭科技儀器廠);SHB-Ⅱ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。

      1.3試驗方法

      稱取2.000 0 g甜菜堿烘干樣品,用80 mL蒸餾水溶解后于室溫放置3 h,不停地攪拌、混勻、抽濾、棄殘渣。用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1.0左右,抽濾后定容至100 mL;吸取3.00 mL移入10 mL離心管中,加蓋后在冰箱中存放15 min;加入 5 mL 雷氏鹽溶液,加蓋后再置于冰箱內(nèi)存放1 h;取出在 1 000 r/min 條件下離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚5 mL搖勻,1 000 r/min條件下離心15 min;棄去上清液,加入5.0 mL 70%的丙酮溶液,測定吸光度。

      2結(jié)果與分析

      2.1甜菜堿標準曲線的繪制

      取6支試管,分別加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL甜菜堿標準溶液,再分別加入2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0 mL蒸餾水,使最終總體積為3 mL,使其濃度分別為:0.25、0.30、035、0.40、0.45、0.50 mg/mL。在冰箱中存放15 min后分別滴加5 mL雷氏鹽溶液,再置于冰箱中3 h,取出后在 1 000 r/min 離心15 min,棄去上清液,加入99%的乙醚 5 mL,1 000 r/min離心15 min,自然揮發(fā)至干。以70%丙酮溶液作為空白,用紫外-可見分光光度計測定吸光度,確定甜菜堿標準溶液的最大吸收波長為523 nm,在此波長處測定各個濃度的吸光度值,并繪制甜菜堿的標準曲線。甜菜堿紫外色譜圖及甜菜堿標準曲線分別見圖1、圖2,甜菜堿標準曲線為y=0500 24x-0.095 02,r2=0.994 5。

      2.2甜菜堿提取的單因素試驗

      3結(jié)論

      提取甜菜堿時采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》中的《蒸餾水冷浸法》和《中華人民共和國藥典》中的《80%乙醇熱回流法》這2種方法作為提取甜菜堿的方法,比較這2種方法的甜菜堿得率發(fā)現(xiàn),采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》的方法,甜菜堿得率為3.35%,而采用《中華人民共和國藥典》的方法,甜菜堿得率3.13%,且蒸餾水冷浸法比80%乙醇熱回流法提取方法安全、簡單易操作,成本低,因此選用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標準》作為提取甜菜堿的方法。

      不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量不同,可能與枸杞生長地域、環(huán)境、濕度、日照等生態(tài)環(huán)境因素有關(guān),如枸杞作為中成藥配伍使用時,應(yīng)嚴格控制及規(guī)范枸杞產(chǎn)地、采摘期等,使中成藥中枸杞的甜菜堿和多糖等指標符合藥典規(guī)定。

      參考文獻:

      [1]謝忱,徐麗珍,李憲銘,等. 枸杞子化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志,2001,26(5):35-36.

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