徐毅

山西康寶生物制品股份有限公司 山西 長治 046011

在確定血液制品有效期中加速試驗(yàn)的重要應(yīng)用

徐毅

山西康寶生物制品股份有限公司 山西 長治 046011

目的：探討加速試驗(yàn)在確定血液制品有效期中的應(yīng)用。方法于2013年03月至2014年03月在我公司選取的血液制品進(jìn)行研究，按照隨機(jī)分組方式將其分為三組，即一組、二組和三組，將不同組樣品分別置于不同溫度下保溫，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)取出樣品作相關(guān)物質(zhì)及含量等相關(guān)項(xiàng)目的檢測，通過對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從而計(jì)算出樣品的有效期。結(jié)果不同組別樣品的計(jì)算結(jié)果基本相同。結(jié)論在確定血液制品有效期時(shí)，可以通過采用加速實(shí)驗(yàn)法來做初步統(tǒng)計(jì)計(jì)算，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

加速試驗(yàn)法；血液制品；有效期計(jì)算

加速試驗(yàn)法在臨床確定血液制品有效期的使用已經(jīng)變得非常廣泛，但是在應(yīng)用過程中，試驗(yàn)方法都比較復(fù)雜，而且試驗(yàn)跨度和周期都比較長，計(jì)算方法復(fù)雜[1]。下面本文通過2013年03月至2014年03月在我公司選取的人血白蛋白進(jìn)行研究，按照隨機(jī)分組方式將其分為三組，即第一組、第二組和第三組，將不同組樣品置于不同溫度下保溫，分次取出樣品作相關(guān)質(zhì)量指標(biāo)的檢測，通過對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從而計(jì)算出樣品的有效期，現(xiàn)總結(jié)如下。

1.儀器和試藥

恒溫裝置：生化培養(yǎng)箱，溫度需要精確到±1攝氏度；澄明度檢測儀器：型號為YB-Ⅱ型澄明度檢測儀，廠商為天津天光光學(xué)儀器有限公司、高效液相色譜儀：型號為安捷倫1260 Infinity；色譜柱為GSK-GEL G3000SW；人血白蛋白制品[2]，是本次試驗(yàn)研究用血液制品，按照隨機(jī)分組方式分為一組、二組和三組。

2.方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

將三組樣品分別放置在不同溫度下進(jìn)行保溫，溫度分別控制在5攝氏度、23攝氏度、37攝氏度和50攝氏度，每天對供試品觀察兩次，做到對血液制品以及溫度控制范圍的檢測。每隔48h取樣檢測，和在醫(yī)院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品進(jìn)行對比研究，分別提取三組樣品，其中一組樣品放置了22天，二組樣品放置了60天，三組樣品放置了20天，使用高效液相色譜檢測保溫后不同時(shí)間取樣的多聚體含量，從而有效地計(jì)算出樣品中白蛋白單體和二聚體的含量，利用公式推測出樣品在10攝氏度和30攝氏度條件下避光保存的有效期限。

2.2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和計(jì)算結(jié)果分析[2]

通過對各組樣品在不同溫度下的檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析，我們發(fā)現(xiàn)，從實(shí)驗(yàn)樣品的外觀上看，除了在50攝氏度條件下保存的樣品外觀顏色加深以外，其他溫度條件下的樣品和醫(yī)院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品對比沒有顯著變化，都是黃色澄明的液體，沒有異物、渾濁和沉淀出現(xiàn)。如下表所示：

表一 各組樣品在不同溫度下的檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析

2.3 有效期計(jì)算

計(jì)算出樣品在不同溫度下保溫時(shí)的1/T值，lgK值，從而進(jìn)一步進(jìn)行線性回歸計(jì)算，通過公式Arrhenius進(jìn)行計(jì)算以后，可以發(fā)現(xiàn)不同批次樣品的計(jì)算結(jié)果基本相同。

2.4 樣品全檢結(jié)果[3]

在試驗(yàn)前后對樣品進(jìn)行全檢，根據(jù)各項(xiàng)藥典標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，如蛋白質(zhì)含量應(yīng)超過標(biāo)示量的95%、純度應(yīng)超過蛋白質(zhì)總量的96%、吸收度不超過0.15、多聚體含量不得超過5%、辛酸鈉含量在0.14-0.18之間等。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各組樣品由于保溫時(shí)間不同，取樣時(shí)間不同，其各項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果也存在一定的差異。

對各組樣品的全檢結(jié)果進(jìn)行分析探討，其中在實(shí)驗(yàn)之前，一組、二組、三組的蛋白質(zhì)含量超過標(biāo)示量95%的分別為201.9、201.2、198.7；純度為蛋白質(zhì)總量的96%的分別為99.5%、99.5%、99.6%；吸收度不超過0.15分別為0.03、0.03、0.04；多聚體含量不超過5%分別為2.35%、2.14%、2.23%；辛酸鈉含量在0.14-0.18之間的分別為0.169、0.170、0.174。在實(shí)驗(yàn)之后，一組、二組、三組的蛋白質(zhì)含量超過標(biāo)示量95%的分別為201.4、201.8、198.9；純度超過蛋白質(zhì)總量的96%的分別為99.2%、99.2%、99.5%；吸收度不超過0.15分別為0.10、0.08、0.09；多聚體含量不超過5%分別為2.78%、2.97%、2.77%；辛酸鈉含量在0.14-0.18之間的分別為0.164、0.167、0.169．試驗(yàn)指標(biāo)全部合格。

3.討論

加速試驗(yàn)法在臨床確定血液制品有效期的使用已經(jīng)變得非常廣泛，但是在應(yīng)用過程中，操作過程都比較復(fù)雜，而且時(shí)間跨度和周期都比較長，計(jì)算方法復(fù)雜。本文通過2013年03月至2014年03月在我公司選取的血液制品進(jìn)行研究，通過不同溫度對樣品進(jìn)行保溫試驗(yàn)處理，并且進(jìn)一步對樣品各檢驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)供試品質(zhì)量在保溫前后都符合我國2010版的《中國藥典(三部)》4的相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)。樣品在不同溫度的保溫前后，基本上都是顏色有些加深，多聚體的含量有所增加，吸收度有所增長。除了在50攝氏度條件下保存的樣品外觀顏色明顯加深以外，其他溫度條件下的樣品和醫(yī)院中放置在2攝氏度-8攝氏度冰箱中的樣品對比沒有顯著變化，都是黃色澄明的液體，沒有異物、渾濁和沉淀出現(xiàn)。這說明各組樣品由于保溫時(shí)間不同，各檢測指標(biāo)結(jié)果也存在一定的差異。因此在臨床確定血液制品的有效期限時(shí)，需要采用加速試驗(yàn)法和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法來加以計(jì)算和統(tǒng)計(jì)分析，從而能夠更加準(zhǔn)確的判斷血液制品的有效期限，為生物制品臨床學(xué)發(fā)展起到一定的推動作用。

[1]張林，劉睿斌，李秀梅.加速試驗(yàn)在確定血液制品有效期中的應(yīng)用[J].中國藥業(yè)，2009,18(04)：41-42.

[2]朱征宇，汪恩浩，王媛.應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析和化學(xué)動力學(xué)參數(shù)評價(jià)生物制品的穩(wěn)定性[J].中國生物制品學(xué)雜志，2008,21(02):126-130.

[3]李引乾，楊亞軍，吳秋霞，黃勇旗，劉江明.長效沙星注射液的化學(xué)穩(wěn)定性試驗(yàn)[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2007,35(11)：37-40.

[4]國家藥典委員會.中國藥典2010年版第三部.中國醫(yī)藥出版社，2010,1，：212-213.

R446.1

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1009-6019(2014)08-0240-01