李勇

酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測
血清甲胎蛋白腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的對比分析

李勇

目的 對比酶聯(lián)免疫法(ELISA)與電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)檢測血清甲胎蛋白(AFP)腫瘤標(biāo)志物的結(jié)果。方法 腫瘤科住院患者72例, 采集血清標(biāo)本, 分別利用酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法對各標(biāo)本中AFP水平進行檢測, 對比兩組方法所得檢測結(jié)果。結(jié)果 ELISA與ECLIA均可清楚、準(zhǔn)確反映血清AFP水平, 且兩種檢測方法相關(guān)系數(shù)在0.99以上, 在95% CI可信區(qū)間內(nèi), 雙尾檢驗P=0.2861,說明ELISA與ECLIA的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法可對血清甲胎蛋白這一腫瘤標(biāo)志物的水平予以準(zhǔn)確反映, 且檢測結(jié)果無顯著差異, 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據(jù)。

血清甲胎蛋白；酶聯(lián)免疫法；電化學(xué)發(fā)光法；相關(guān)性

血清甲胎蛋白(AFP)是胚胎發(fā)育早期的重要血清蛋白,通常情況下健康人血清AFP含量均低于20 ng/ml, 而當(dāng)患者出現(xiàn)惡性腫瘤時血清AFP含量會有不同程度的升高［1］, 故而血清AFP可作為判斷原發(fā)性肝癌及肝病預(yù)后判斷的重要依據(jù)［2］。酶聯(lián)免疫法(ELISA)是甲胎蛋白經(jīng)典檢測方法, 而電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)是新型檢測方法。為探討這兩種檢測方法在AFP檢測中的應(yīng)用價值, 作者選取72例腫瘤科住院患者血清, 對ELISA、ECLIA檢測結(jié)果進行分析, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院腫瘤科2012年3月～2014年2月收治的住院患者72例, 其中男41例, 女31例, 年齡38～68歲,平均年齡(53.6±2.8)歲；采集血清標(biāo)本72份, 其中37份血清AFP處于正常范圍內(nèi), 其余35份標(biāo)本血清AFP水平比正常范圍高。

1.2 方法 對所有患者采集3 ml靜脈血液, 離心后分離得血清, 置于-20℃環(huán)境中保存待檢。ELISA法檢測：使用鄭州安圖綠科生物工程有限公司制造的試劑盒、深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司制造的酶標(biāo)儀展開檢測。ECLIA法檢測時,應(yīng)用Cobase-411電化學(xué)發(fā)光自動分析儀(羅氏公司提供)和配套試劑、質(zhì)控品及定標(biāo)液展開檢測。在檢測時均嚴(yán)格根據(jù)儀器、試劑盒相應(yīng)說明書展開操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 利用統(tǒng)計學(xué)分析軟件SPSS16.0對相關(guān)數(shù)據(jù)展開統(tǒng)計學(xué)分析, 計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

使用最小二乘法(OLS)擬合直線, 以ELISA檢測結(jié)果為Y軸, 以ECLIA檢測結(jié)果為X軸, 探討兩者間相關(guān)性。擬合直線為：Y=-3.255 51+1.211 006X (-6.138 57)(103.082 6)。通過對擬合直線結(jié)果進行分析, 可知截距頂t值為-6.138 57,比臨界值大(P＜0.05), 處于95%CI可信區(qū)間內(nèi), 且截距頂顯著。X前系數(shù)項t值103.082 6, 比臨界值大(P＜0.05), 處于95%CI可信區(qū)間內(nèi), X前系數(shù)項顯著。由此可見, X和Y之間線性關(guān)系成立, 相關(guān)系數(shù)為0.995623, 與1十分接近, 由此可見X和Y高度相關(guān)。通過分析可知, 95%CI可信區(qū)間內(nèi),雙尾檢驗P=0.2861, 由此可見ELISA與ECLIA對于血清AFP的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

3 討論

AFP是胚胎血清主要蛋白, 為腫瘤相關(guān)性抗原, 主要是在胎兒時期由肝臟組織合成, 在胎兒娩出后其體內(nèi)AFP水平會快速下降, 出生1年內(nèi)AFP水平即會下降到正常范圍內(nèi), 也即血清AFP水平在20 ng/ml以下。有關(guān)統(tǒng)計顯示, 70%～95%的原發(fā)性肝癌患者血清AFP水平會異常升高［3］, 急性病毒性肝炎、酒精性肝硬化及畸胎等患者體內(nèi)AFP水平也可輕度增高, 而轉(zhuǎn)移性肝癌患者體內(nèi)AFP水平也處于較高水平,此類患者AFP水平均不超過350～400 IU/ml。

AFP是原發(fā)性肝癌特異性極強的腫瘤標(biāo)志物, 已有報道顯示, 在肝癌診斷中, AFP診斷符合率達70%～90%。現(xiàn)階段AFP腫瘤標(biāo)志物的檢測方法主要為免疫層析法、ELISA法、放射免疫法、ECLIA等。ELISA法是AFP經(jīng)典檢測方法, 操作簡便且成本較低, 在基層醫(yī)院中甲胎蛋白篩查中極為適用。同時, 這一檢查方法敏感性、穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性較低。ECLIA是近年來新興起來的新型標(biāo)記免疫分析法, 是通過將免疫測定與電化學(xué)發(fā)光方法相結(jié)合, 對甲胎蛋白水平展開檢測。ECLIA檢測迅速且結(jié)果準(zhǔn)確, 檢測范圍較寬, 不存在放射性污染, 同時其自動化程度較高, 在腫瘤標(biāo)志物檢測的應(yīng)用中日益廣泛, 然而其檢測試劑及相應(yīng)設(shè)備價格較為昂貴, 限制了這一檢測方法在臨床中的大范圍推廣。通過分析可知, ELISA與ECLIA在AFP腫瘤標(biāo)志物檢測上各有優(yōu)劣,臨床應(yīng)用中各有局限, 當(dāng)應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測出陽性或假陽性時, 可經(jīng)由電化學(xué)發(fā)光法進一步確認(rèn)。本次研究通過對72例腫瘤科住院患者血清AFP的ELISA檢測結(jié)果及與ECLIA檢測結(jié)果進行對比, 可知ELISA與ECLIA均可清楚、準(zhǔn)確反映血清AFP水平。經(jīng)最小二乘法擬合直線方式檢測, 經(jīng)羅氏Cobase-411電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果作為參考標(biāo)準(zhǔn), 擬合直線于95%CI可信區(qū)間內(nèi)X前系數(shù)項顯著, 由此可見X和Y線性關(guān)系顯著, 說明ELISA與ECLIA檢測結(jié)果具有相關(guān)性, 且兩種檢測方法相關(guān)系數(shù)在0.99以上, 在95%CI可信區(qū)間內(nèi),雙尾檢驗P=0.2861, ELISA與ECLIA的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

綜上所述, 酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法可對血清甲胎蛋白這一腫瘤標(biāo)志物的水平予以準(zhǔn)確反映, 且檢測結(jié)果無顯著差異, 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據(jù)。

［1］ 趙琛, 李冬嚴(yán), 張振文.多項腫瘤標(biāo)志物檢測在前列腺腫瘤鑒別診斷中的意義.中國老年學(xué)雜志, 2013,33(24):6137-6138.

［2］ 竇倩, 商海濤, 葉進, 等.血清及腹水腫瘤標(biāo)志物對良惡性腹水的鑒別診斷價值.華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2014,43(1): 98-101.

［3］ 徐焰, 陳名聲, 郝曉柯.聯(lián)合檢測血清AFU、AFP腫瘤標(biāo)志物在原發(fā)性肝癌診斷中的臨床價值.重慶醫(yī)學(xué), 2008,37(24): 2805-2807.

2014-07-02］

461000 河南省許昌市中醫(yī)院檢驗科