超高效液相色譜高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜法快速篩查乳制品中磺胺類與氟喹諾酮類藥物

孟哲+石志紅+呂運開等

摘要：利用超高效液相色譜高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)， 建立了一種快速篩查乳制品中8種氟喹諾酮5種磺胺類藥物及其4種乙酰化代謝物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶劑和Oasis HLB固相萃取載體作吸附劑，實現(xiàn)了牛奶樣品中17種目標(biāo)物的同時提取和有效凈化。利用MassLynx Chromlynx軟件建立了這17種分析物的數(shù)據(jù)庫。以Full Scan/MSE進(jìn)行定性篩查和定量檢測。4種代謝物在10～2000 μg/L范圍內(nèi)和其它分析物在05～100 μg/L范圍內(nèi)，其基質(zhì)匹配內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)良好的線性（R2>0983）。氟喹諾酮的定量限為05～08 μg/kg，磺胺類藥物及代謝物的定量限為05～130 μg/kg。在3個添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在職業(yè)分析化學(xué)家協(xié)會（AOAC）提出的允許范圍之內(nèi)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%。本方法快速而靈敏，成功用于乳制品中抗生素及其代謝物的篩查、確認(rèn)和定量分析。所研究的每種藥物及代謝物殘留均低于有關(guān)的最高殘留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其總殘留量已超過最高殘留限量。

1引言

磺胺類（Sulfonamides，SAs）和氟喹諾酮類（Fluoroquinolones，F(xiàn)Qs）同屬合成抗菌藥物，廣泛用于畜牧業(yè)中。由于抗生素的聯(lián)合用藥，導(dǎo)致多種抗生素在動物組織、器官或可食性產(chǎn)品（如蛋、奶）中的殘留和代謝。牛奶中抗生素及其代謝物的殘留已引起人們的關(guān)注。SAs代謝物乙?；前吩谀蛑腥芙舛鹊?，析出結(jié)晶質(zhì)對腎臟損害較大。FQs藥物對人體也有一定副作用。許多國家和國際組織制定了SAs和FQs的最大允許殘留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我國規(guī)定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超過0025 mg/kg[3]。但關(guān)于抗生素代謝物的殘留問題還未引起足夠重視。

食品中獸藥殘留檢測已從單一化合物向多種類、多化合物及其代謝物的同時定性和定量分析發(fā)展[4]。測定動物性食品中SAs或FQs殘留的液相色譜質(zhì)譜分析方法[5～7]，已經(jīng)不適用實際樣品快速篩查的需要。超高效液相色譜，具有更強的分離能力、樣品通量和靈敏度。電噴霧離子源高分辨飛行時間質(zhì)譜在MassLynx軟件的支持下，可以提供母離子和碎片離子的精確質(zhì)量數(shù)，準(zhǔn)確推算可能的分子式，從而進(jìn)一步對化合物的結(jié)構(gòu)和裂解規(guī)律加以確證。超高效液相色譜與高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用，不僅提高了抗生素及其代謝物殘留快速定性篩查的可靠性，同時可以獲得較高靈敏度的定量結(jié)果[8，9]。目前采用該技術(shù)進(jìn)行快速篩查的研究已有報道[10～12]，但關(guān)于牛奶中抗生素及其代謝物同時篩查及確認(rèn)的研究報道較少。

本研究以8種FQs和5種SAs及其4種代謝物為對象，利用高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代謝物快速篩查的方法。

摘要：利用超高效液相色譜高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)， 建立了一種快速篩查乳制品中8種氟喹諾酮5種磺胺類藥物及其4種乙?；x物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶劑和Oasis HLB固相萃取載體作吸附劑，實現(xiàn)了牛奶樣品中17種目標(biāo)物的同時提取和有效凈化。利用MassLynx Chromlynx軟件建立了這17種分析物的數(shù)據(jù)庫。以Full Scan/MSE進(jìn)行定性篩查和定量檢測。4種代謝物在10～2000 μg/L范圍內(nèi)和其它分析物在05～100 μg/L范圍內(nèi)，其基質(zhì)匹配內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)良好的線性（R2>0983）。氟喹諾酮的定量限為05～08 μg/kg，磺胺類藥物及代謝物的定量限為05～130 μg/kg。在3個添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在職業(yè)分析化學(xué)家協(xié)會（AOAC）提出的允許范圍之內(nèi)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%。本方法快速而靈敏，成功用于乳制品中抗生素及其代謝物的篩查、確認(rèn)和定量分析。所研究的每種藥物及代謝物殘留均低于有關(guān)的最高殘留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其總殘留量已超過最高殘留限量。

1引言

磺胺類（Sulfonamides，SAs）和氟喹諾酮類（Fluoroquinolones，F(xiàn)Qs）同屬合成抗菌藥物，廣泛用于畜牧業(yè)中。由于抗生素的聯(lián)合用藥，導(dǎo)致多種抗生素在動物組織、器官或可食性產(chǎn)品（如蛋、奶）中的殘留和代謝。牛奶中抗生素及其代謝物的殘留已引起人們的關(guān)注。SAs代謝物乙?；前吩谀蛑腥芙舛鹊停龀鼋Y(jié)晶質(zhì)對腎臟損害較大。FQs藥物對人體也有一定副作用。許多國家和國際組織制定了SAs和FQs的最大允許殘留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我國規(guī)定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超過0025 mg/kg[3]。但關(guān)于抗生素代謝物的殘留問題還未引起足夠重視。

食品中獸藥殘留檢測已從單一化合物向多種類、多化合物及其代謝物的同時定性和定量分析發(fā)展[4]。測定動物性食品中SAs或FQs殘留的液相色譜質(zhì)譜分析方法[5～7]，已經(jīng)不適用實際樣品快速篩查的需要。超高效液相色譜，具有更強的分離能力、樣品通量和靈敏度。電噴霧離子源高分辨飛行時間質(zhì)譜在MassLynx軟件的支持下，可以提供母離子和碎片離子的精確質(zhì)量數(shù)，準(zhǔn)確推算可能的分子式，從而進(jìn)一步對化合物的結(jié)構(gòu)和裂解規(guī)律加以確證。超高效液相色譜與高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用，不僅提高了抗生素及其代謝物殘留快速定性篩查的可靠性，同時可以獲得較高靈敏度的定量結(jié)果[8，9]。目前采用該技術(shù)進(jìn)行快速篩查的研究已有報道[10～12]，但關(guān)于牛奶中抗生素及其代謝物同時篩查及確認(rèn)的研究報道較少。

本研究以8種FQs和5種SAs及其4種代謝物為對象，利用高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代謝物快速篩查的方法。

摘要：利用超高效液相色譜高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)， 建立了一種快速篩查乳制品中8種氟喹諾酮5種磺胺類藥物及其4種乙酰化代謝物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶劑和Oasis HLB固相萃取載體作吸附劑，實現(xiàn)了牛奶樣品中17種目標(biāo)物的同時提取和有效凈化。利用MassLynx Chromlynx軟件建立了這17種分析物的數(shù)據(jù)庫。以Full Scan/MSE進(jìn)行定性篩查和定量檢測。4種代謝物在10～2000 μg/L范圍內(nèi)和其它分析物在05～100 μg/L范圍內(nèi)，其基質(zhì)匹配內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)良好的線性（R2>0983）。氟喹諾酮的定量限為05～08 μg/kg，磺胺類藥物及代謝物的定量限為05～130 μg/kg。在3個添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在職業(yè)分析化學(xué)家協(xié)會（AOAC）提出的允許范圍之內(nèi)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%。本方法快速而靈敏，成功用于乳制品中抗生素及其代謝物的篩查、確認(rèn)和定量分析。所研究的每種藥物及代謝物殘留均低于有關(guān)的最高殘留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其總殘留量已超過最高殘留限量。

1引言

磺胺類（Sulfonamides，SAs）和氟喹諾酮類（Fluoroquinolones，F(xiàn)Qs）同屬合成抗菌藥物，廣泛用于畜牧業(yè)中。由于抗生素的聯(lián)合用藥，導(dǎo)致多種抗生素在動物組織、器官或可食性產(chǎn)品（如蛋、奶）中的殘留和代謝。牛奶中抗生素及其代謝物的殘留已引起人們的關(guān)注。SAs代謝物乙?；前吩谀蛑腥芙舛鹊停龀鼋Y(jié)晶質(zhì)對腎臟損害較大。FQs藥物對人體也有一定副作用。許多國家和國際組織制定了SAs和FQs的最大允許殘留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我國規(guī)定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超過0025 mg/kg[3]。但關(guān)于抗生素代謝物的殘留問題還未引起足夠重視。

食品中獸藥殘留檢測已從單一化合物向多種類、多化合物及其代謝物的同時定性和定量分析發(fā)展[4]。測定動物性食品中SAs或FQs殘留的液相色譜質(zhì)譜分析方法[5～7]，已經(jīng)不適用實際樣品快速篩查的需要。超高效液相色譜，具有更強的分離能力、樣品通量和靈敏度。電噴霧離子源高分辨飛行時間質(zhì)譜在MassLynx軟件的支持下，可以提供母離子和碎片離子的精確質(zhì)量數(shù)，準(zhǔn)確推算可能的分子式，從而進(jìn)一步對化合物的結(jié)構(gòu)和裂解規(guī)律加以確證。超高效液相色譜與高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用，不僅提高了抗生素及其代謝物殘留快速定性篩查的可靠性，同時可以獲得較高靈敏度的定量結(jié)果[8，9]。目前采用該技術(shù)進(jìn)行快速篩查的研究已有報道[10～12]，但關(guān)于牛奶中抗生素及其代謝物同時篩查及確認(rèn)的研究報道較少。

本研究以8種FQs和5種SAs及其4種代謝物為對象，利用高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代謝物快速篩查的方法。