三種紅細(xì)胞沉降率檢驗方法對比分析

王潤琴，李美英，李曉斌

(陽煤集團(tuán)總醫(yī)院，山西 陽泉 045000)

紅細(xì)胞沉降率(evythrocyte sedimentation tate，ESR)是指在規(guī)定條件下，離體抗凝全血中的紅細(xì)胞自然下沉的速率。ESR是臨床常規(guī)檢測項目，雖特異性差，但其生理性及病理性增快對疾病的鑒別診斷以及疾病的動態(tài)觀察具有一定的實用價值［1］。ESR檢驗多年來一直延用傳統(tǒng)魏氏手工法。盡管魏氏法在國內(nèi)屬規(guī)范方法，操作簡便，可是不能滿足美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)提出的保證操作者生物安全的要求［1］。隨著高新技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用，安全的ESR檢驗設(shè)備、快速的ESR檢驗方法誕生了，BD Sedi-15帶刻度血沉架、SD-100全自動血沉儀陸續(xù)應(yīng)用于臨床實驗室。目前，國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)首選魏氏法作為參考方法，用于驗證其他方法的可靠性［1］。本研究以傳統(tǒng)魏氏法為參考，采用傳統(tǒng)魏氏法BD Sedi-15帶刻度血沉架改良魏氏法及SD-100全自動血沉儀法，于室溫(18～25℃)下分別對10例標(biāo)本同時進(jìn)行ESR檢驗，并對3種方法測定結(jié)果進(jìn)行對比分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取陽泉煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院患者標(biāo)本10例，采用紅細(xì)胞壓積為0.30～0.36、ESR 分布在15～105 mm/h范圍內(nèi)的乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝全血。

1.2 儀器及器材

1.2.1 參考法 傳統(tǒng)魏氏法，將抗凝血置于特制刻度血沉管內(nèi)，垂直立于室溫1 h后，讀取上層血漿的高度，即為ESR［2］;采用30 cm長一端帶20 cm刻度玻璃血沉管及其配套帶調(diào)節(jié)螺旋裝置的血沉架、EDTA抗凝普通真空采血管。

1.2.2 常規(guī)法 a)BD Sedi-15帶刻度血沉架法(常規(guī)法):將裝有抗凝血的專用血沉真空采血管直接垂直立于配套帶刻度血沉架內(nèi)1 h后，對照血沉架上的特制刻度讀取上層血漿的高度，即為ESR;采用BD Sedi-15帶刻度血沉架及配套真空采血管。b)SD-100全自動血沉儀法(常規(guī)法2):全自動血沉儀根據(jù)紅細(xì)胞下沉過程中血漿濁度的改變，采用光電比濁、紅外線掃描或攝影法動態(tài)分析紅細(xì)胞下沉各個時段血漿的透光度，30 min后微電腦記錄并打印結(jié)果;采用SD-100全自動血沉儀及配套真空采血管。

1.3 方法

采用EDTA抗凝普通真空采血管分別對10位患者取樣，每位不少于8 mL，血樣充分混勻后將部分血樣按BD Sedi-15帶刻度血沉架法和SD-100全自動血沉儀法要求的標(biāo)本量分別置于各自瀝干抗凝劑的配套真空采血管中，剩余部分留作傳統(tǒng)魏氏法用。將準(zhǔn)備好的標(biāo)本于室溫下分別用其配套方法按操作規(guī)程檢測ESR，標(biāo)本采集后4 h內(nèi)完成［2］。

1.4 記錄ESR結(jié)果

由于本實驗所用標(biāo)本EDTA抗凝全血屬于未稀釋標(biāo)本，故還需采用經(jīng)驗公式將直接測得的ESR結(jié)果進(jìn)行糾正、整理。未稀釋標(biāo)本糾正ESR(mm/h)=(未稀釋標(biāo)本 ESR ×0.86)－12［1］。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

參照ICSH參考法與常規(guī)法ESR檢測結(jié)果比較范圍，以魏氏法作為參考，對其他兩種常規(guī)方法所得糾正ESR進(jìn)行驗證［1］，所得糾正ESR應(yīng)用2003版Excel軟件計算相關(guān)系數(shù)(r)并繪制散點圖作線性回歸處理，進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 數(shù)據(jù)處理

經(jīng)過調(diào)節(jié)同一標(biāo)本的HCT，使ESR值分布在15～105 mm/h范圍，并對其他常規(guī)法相對應(yīng)的ESR值進(jìn)行驗證，將所有常規(guī)法結(jié)果的95%限定值范圍作為ICSH魏氏參考法與其他常規(guī)法ESR檢測結(jié)果比較范圍［1］，可見所有結(jié)果均在ICSH魏氏參考法與其他常規(guī)ESR檢測法結(jié)果范圍內(nèi)。見表1。

表1 兩種常規(guī)方法糾正ESR結(jié)果與參考法比較 mm/h

2.2 統(tǒng)計學(xué)分析

據(jù)表1結(jié)果，以魏氏法作為參考，分別對其他兩種常規(guī)方法所得糾正ESR值計算相關(guān)系數(shù)，得r值，繪制散點圖作線性回歸處理(見圖1)可見，在整個取值范圍內(nèi)兩種常規(guī)ESR檢驗方法和魏氏參考法比較的數(shù)據(jù)圖均呈直線關(guān)系。依照NCCLS EP9-A2中用患者樣本進(jìn)行比對，r均大于0.975，說明標(biāo)本取值范圍合適，可見兩種ESR檢驗方法的結(jié)果與魏氏法比較，具有直線相關(guān)性。

圖1 兩種常規(guī)方法糾正ESR與魏氏參考法相關(guān)性

3 討論

作為傳統(tǒng)且應(yīng)用較廣的實驗室指標(biāo)，ESR檢驗操作簡便，但迄今仍未建立確定性方法［1］。

魏氏法作為傳統(tǒng)方法，為國內(nèi)規(guī)范方法。ICSH規(guī)定的ESR檢測的標(biāo)準(zhǔn)化文件中，均以魏氏法為基礎(chǔ)，對血沉管規(guī)格、抗凝劑使用、血標(biāo)本制備、檢測條件和方法及報告結(jié)果等操作過程的各個環(huán)節(jié)重新作了嚴(yán)格的規(guī)定，其突出的優(yōu)點是可采用EDTA抗凝，可與血液分析儀共用一份抗凝靜脈血標(biāo)本，并在分析結(jié)果時易于綜合白細(xì)胞變化進(jìn)行判斷［1］。由于魏氏法操作過程中需要開蓋移血，加之一次性血沉管成本較高，實驗室仍舊反復(fù)使用人工清潔干燥后的血沉管。明顯存在的高污染風(fēng)險對ESR檢測方法的細(xì)節(jié)有了新的要求。NCCLS文件提出改進(jìn)ESR檢測技術(shù)，要求采用自動或封閉系統(tǒng)代替開放系統(tǒng)從而保證操作者生物安全［1］。

隨著臨床實驗室真空采血管的引進(jìn)，特制枸櫞酸鈉抗凝真空血沉采血管應(yīng)用于ESR檢驗。應(yīng)用改良魏氏法的BD Sedi-15帶刻度血沉架及采用紅外線掃描動態(tài)分析ESR速率的SD-100全自動血沉儀使用各自配套枸櫞酸鈉抗凝真空血沉采血管按要求采血后，無需開蓋移血，無需另外使用特制刻度血沉管，直接將其顛倒至少8次，待其充分混勻后按要求置于配套設(shè)備即可進(jìn)行ESR檢測，滿足了NCCLS文件提出的保證操作者生物安全的要求。SD-100全自動血沉儀不僅自動化、微量化，還可在30 min內(nèi)得到檢測結(jié)果，大大縮短了臨床等候報告的時間［1］。

目前，ICSH首選魏氏法作為參考方法，采用魏氏管和同一患者EDTA抗凝全血檢測ESR，而后對結(jié)果進(jìn)行經(jīng)驗公式糾正，用于驗證其他方法特定設(shè)備的ESR值［1］;NCCLS EP9-A2文件設(shè)計用患者樣本進(jìn)行比對。因此，本實驗通過以魏氏法作參考，對BD Sedi-15帶刻度血沉架法及SD-100全自動血沉儀所得糾正ESR值進(jìn)行比較及相關(guān)性分析，可見所有結(jié)果均在ICSH參考法與常規(guī)法ESR檢測結(jié)果比較范圍內(nèi)，表明這兩種新方法應(yīng)用于ESR檢驗結(jié)果滿意。兩種常規(guī)法的結(jié)果與魏氏參考法比較具有直線相關(guān)性，表明3種ESR檢驗方法的結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

［1］熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)［M］.4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008.

［2］葉應(yīng)撫，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006.