鹽城市2013年手足口病病原學(xué)特征分析*

王 瑤，陳國清，邵榮標(biāo)，許曉慶

（鹽城市疾病預(yù)防控制中心，江蘇224000）

手足口?。╤and,foot and mouth disease,HFMD）是一種常見多發(fā)傳染病，全球流行，多發(fā)生于嬰幼兒，由多種腸道病毒感染引起的相同臨床癥候群。臨床上多以發(fā)熱和手、足、口腔、臀部等部位皮疹或皰疹為主要特征。少數(shù)重癥病例可累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引發(fā)心肌炎、無菌性腦膜腦炎、神經(jīng)源性肺水腫等嚴(yán)重并發(fā)癥甚至死亡[1-2]。自1957年首次報道手足口病以來[3]，CVA16和EV71成為手足口病的主要病原[4]。2013年對鹽城地區(qū)各縣市區(qū)手足口病監(jiān)測病例進行病原學(xué)檢測及特征分析，發(fā)現(xiàn)鹽城地區(qū)腸道病毒株在病原譜的構(gòu)成上發(fā)生了很大變化，為腸道病毒病原學(xué)的研究和國內(nèi)手足口病的防控提供參考經(jīng)驗。

1 資料與方法

1.1 一般資料 鹽城各縣市區(qū)被傳染病門診診斷為手足口病患兒（診斷標(biāo)準(zhǔn)參照衛(wèi)生部頒布的《手足口病診療指南》2010版），征得家長同意，采集患兒的咽拭子和肛拭子。所有患兒標(biāo)本的采集時間均在發(fā)病3天內(nèi)，并在冷藏的條件下，采集后48h內(nèi)送到本實驗室。

1.2 方法 （1）核酸提取：用QIAamp Viral RNA Mini kit(QIAGEN,德國)提取病毒 RNA。（2）實時熒光RT-PCR檢測：采用腸道病毒實時熒光RT-PCR檢測試劑盒，配置25μL反應(yīng)體系，用ABI7500熒光定量PCR儀進行反應(yīng)。在試驗條件均成立的前提下，按照試劑盒提供的Ct值判斷標(biāo)準(zhǔn)對核酸樣本進行判斷。（3） 試劑：QIAamp Viral RNA Mini kit(QIAGEN,德國)；無水乙醇；腸道病毒通用、EV71和CVA16(1+2型)以及CVA6實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（江蘇碩世生物科技有限公司）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS15.0軟件計算，采用χ2檢驗分析結(jié)果。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 基本資料 共采集疑似手足口患兒491例，其中男321例，女170例，男女性別比1.9︰1。其中臨床重癥病例26例中，男18例，女8例，男女性別比2.25∶1。重癥病例在性別構(gòu)成間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.18，P＞0.05)，在年齡組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (χ2=18.38，P＜0.01)，其中 0～3 歲組的重癥病例較高，見表1。

表1 2013年鹽城市手足口病例性別年齡構(gòu)成

2.2 標(biāo)本EVU/EV71/CVA16/CVA6熒光RT-PCR結(jié)果 患兒491例標(biāo)本中，共檢出腸道病毒核酸陽性193例（39.31%）中，EV71型35例（18.13%），CVA16型35例（18.13%），CVA6型96例（49.74%），其他未分型27例（13.99%）。EV71與CVA16病例之間發(fā)病比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.36，P＞0.05），CVA6與EV71、CVA16病例之間發(fā)病比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=62.9，P＜0.01）。臨床重癥病例 14例中，EV71型3例，CVA16型為0例，CVA6型9例，未分型2例，CVA6與EV71、CVA16三者發(fā)病比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.0，P＜0.05），見表 2、3。

表2 鹽城市2013年手足口病原EV71/CVA16熒光PCR結(jié)果

表3 鹽城市2013年手足口病原CVA6普通病例與重癥病例分型情況比較

3 討 論

手足口病是某些不同血清型腸道病毒感染而引起的一種常見急性傳染病。引起手足口病的腸道病毒有20多種，其中以CVA16和EV71型最為常見。CVA16型與EV71型有著類似的基因結(jié)構(gòu)[5]，但兩者引起的疾病程度卻有所區(qū)別，前者引起手足口病病一般癥狀，預(yù)后較好。后者更易導(dǎo)致心肌炎、神經(jīng)源性肺水腫、腦干腦炎、急性遲緩性麻痹等并發(fā)癥，易導(dǎo)致患兒死亡[6]。本研究除檢測到常見的EV71和CVA16外，尚檢測到大量的CVA6型腸道病毒。

本次研究發(fā)現(xiàn)，2013年鹽城地區(qū)手足口病多發(fā)生于5歲以內(nèi)兒童，與國內(nèi)報道基本一致。其中1～4歲年齡組發(fā)病數(shù)最高，這可能與該年齡段幼兒好動、不懂衛(wèi)生且機體免疫力較低而容易被感染有關(guān)。3歲以下幼童易出現(xiàn)重癥病例。在確診的193例患兒中，EV71和CVA16感染的病例只占其中的一小部分。而CVA6型成為優(yōu)勢流行株，且成為重癥手足口病的主要病原體，使引起手足口病在傳統(tǒng)病原譜上，普通病例和重癥病例的構(gòu)成發(fā)生了很大變化。即由以往常見的EV71和CVA16型轉(zhuǎn)變?yōu)镃VA6型。近年來,國外也有腸道病毒CVA6致病的報道，如2008年芬蘭手足口病爆發(fā)流行時發(fā)現(xiàn)病原體中有CVA6[7]，患者除有手足口病的癥狀外，部分患者出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，還有一部分患者在恢復(fù)期伴有脫甲[8]。本次研究發(fā)現(xiàn)鹽城地區(qū)手足口病的病原體除EV71、CVA16和CVA6型外，還有不能分型的其他腸道病毒。這些未分型的非優(yōu)勢株同樣引起重癥手足口病，在14例重癥病例中占14.28%。

目前，關(guān)于CVA6在手足口病中的作用還不十分清楚，在日本和臺灣CVA6與皰疹性咽峽炎的爆發(fā)相關(guān)。令人關(guān)注的是新加坡報告CVA6在引起手足口病中，與CVA16和EV71同等重要[9]。CVA6是否會成為區(qū)域性手足口病的重要病原，需要進一步檢測和觀察?，F(xiàn)在國內(nèi)外尚無針對性的疫苗和特異性的治療手段，因此早發(fā)現(xiàn)、早隔離治療是預(yù)防和控制該病的關(guān)鍵。分子生物學(xué)方法對于手足口病的快速檢測顯得尤為重要。手足口病不是一種陌生的疾病，在不同時期、不同地區(qū)發(fā)生手足口病具有不同的流行特征，臨床特征也存在差異，因此對于病原體的研究具有重要意義。

[1]吳艷.1359例手足口病流行病學(xué)分析［J］.中國熱帶醫(yī)學(xué),2006,6(4):607.

[2]王曉華,李文琳.小兒手足口病1602例報告［J］.中華流行病學(xué)雜志,2001,22(4):272.

[3]Robinson CR,Doane FW,Rhodes AJ.Report of an outbreak of febrile illness with pharyngeal lesions and exanthem:Toronto,summer 1957;isolation of group A Coxsackie virus［J］.Can Med Assoc J,1958,79(8):615-621.

[4]Chatproedprai S,Theanboonlers A,Korkong S,et al.Clinical and molecular characterization of hand-foot-and-mouth disease in Thailand,2008-2009［J］.Jpn J Infect Dis,2010,63(4):229-233.

[5]Mcminn PC.An overview of the evolution of enterovirus 71 and its clinical and public health significance［J］.FEMS Microbiol Rev,2002,26(1):91-107.

[6]周麗玲.腸道病毒71型與手足口病的研究進展［J］.中國婦幼保健,2013,28(3):562-564.

[7]Blomqvist S,Klemola P,Kaijalainen S,et al.Co-circulation of coxsackieviruses A6 and A10 in hand,foot and mouth disease outbreak in Finland［J］.J Clin Virol,2010,48(1):49-54.

[8]Osterback R,Vuorinen T,Linna M,et al.Coxsackievirus a6 and hand,foot,and mouth disease,Finland［J］.Emerg Infect Dis,2009,15(9):1485-1488.

[9]Ang LW,Koh BK,Chan KP,et al.Epidemiology and control of hand,foot and mouth disease in Singapore,2001-2007［J］.Ann Acad Med Singapore,2009,38(2):106-112.