錢宏波 周曉冬

(西安市第八醫(yī)院檢驗科，710061)

我國是乙肝大國，屬于乙肝病毒(HBV)高流行區(qū)，HBV傳染性強，在我國發(fā)病率高[1]。因此HBV實驗室檢測具有很重要的篩查和診斷意義，其實驗方法也逐漸增多[2]。HBV外膜蛋白由S蛋白、前S1(pre-S1)和前S2(pre-S2)組成，pre-S1是乙肝病毒外膜蛋白的重要組成部分，其所含的肝細胞膜受體對乙肝病毒感染肝細胞和機體的免疫應(yīng)答具有十分重要的作用，研究表明HBV pre-S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率一致，其能夠反映HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制情況[3]。目前，臨床實驗室大多采用ELISA方法檢測pre-S1，隨著化學(xué)發(fā)光技術(shù)的日益成熟，利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測pre-S1在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用[4]。本研究利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測乙肝表面抗原(HBsAg)陽性患者不同乙肝模式乙肝pre-S1蛋白，旨在探討其臨床價值，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013-02—2014-02在本院檢測HBsAg結(jié)果為陽性患者400例，患者來自門診和住院部。其中男230例，女170例；年齡17～81歲，平均(49.2±18.5)歲。本研究所有患者均獲得知情同意，并上報本院學(xué)術(shù)委員會批準備案。

1.2 儀器與試劑 pre-S1和乙肝兩對半的定量檢測采用雅培ARCHITECT i2000化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析儀及其配套試劑，由美國雅培公司生產(chǎn)；pre-S1所使用的試劑為上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供的乙型肝炎病毒pre-S1抗原檢測試劑盒[國食藥監(jiān)械(準)字2010第3400465號]，儀器為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的Autobio LUMO型化學(xué)發(fā)光儀。

1.3 試驗方法 不同乙肝模式的定量采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析，嚴格按照試劑盒上的說明操作，結(jié)果的判斷為：≥0.05 IU/mL時，HBsAg陽性；≥10 mIU/mL時，HBsAb陽性；S/CO≥1時，HBeAg和HBcAb陽性；S/CO≤1時，HBeAb陽性。pre-S1的測定采用化學(xué)發(fā)光技術(shù)，利用化學(xué)免疫分析儀測定每孔RLU值后計算S/CO值，S/CO≥1時判斷為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計和分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝模式分布 本研究中共有7種不同的乙肝模式。Ⅰ：HBsAg＋HBeAg＋HBcAb陽性；Ⅱ：HBsAg＋HBeAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅲ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAg＋HBcAb陽性；Ⅳ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅴ：HBsAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅵ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅶ：HBsAg＋HBcAb陽性。其分布及pre-S1陽性率(表1)，可見HBV大三陽模式中pre-S1陽性率較高。

2.2 HBsAg濃值與pre-S1的關(guān)系 將HBsAg按照濃度值分為5組，對濃度值在＞250的標本使用雅培HBsAg Auto試劑自動稀釋500倍后重新檢測乙肝表面抗原，部分“大三陽”模式患者HBsAg濃度值升高到10 000以上，顯示當HBsAg濃度增加，HBV病毒載量的增加，前S1蛋白陽性率也增加。Ⅰ：HBsAg濃度值0.05～50；Ⅱ：HBsAg濃度值51～250；Ⅲ：HBsAg濃度值251～1 000；Ⅳ：HBsAg濃度值1 001～5 000；Ⅴ：HBsAg濃度值＞5 000。比較5組pre-S1陽性率，結(jié)果(表2)，HBsAg濃度值與pre-S1陽性率具有相關(guān)性，HBsAg濃度值越高，pre-S1陽性率越高。

2.3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較χ2＝54.55，P＜0.01(表3)。

表1 400例患者乙肝模式分布及pre-S1陽性率

表2 不同HBsAg濃度值的pre-S1陽性率

表3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較

3 討論

化學(xué)發(fā)光技術(shù)是一種新興的非放射免疫分析方法，其原理為化學(xué)發(fā)光技術(shù)和抗原-抗體的特異性反應(yīng)，具有靈敏度高、精密度高、廉價、快速等優(yōu)點，目前已經(jīng)在臨床上廣泛使用[5]。利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢出HBV pre-S1較ELISA法更加準確和敏感。

HBV pre-S1是急性HBV早期感染的重要標志，在患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高達到峰值之前，pre-S1已經(jīng)達到了較高的水平，甚至在HBV核酸檢出前就可檢測到[6]。臨床上常常將pre-S1作為急性HBV預(yù)后判斷的重要指標，pre-S1轉(zhuǎn)陰越早，提示患者預(yù)后越好。有研究表明[7]，亞病毒科里在HBV感染的過程中能夠增強細胞內(nèi)病毒的復(fù)制和其基因表達，而這被證明是pre-S蛋白反式激活觸發(fā)。除此之外，還有研究表明HBV包膜形成的過程需要HBsAg、pre-S1和pre-S2蛋白的參與[8]。

HBV HBsAg的濃度值能反映出HBV病毒的滴度，本研究中HBsAg濃度值與pre-S1陽性率呈正相關(guān)，在HBsAg濃度值＜250時，pre-S1蛋白陽性率相對較低，而當HBsAg濃度值＞250時，pre-S1陽性率顯著升高。本研究中，HBsAg濃度值＜250時pre-S1呈陽性患者多為HBeAg陽性，這表明HBV HBsAg濃度值與病毒載量具有一定的相關(guān)性，反映出pre-S1與HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制有關(guān)。

本研究中，HBeAg陰性時，仍有較高的pre-S1陽性率(76.10%)，這可能是由于HBV病毒仍然處于感染狀態(tài)，但其基因發(fā)生了變異，不能檢出HBeAg，因此HBV發(fā)生變異時，只測定HBeAg來判斷HBV復(fù)制水平不能反映出真實情況，這可能與HBV逃避機體免疫攻擊有關(guān)。因此pre-S1與HBeAg相比能夠更加準確地反映出患者體內(nèi)HBV的復(fù)制情況。

綜上所述，利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)測定HBsAg陽性HBV患者血清pre-S1蛋白對HBV早期感染的診斷、預(yù)后判斷和檢測病毒復(fù)制情況具有重要的臨床意義，且廉價易在臨床推廣。

[1]陳銀萍，吳愛萍，余亮科，等.組合模型對乙肝發(fā)病趨勢的預(yù)測研究[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2014，39(1)：52-56.

[2]楊笑瓊，何海洪，楊秀珠，等.ELISA法和MEIA法測定乙肝病毒血清標志物的比較研究[J].北方藥學(xué)，2014，11(2)：16-17.

[3]董運啟.乙型肝炎病毒前S1蛋白檢測的臨床價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(S1)：20-21.

[4]顧春瑜，許瓊，趙喬妹，等.化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測乙肝前S1蛋白的臨床價值[J].感染、炎癥、修復(fù)，2013，14(2)：107-109.

[5]李璐，邢文革.化學(xué)發(fā)光技術(shù)在HCV和HIV檢測中的應(yīng)用[J].中國艾滋病性病，2011，17(3)：382-284.

[6]黃啟強，黃麗慶，周曉蘭，等.乙型肝炎病毒前S1抗原與傳統(tǒng)標志物相關(guān)性分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(11)：1341-1343.

[7]張和平，林國躍，王萍，等.HBV前S-2蛋白檢測與HBV-DNA和乙肝二對半模式相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)綜述，2011，17(1)：139-140.

[8]楊晉榮，楊棟梁.HBeAg陰性HBV感染者不同病毒載量與前S1抗原和大蛋白關(guān)系研究[J].臨床合理用藥雜志，2011，4(33)：12-13.