帕提古麗·托乎提

黃曲霉毒素主要是黃曲霉素菌和寄生曲霉菌的代謝產(chǎn)物，廣泛存在于玉米、谷物、棉籽等農(nóng)作物和動(dòng)物飼料中，黃曲霉素菌和寄生曲霉菌污染糧食和飼料后，產(chǎn)生多種結(jié)構(gòu)相近的化合物統(tǒng)稱為黃曲霉素［1］。

目前發(fā)現(xiàn)的黃曲霉素有20多種，曲霉毒素是黃曲霉、寄生曲霉、特異曲霉和特溜曲霉4種產(chǎn)毒菌株的代謝產(chǎn)物。飼料在自然條件下污染的黃曲霉毒素主要包括B1，B2，G1和G2四種，B1最多，G1之次，B2和G2很少，B1毒性和致癌性最大。黃曲霉毒素B11993年被世界衛(wèi)生組織列為I類致癌物。一般B1含量作為評價(jià)飼料好壞的主要指標(biāo)［2］。

黃曲霉毒素M1是有牛、羊、豬等哺乳動(dòng)物食用被黃曲霉毒素B1污染的飼料后，在體內(nèi)經(jīng)過代謝后產(chǎn)生的，主要存在于動(dòng)物的乳汁、肝、腎、乳腺中，肉中殘留較少。黃曲霉毒素M1也是一種強(qiáng)毒致癌物，2002年被世界衛(wèi)生組織列為I類致癌物。

黃曲霉毒素Bl在奶牛體內(nèi)轉(zhuǎn)換為Ml，并分布在牛奶中，人若食用含有超標(biāo)黃曲霉毒素M1的牛奶后，能使人發(fā)生肝炎、肝癌，對人體健康造成傷害［1］。

在中國，牛奶中黃曲霉毒素Ml的國家標(biāo)準(zhǔn)限量為≤0.5ppb，并且要求相關(guān)部門嚴(yán)格檢測［4］。

隨著生鮮乳快速檢測技術(shù)的迅速發(fā)展，以安全、簡便、快速、準(zhǔn)確、敏感性高的檢測方法滿足日趨嚴(yán)格的生鮮乳快速檢測要求［3］。我們巴州畜產(chǎn)品安全檢驗(yàn)檢測部門開展黃曲霉毒素M1快速檢測試劑盒法檢測生鮮乳中黃曲霉毒素M1的檢測項(xiàng)目，給奶業(yè)監(jiān)督管理部門提供科學(xué)的檢測依據(jù)，以保障人們飲用衛(wèi)生、安全的牛奶很有必要性。

本文采用SNAP黃曲霉毒素M1快速檢測試劑盒法作為快速檢測法，檢測生鮮牛乳中黃曲霉毒素M1，現(xiàn)將檢測情況和結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器

美國安普生化科技有限公司生產(chǎn)的SNAP加熱器、美國安普生化科技有限公司生產(chǎn)的SNAP黃曲霉毒素M1快速檢測試劑盒和讀數(shù)儀。

1.2 試劑

檢測基質(zhì)：新鮮牛奶。

1.3 樣品的采集

2012年4月、9月和2013年6月分別對巴州轄區(qū)內(nèi)16個(gè)奶站的奶缸、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、生鮮乳運(yùn)輸車輛等每個(gè)環(huán)節(jié)分別抽33份、27份和22份生鮮乳樣品進(jìn)行抽樣檢測。對于所有奶站的奶缸、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、運(yùn)輸車輛針對性的抽16份生鮮乳樣品檢測黃曲霉毒素M1，按規(guī)定進(jìn)行冷藏保存運(yùn)輸，送實(shí)驗(yàn)室當(dāng)天進(jìn)行黃曲霉毒素M1檢測。

1.4 檢測項(xiàng)目

黃曲霉毒素Ml檢測項(xiàng)目。

1.5 操作方法

1.5.1 檢測前準(zhǔn)備 先預(yù)熱SNAP加熱器和黃曲霉毒素Ml檢測讀數(shù)儀開機(jī)。并將裝有黃曲霉毒素Ml檢測試劑盒從包裝中取出，待用；SNAP加熱器加熱到（45±5）℃；待檢測生鮮乳溫度要保持15～30℃之間，并按順序排好。調(diào)解加熱器加熱時(shí)間和反應(yīng)時(shí)間5min4min（黃曲霉毒素Ml反應(yīng)時(shí)間要求）。

1.5.2 檢測步驟 搖勻待測生鮮乳，從黃曲霉毒素Ml檢測試劑盒內(nèi)取出配套吸管，?。?50±50微升）標(biāo)準(zhǔn)線待測奶樣加入試劑瓶中，并搖勻試管徹底融化反應(yīng)試劑球，將樣品試管加入已預(yù)熱至（45±5）℃的加熱器中，孵化樣本5min。5min時(shí)間到了就將樣品試管中的樣本倒入SNAP試劑盒樣品孔中，樣本經(jīng)過反應(yīng)窗流向反應(yīng)激活環(huán)。當(dāng)綠色反應(yīng)環(huán)快要退色時(shí)，用力按下反應(yīng)激活鍵至其與SNAP試劑盒平齊，能聽到清脆的按扣聲，按反應(yīng)鍵，等候4 min。4min反應(yīng)時(shí)間到，取下來SNAP試劑盒，在讀數(shù)儀下調(diào)好快速讀數(shù)→抗生素類→讀數(shù)。必須在反應(yīng)結(jié)束10min內(nèi)讀完。讀數(shù)儀讀數(shù)≤1.05，檢測結(jié)果為陰性；讀數(shù)儀讀數(shù)＞1.05，檢測結(jié)果為陽性；還要注意看試劑盒參照點(diǎn)和樣品點(diǎn)顏色變化深淺度，樣品點(diǎn)顏色深于或等于叁照點(diǎn)，結(jié)果為陰性；樣品點(diǎn)顏色淺于叁照點(diǎn)，結(jié)果為陽性。如果參照點(diǎn)顏色無變化，需重新檢測樣品，測得的陽性樣品需用定量法進(jìn)一步確認(rèn)。

2 結(jié)果

我們對巴州轄區(qū)內(nèi)16個(gè)奶站的奶缸、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、運(yùn)輸車輛等進(jìn)行了代表性的抽樣檢測16份生鮮牛乳樣品，進(jìn)行黃曲霉毒素M1檢測，檢測結(jié)果詳見表1。

表1 黃曲霉毒素Ml抽樣檢測結(jié)果表

3 討論

1）從表1可以看出，生鮮乳樣品中，代表性的檢測了16份生鮮乳樣品進(jìn)行了黃曲霉毒素M1檢測項(xiàng)目，16份樣品全部為陰性，未檢出黃曲霉毒素M1，合格率為100%。說明16個(gè)奶站的奶站、養(yǎng)殖小區(qū)、運(yùn)輸車輛等每個(gè)環(huán)節(jié)生鮮乳樣品中未檢出黃曲霉毒素M1。

2）SNAP檢測試劑盒便于攜帶且裝置完備?？梢噪S時(shí)隨地進(jìn)行測試，無論奶站、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、奶糟、奶缸、運(yùn)輸車輛何時(shí)何地均可立即檢測。

3）SNAP檢測試劑盒能夠在不到10min內(nèi)提供結(jié)果。無需任何測量試劑，是大批量檢測的理想選擇。

4）SNAP檢測試劑盒適用于奶站、乳制品企業(yè)、畜產(chǎn)品安檢部門。

［1］馬建利.奶牛場黃曲霉毒素的防控［J］.中國奶牛，2013，31（10）：41－42.

［2］武向山.規(guī)?；膛鳇S曲霉毒素污染的控制［J］.中國奶牛，2013，31（10）：43－44.

［3］孫建國，蘭 芳，等.生鮮牛乳中β－內(nèi)酰胺酶快速檢測報(bào)告［J］.中國牛業(yè)科學(xué)，2012，38（5）：43－44.

［4］梅文華，葉萬榮.影響動(dòng)物性食品安全的因素分析與控制建議［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2005，35（2）：39－40.