仲照希，楊鴿，呂路線

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院早期干預(yù)二科，新鄉(xiāng) 453002)

艾司西酞普蘭對首發(fā)抑郁患者血清bFGF和VEGF及MMP-9的影響*

仲照希，楊鴿，呂路線

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院早期干預(yù)二科，新鄉(xiāng) 453002)

目的 探討艾司西酞普蘭對首發(fā)抑郁患者血清堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平的影響及其與臨床特征間的關(guān)系。方法 43例首發(fā)抑郁患者設(shè)為治療組，口吸取艾司西酞普蘭，開始劑量為5 mg·d-1，劑量范圍10～20 mg·d-1，治療6周。采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)方法檢測43例抑郁患者艾司西酞普蘭治療前及治療4周后bFGF、VEGF、MMP-9水平。37例健康人設(shè)為對照組；采用漢密爾頓抑郁量表24項(HAMD-24)、漢密爾頓焦慮量表(HMMA)評定治療前及治療4周后的抑郁、焦慮癥狀。結(jié)果 治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前分別為(13.59±3.75)，(258.80±63.34)，(218.32±56.90) pg·mL-1，治療后分別為(14.23±4.35)，(259.76±66.45)，(209.71±55.26) pg·mL-1，對照組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平為(10.53±3.38)，(235.49±54.72)，(159.13±52.78) pg·mL-1，治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前及治療4周后差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療組不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療組HAMD-24及HAMA治療前分別為(34.65±7.97)及(14.61±5.54)分，治療后分別為(19.88±3.85)及(8.34±2.79)分。血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁患者的病情輕重?zé)o明顯的相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論 bFGF、VEGF、MMP-9可能參與抑郁發(fā)作的病理生理機制。

艾司西酞普蘭；抑郁癥；堿性成纖維細胞生長因子；血管內(nèi)皮細胞生長因子；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

抑郁癥是一種高患病率、高自殺率、高疾病負擔(dān)的嚴重精神疾病，其病因研究涉及遺傳、神經(jīng)生化、病理生理、影像學(xué)等多個領(lǐng)域，但其確切病因及病理機制目前仍不明確。血管形成發(fā)生于機體的多種重要的生理病理過程，如胚胎形成、損傷愈合、腫瘤及炎癥等。血管形成過程與多種細胞因子協(xié)同作用有關(guān)，如堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelial-growth factor，VEGF)、血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)等，這種相互作用的結(jié)果促進血管的形成[1]。這些因子與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系目前已成為臨床研究的熱點之一。初步研究表bFGF、VEGF、MMP可能被作為研究癲、血管性認知障礙、阿爾茨海默病、帕金森綜合征等中樞神經(jīng)系統(tǒng)病情狀態(tài)、程度和預(yù)后的指標，有重要的臨床價值[2-6]。這些因子與抑郁癥的發(fā)病有何關(guān)系，藥物治療對其有何影響？此類研究國內(nèi)外尚少，且結(jié)論不一致。本研究探討首發(fā)抑郁患者艾司西酞普蘭治療前、后血清bFGF、VEGF、MMP-9水平變化及與臨床特征間的關(guān)系，為抑郁癥的病理生理機制提供線索。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 治療組為新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院住院的患者，入組時間為 2013年5月—2014年2月。入組標準：①符合《疾病和有關(guān)健康問題的國際統(tǒng)計分類》第10次修訂本(ICD-10)抑郁癥的診斷標準，患者首次發(fā)病，漢密爾頓抑郁量表(Hamilton depression scale，HAMD)17項版本評分≥18分；②年齡 16～45歲；③總病程≤5年；④入組前14 d未服用過抗抑郁藥，且既往連續(xù)服用抗抑郁藥時間≤14 d；⑤患者或家屬簽署知情同意書。排除標準：①并發(fā)腦器質(zhì)性疾病及腦外傷；②合并嚴重軀體疾病；③并發(fā)其他類型精神疾患；④尿妊娠試驗陽性和哺乳期女性；⑤服用抗氧化藥或神經(jīng)營養(yǎng)類藥物；⑥入組前2周未用過其他抗抑郁藥，如用過則需2周清洗期，清洗期末進行HAMD評定。共入組患者43例，男21 例，女22 例；年齡16～45歲，(26.33±8.19)歲；發(fā)病年齡16～44 歲，平均(25.21±8.05)歲，總病程1～30個月，平均(9.06±7.12)個月； HAMD-24總分(34.65±7.97)分，漢密爾頓焦慮量表 (Hamilton anxiety scale，HAMA)癥狀(14.61±5.54)分；患者體重指數(shù)(body mass index， BMI)為(22.06±3.19) kg·(m2)-1。對照組來自新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院的身體健康職工及新鄉(xiāng)市的身體健康居民，無精神疾病和其他遺傳性疾病家族史，非妊娠或哺乳期女性，年齡與性別比與患者組匹配。共 37例，男20 例，女17例，年齡16～45 歲，(27.77±7.34)歲；對照組BMI(22.91±3.88)kg·(m2)-1。兩組在性別比(χ2=0.49 )、年齡(t=0.95)、BMI(t=1.62)均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本試驗研究通過新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審查，所有患者家屬及對照組簽署知情同意書。

1.2 治療方法 治療組口服艾司西酞普蘭 (商品名：來士普，西安楊森制藥公司， 批準文號：國藥準字J20100165)，開始劑量為5 mg·d-1， 劑量范圍10～20 mg·d-1。治療 6周。研究期間若出現(xiàn)失眠，可于晚間口服少量苯二氮類藥物改善睡眠，但禁用其他抗抑郁藥物和抗精神藥物或電休克治療。

1.3 量表評定 HAMD-24可歸納為焦慮/軀體化、體質(zhì)量、認知障礙、情緒節(jié)律(日夜)變化、阻滯、睡眠障礙、絕望感等7個因子?？偣?4項，總分96分，<8分視為患者沒有抑郁癥狀，8～<20分，可能有抑郁，20～<35分，肯定有輕或中等度的抑郁，≥35分，為嚴重抑郁。HAMA分為軀體性和精神性焦慮兩個因子?？偣?4項，總分56分，10～<14分，可能有焦慮，14～<21分，肯定有焦慮，21～<29分，肯定有明顯焦慮，≥29分，為嚴重焦慮。量表由2名經(jīng)過訓(xùn)練的精神科高年資醫(yī)師評定，一致性測定Kappa>0.89。

1.4 收集標本 所有入組者均在早晨6：30—7：30經(jīng)肘靜脈取血5 mL，后立即分離血清，-20 ℃冰箱保存，測定前置于室溫或冷水中復(fù)融，混勻，4 ℃，3 000 r·min-1(有效離心半徑10 cm)離心 5 min，取血清待測定。

1.5 觀察指標

1.5.1 bFGF測定 采用R&GSystems公司生產(chǎn)的人重組bFGF Sandwich酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immuno-sorbent assay,ELISA)藥盒靈敏度為1 pg·mL-1?？谷薭FGF單克隆抗體包被的酶標板孔加入稀釋液后加入bFGF標準品及待檢血清孵育，洗滌后加入辣根過氧化物酶標記的抗人bFGF單克隆抗體加底物顯色液。用Bio -Rad3550型酶標儀測定波長450 nm的吸光度(A)值，繪制標準曲線，計算出血清bFGF含量。

1.5.2 VEGF測定 采用ELISA法，將純化的VEGF抗體包被微孔板，制定固相抗體，將血清標本原加入包被單抗的微孔中，然后與辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)標記的 VEGF 抗體結(jié)合，加底物顯色，用酶標儀測定吸光度(A值)，經(jīng)計算得出實際濃度。

1.5.3 MMP-9測定 采用雙抗體一步夾心法ELISA試驗。往預(yù)先包被MMP-9抗體的包被微孔中依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，溫育60 min并徹底洗滌。 用底物TMB顯色，TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的MMP-9呈正相關(guān)。 用酶標儀在波長450 nm下測定A值，計算樣品濃度。

2 結(jié)果

2.1 血清bFGF、VEGF、MMP-9水平 治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前后比較均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)，但均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

與對照組比較，t為2.05～2.46，*1P<0.05

2.2 不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平 治療組男性血清bFGF、VEGF、MMP-9水平分別為(13.78±1.32)，(258.67±63.12)，(218.98±16.37) pg·mL-1，女性為(13.16±1.97)，(259.86±66.52)，(10.38±2.56) pg·mL-1，對照組男性血清bFGF、VEGF、MMP-9水平分別為(10.38±2.56)，(235.98±20.20)，(158.98±14.45) pg·mL-1，女性為(10.68±3.21)，(235.09±20.98)，(159.31±14.08) pg·mL-1，兩組不同性別對比均差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P>0.05)。

2.3 治療組治療前、后HAMD-24、HAMA評分 治療組HAMD-24及HAMA治療前分別為(34.65±7.97)，(14.61±5.54)分，治療后分別為(19.88±3.85)，(8.34±2.79)分， 治療組治療前后差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.09，4.62，P<0.05)。

2.4 治療組HAMD-24、HAMA評分與血清bFGF、VEGF、MMP-9的相關(guān)分析 通過Pearson相關(guān)分析顯示，治療組治療前后HAMD-24、HAMA評分與血清bFGF、VEGF、MMP-9水平無明顯的相關(guān)性(P>0.05)。

3 討論

抑郁癥的病因至今未明，最被廣泛接受的包括遺傳、中樞神經(jīng)遞質(zhì)假說和應(yīng)激理論等。當前有部分研究著重于抑郁癥的細胞及分子生物學(xué)機制，腦神經(jīng)元再生障礙及應(yīng)激所造成的海馬等區(qū)域的神經(jīng)元損傷是其中熱點，尤其是神經(jīng)營養(yǎng)的假說，該假說認為腦部的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子水平降低會導(dǎo)致抑郁，而抗抑郁治療通過提高海馬水平發(fā)揮抗抑郁作用，包括血管內(nèi)皮生長因子、成纖維細胞生長因子等其他神經(jīng)營養(yǎng)因子或生長因子可能也參與抑郁癥的病理生理過程及治療機制[7-8]。

bFGF具有促進中胚層及神經(jīng)外胚層細胞增殖的堿性多肽，它作為重要的創(chuàng)傷愈合因子，參與體內(nèi)多種組織創(chuàng)傷修復(fù)過程，它還與一些細胞的趨化性相關(guān)，通過改變細胞的趨化性，誘導(dǎo)或抑制細胞特殊蛋白的合成或分泌，從而調(diào)節(jié)內(nèi)分泌或神經(jīng)功能。bFGF在腦內(nèi)的分布隨發(fā)育而變，刺激神經(jīng)元祖細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的有絲分裂和分化，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)形成中扮演重要角色[9]。

VEGF是血管發(fā)生和神經(jīng)營養(yǎng)因子，在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域具有重要的作用。在另外的小樣本研究中發(fā)現(xiàn)，無論是未經(jīng)藥物治療的抑郁癥患者與正常對照組比較，或是藥物治療前后無明顯癥狀變化的患者，其血清水平均未發(fā)現(xiàn)顯著相關(guān)性[10-11]。

MMPs是蛋白酶超家族，可由正常組織細胞、炎癥細胞或腫瘤細胞等多種細胞合成分泌，其主要功能為降解細胞外基質(zhì)成分，對基質(zhì)重構(gòu)有重要意義，是重要的炎癥因子，參與血管重構(gòu)和再生過程。MMP-9(明膠酶B)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的關(guān)系密切，成為神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的熱點[12]。MMP-9可以直接引起神經(jīng)元損傷，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑有神經(jīng)保護作用。近年尚未出現(xiàn)有關(guān)MMP與抑郁癥的相關(guān)性研究。因此本試驗選取MMP-9作為基質(zhì)金屬蛋白酶的代表進行研究。

艾司西酞普蘭是一種高度選擇性5-羥色胺再攝取抑制藥，它對其他受體親和力低下或無作用，因此不良反應(yīng)發(fā)生率很低，耐受性良好，具有良好的抗焦慮、抗抑郁的作用[11]。

本研究結(jié)果顯示，首發(fā)抑郁患者與健康對照者的血清bFGF、VEGF、MMP-9水平，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析差異有統(tǒng)計學(xué)意義，首發(fā)抑郁患者血清bFGF、VEGF、MMP-9水平高于健康對照者，這提示血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁發(fā)病有一定的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與治療組HAMD-24、HAMA評分之間無相關(guān)關(guān)系。這提示血清bFGF、VEGF水平變化可能是抑郁發(fā)病的保護因素，MMP-9可能是抑郁發(fā)病的促進因素，但其程度尚不是抑郁患者病情輕重的指標，艾司西酞普蘭治療4周尚不能明顯影響其水平。治療組與對照組男女不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平未發(fā)現(xiàn)有明顯差異，表明抑郁癥在形成和進展過程中是多種因素作用的結(jié)果。

目前為止，關(guān)于血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁癥的關(guān)系研究比較少，且結(jié)果亦不完全一致，考慮原因在于性別、年齡/檢測方法、病例組成及樣本含量等的差異所致。本研究首次在首發(fā)的抑郁患者中進行血清bFGF、VEGF、MMP-9水平的研究，并分析了抗抑郁藥物的影響。本研究仍存在一些局限和困惑：外周狀況只是間接證據(jù)，然而由于中樞樣本獲得困難，研究開展受限；作為血管形成過程中的重要細胞因子——bFGF、VEGF、MMP-9對于長發(fā)育和損傷修復(fù)均有積極作用，但為何在本研究中首發(fā)抑郁患者中血清bFGF、VEGF、MMP-9水平均高于正常人，三者之間有何聯(lián)系，抗抑郁藥物對其有何影響。由于本研究樣本量較小，且僅觀察治療前、后短期的水平，bFGF、VEGF、MMP-9水平異常到底是一種素質(zhì)因素還是狀態(tài)指標，其水平變化與抗抑郁藥物是否相關(guān)，均需要進一步研究。盡管如此，本研究結(jié)果仍提示bFGF、VEGF、MMP-9可能對抑郁癥的發(fā)生有一定影響，尚需要更多的實驗來探討bFGF、VEGF、MMP-9在抑郁癥中的作用。

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2014-11-17

2014-12-29

*河南省科技廳項目(132300413216)

仲照希(1978-)，男，河南駐馬店人，主治醫(yī)師，博士，研究方向：精神疾病免疫學(xué)研究。電話：(0)13849372081，E-mail：1252714532@qq.com。

呂路線(1958-)，男，河南滑縣人，主任醫(yī)師，博士，從事精神科診治工作。電話：(0)18537339275，E-mail：llxllx1223@163.com。

R97143；R749.41

B

1004-0781(2015)10-1308-04

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.10.012