■黎宗寶 陳海浪 王學(xué)梅
(海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院,海南???570228)
隨著人們生活質(zhì)量和對(duì)食品安全的關(guān)注度的提高,綠色飼料添加劑的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用越來(lái)越受到重視。有機(jī)酸作為綠色飼料添加劑,因具有無(wú)殘留、無(wú)抗藥性、無(wú)毒副作用,添加量少等優(yōu)點(diǎn)[1]而越來(lái)越受歡迎。有研究表明:在雞日糧中添加復(fù)合有機(jī)酸,可降低消化道的pH值、改善腸道微生態(tài)環(huán)境、提高機(jī)體免疫力和日糧養(yǎng)分的利用率,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化率[2-3]。金曉君等(2011)研究表明:有機(jī)酸有提高肉雞日糧蛋白、干物質(zhì)、鈣和磷的表觀代謝率的作用[4]。文昌雞作為海南優(yōu)良的地方雞品種,有關(guān)有機(jī)酸制劑應(yīng)用研究少見(jiàn)報(bào)道[5]。本試驗(yàn)在文昌雞飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸研究其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和血液理化指標(biāo)的影響,為復(fù)合有機(jī)酸在文昌雞生產(chǎn)上的利用提供試驗(yàn)依據(jù)。
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
試驗(yàn)在海南大學(xué)校內(nèi)實(shí)習(xí)基地進(jìn)行,選取健康、體況正常、個(gè)體均勻的7周齡的文昌雞共48只。公母比例為1∶1,平均體重約為(655.4±79.6)g。
1.1.2 添加劑
本試驗(yàn)所用有機(jī)酸為意大利亞士可化工大藥廠生產(chǎn),主要成分:每千克含150.00 mg延胡索酸、100.00 mg檸檬酸、125.00 mg乳酸、75.00 mg蘋(píng)果酸。
1.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧組成
采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理。其中對(duì)照組飼喂全價(jià)商品飼糧(由海南恒興飼料公司提供),試驗(yàn)組是在對(duì)照組的基礎(chǔ)上添加不同水平的有機(jī)酸,添加量分別為0.25%、0.5%,每組4個(gè)重復(fù),每重復(fù)4只雞。飼料配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
試雞采用籠上飼養(yǎng),飼喂粉料,自由采食、自由飲水,自然光照通風(fēng),常規(guī)免疫。試驗(yàn)為期10 d后(喂料量每重復(fù)200 g/d),其中預(yù)飼期6 d,正式代謝試驗(yàn)2 d,代謝試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行血液采集。
表1 飼料配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.3.1 糞樣采集與處理
代謝試驗(yàn)采用肛門(mén)全收糞法,預(yù)飼期結(jié)束后開(kāi)始收集糞尿混合物,每天早上8:00和下午5:00各收集一次,共收集48 h,每次取所收糞樣的10%添加10%的鹽酸攪拌均勻后放入70℃的烘箱中烘干,粉碎,備用。
1.3.2 血液采集與處理
以重復(fù)為單位,代謝試驗(yàn)結(jié)束后試雞在早上空腹從翅靜脈采血。每組試驗(yàn)雞采血約5 ml置于干凈的試管內(nèi),傾斜靜置,常溫下制備血清。待血清滲出后,迅速以3 000 r/min離心10 min,取上清液,置于-20℃冰箱保存待測(cè)。
1.4.1 常規(guī)養(yǎng)分
飼料和糞樣中粗脂肪(GB/T 6433—1994)、粗纖維(GB/T 6434—2006)、鈣 (GB/T 6436—2002)、磷 (GB/T 6437—2002)、干物質(zhì)(GB/T 6435—2006)、粗灰分(GB/T 6438—2007)的測(cè)定采用常規(guī)方法,具體參照楊勝(1993)主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》中的相應(yīng)方法[6]。
1.4.2 血液理化指標(biāo)
血清白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、鈣(Ca)、磷(P)、pH值,采用試劑盒測(cè)定,試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。
血清pH值用pH計(jì)測(cè)定;血清中的鈣用甲基百里香酚藍(lán)比色法測(cè)定;磷采用磷鉬酸法測(cè)定;尿酸采用磷鎢酸法測(cè)定;白蛋白采用溴甲酚綠比色法測(cè)定;總膽固醇采用酶偶聯(lián)比色法測(cè)定;甘油三酯采用酶偶聯(lián)比色法測(cè)定。
糞樣中有機(jī)物、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣和磷的表觀利用率分別依據(jù)下列公式計(jì)算:
某養(yǎng)分表觀代謝率(%)=(某養(yǎng)分?jǐn)z入量-糞尿某養(yǎng)分排出量)/某養(yǎng)分?jǐn)z入量×100。
數(shù)據(jù)采用SAS軟件包(8.0版)進(jìn)行方差分析,用Duncan's法進(jìn)行多重比較。測(cè)定結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
表2 飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的影響(%)
從表2可見(jiàn),飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率無(wú)明顯影響(P>0.05)。其中,與第Ⅰ組(對(duì)照組)比較,第Ⅱ組和第Ⅲ組的文昌雞對(duì)飼糧中粗灰分和磷的表觀利用率有所提高;第Ⅲ組的文昌雞對(duì)飼料中鈣的表觀利用率比第Ⅰ組有所提高,但差異不顯著(P>0.05);各組間其他指標(biāo)差異均不顯著(P>0.05)。本試驗(yàn)結(jié)果表明:飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率沒(méi)有明顯的影響。
表3 飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞血液理化指標(biāo)的影響
由表3可以看出,復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞血液理化指標(biāo)的影響不大,各組血液理化指標(biāo)之間差異不顯著(P>0.05)。其中隨著復(fù)合有機(jī)酸添加量的增多,血清甘油三酯水平有降低趨勢(shì)。
大多數(shù)研究表明,飼料中添加有機(jī)酸制劑可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。王盼盼等(2013)研究表明:添加0.5%有機(jī)酸有提高三黃雞飼糧粗蛋白和粗脂肪表觀代謝率的趨勢(shì),且能顯著提高鈣的表觀代謝率[7]。李萬(wàn)軍(2012)和程金榮等(2011)的研究結(jié)果也表明,在肉仔雞飼糧中添加酸化劑,可以顯著提高飼糧蛋白質(zhì)、能量、干物質(zhì)、鈣和磷的表觀利用率[8-9]。本試驗(yàn)利用文昌雞的研究結(jié)果表明,飼糧中添加0.25%和0.5%的復(fù)合有機(jī)酸對(duì)有機(jī)物、干物質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、粗蛋白表觀代謝率沒(méi)有明顯的改善,對(duì)飼糧鈣、磷利用率有改善作用,但差異不顯著(P>0.05)。朱碧泉等(2007)研究復(fù)合有機(jī)酸對(duì)肉雞的營(yíng)養(yǎng)生理效應(yīng)時(shí)表明,飼糧添加有機(jī)酸可改善肉雞1~21日齡日糧的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、有機(jī)物和能量的利用率。在21~42日齡期間添加有機(jī)酸對(duì)飼糧干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)物和能量利用率無(wú)明顯改善作用[10]。朱碧泉等(2007)在不同種類(lèi)有機(jī)酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分利用率和腸道菌群的影響研究也有相似的報(bào)道[11]。本試驗(yàn)結(jié)果可能是由于試驗(yàn)文昌雞日齡較大,消化系統(tǒng)發(fā)育逐步完善,胃內(nèi)酸度和胃蛋白酶活性的提高,使復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞的消化作用效果減弱。羅四維(2010)對(duì)肉仔雞的研究也說(shuō)明同樣的問(wèn)題[12]。
血液理化指標(biāo)的變化反映了動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的代謝及生理機(jī)能表征,反映了機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)健康狀況。白蛋白(ALB)是總蛋白的組成之一,由肝臟合成,具有維持正常血漿滲透壓、傳遞小分子物質(zhì)、保護(hù)球蛋白的功能[13]。同時(shí),ALB含量也反映肝臟的代謝狀況[14]。ALB的變化不僅反映動(dòng)物機(jī)體的一些病理狀態(tài),也反映了動(dòng)物機(jī)體的代謝水平,動(dòng)物在正常狀況下血清中的白蛋白的含量保持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),當(dāng)肝臟或腎臟患病時(shí),血清白蛋白的含量就會(huì)降低。本試驗(yàn)結(jié)果表明:添加不同劑量的復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞血清中的ALB含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。UA是禽類(lèi)的主要排氨形式,它是由蛋白質(zhì)和核酸降解生成。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分解代謝增高時(shí),UA含量就會(huì)升高,因此UA含量高低可很大程度上反映機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)利用狀況,UA含量越低表明機(jī)體氮的利用效果越高,體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積量越大。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞血清中的UA含量無(wú)顯著影響,說(shuō)明本試驗(yàn)添加劑量下的復(fù)合有機(jī)酸沒(méi)有提高氮的利用率以及增加體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積量。
血清總膽固醇、甘油三酯水平是反映動(dòng)物體內(nèi)脂類(lèi)代謝功能正常與否的兩個(gè)重要指標(biāo)。尹靖東等(2000)研究報(bào)道,脂肪組織發(fā)育和脂肪沉淀均受血漿甘油三酯水平的影響[15]。高密度脂蛋白(HDL)主要是由肝臟和小腸合成,它們能清除存在于肌肉組織細(xì)胞中的膽固醇,從而確保體內(nèi)膽固醇的穩(wěn)定。本試驗(yàn)復(fù)合有機(jī)酸在添加劑量下對(duì)文昌雞血清中總膽固醇、甘油三酯無(wú)顯著影響(P>0.05),但對(duì)血清中甘油三酯水平有降低趨勢(shì)。結(jié)果說(shuō)明日糧中添加復(fù)合有機(jī)酸能夠加速機(jī)體脂肪的代謝,減少脂肪的沉淀。
血液pH值是動(dòng)物體內(nèi)重要的酸堿平衡之一,動(dòng)物血液pH值在一個(gè)小的范圍內(nèi)變動(dòng),當(dāng)血液pH值發(fā)生巨大的變化時(shí),機(jī)體內(nèi)的緩沖系統(tǒng)就不能保持血液pH值的穩(wěn)定,就會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體發(fā)生血液循環(huán)障礙,導(dǎo)致機(jī)體中毒。本試驗(yàn)在日糧中添加有機(jī)酸并沒(méi)有大范圍改變文昌雞血液pH值,仍維持穩(wěn)定狀態(tài)。孫喜偉等(2009)研究結(jié)果表明:酸化劑能降低雪山草雞血清中的pH值,提高血清中的Ca,對(duì)磷無(wú)顯著影響[16]。本試驗(yàn)中在文昌雞日糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)血清pH值、鈣和磷都無(wú)顯著影響,說(shuō)明經(jīng)過(guò)短時(shí)間飼喂復(fù)合有機(jī)酸對(duì)文昌雞鈣、磷礦物質(zhì)吸收無(wú)促進(jìn)作用。有機(jī)酸在動(dòng)物生產(chǎn)上應(yīng)用效果受有機(jī)酸種類(lèi)、動(dòng)物品種、生理狀態(tài)、年齡、日糧類(lèi)型及飼養(yǎng)期長(zhǎng)短等多種因素的影響;另外,關(guān)于有機(jī)酸在文昌雞生產(chǎn)上的應(yīng)用研究較少,因此,深入系統(tǒng)地研究有機(jī)酸制劑對(duì)文昌雞消化生理、健康及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用等具有重要的指導(dǎo)意義。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧中添加復(fù)合有機(jī)酸對(duì)7周齡文昌雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率和血液理化指標(biāo)均無(wú)明顯影響。