■ 郭小云 吳 信， 謝春艷 李 彪周慧琦 姚 娟 印遇龍 ，3

(1.南昌大學食品科學與技術國家重點實驗室南昌大學生命科學與食品工程學院，江西南昌 330031；2.中國科學院亞熱帶農業(yè)生態(tài)研究所中國科學院亞熱帶農業(yè)生態(tài)過程重點實驗室湖南省畜禽健康養(yǎng)殖工程技術中心，湖南長沙 410125；3.湖南農業(yè)大學動物科技學院，湖南長沙 410128；4.安琪酵母股份有限公司湖北省酵母功能重點實驗室，湖北宜昌 443003)

血漿蛋白粉（SDPP）作為一種高檔原料在早期斷奶仔豬（21日齡左右）日糧中被廣泛應用[1-2]。試驗表明，在飼糧中用血漿蛋白粉替代魚粉、奶粉、乳清等，取得了良好的效果[3]，能增加仔豬的采食量、提高日增重、降低腹瀉率、緩解斷奶和環(huán)境的應激作用、增強仔豬對疾病的抵抗力，提高仔豬的成活率[4-5]。但是我國飼料用血漿蛋白粉主要依靠進口，價格昂貴。而且近年來，由于SDPP的生物安全、國外貨源不穩(wěn)定以及國內血漿蛋白粉質量良莠不齊等問題，給飼料行業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)帶來了成本和安全等方面的諸多壓力。

酵母水解物（Yeast extract，YE）是酵母經酶解破壁干燥而成，富含氨基酸、小肽、核酸/核苷酸、維生素等物質。其中蛋白質含量為35%～50%、氨基酸含量30%以上，核酸類物質8%以上、碳水化合物含量為35%～40%、脂質含量為2.8%～3.0%。而且含有的多肽和氨基酸及某些風味強化物質5'-核苷酸，這些物質能夠給食品提供較好的誘食性特征，另外，酵母水解物也含有天然的谷氨酸鹽。有文獻報道飼喂含酵母抽提物的日糧能促進仔豬生長，顯著改善仔豬飼料的轉化率[6]。因此，YE可增強斷奶仔豬對疾病的抵抗力、緩解仔豬的斷奶應激[7]。

本試驗目的在于進一步研究YE替代SDPP對早期斷奶仔豬生長性能、血液生理生化指標和激素水平以及腸道黏膜形態(tài)的影響，為其成分的改進提供科學依據和參考，并為其推廣應用提供支撐。

1 試驗動物與材料

1.1 試驗設計與試驗動物

選取21日齡的杜×長×大三元雜交早期斷奶仔豬10欄，按母豬胎次和平均體重相近似的原則隨機分成2組，每組5個重復。

1.2 試驗日糧與材料

試驗日糧選用深圳比利美英偉集團的乳豬飼料做為基礎日糧（基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1），分別添加3%血漿蛋白粉和3%谷氨酸和核苷酸強化的酵母水解物日糧[8]。谷氨酸和核苷酸強化的酵母水解物由安琪酵母股份有限公司生產。

1.3 飼養(yǎng)管理

日常管理按豬場常規(guī)飼養(yǎng)管理進行，斷奶仔豬購進試驗場后，開始飼喂過渡日糧（基礎日糧），試驗開始后飼喂試驗日糧，自由采食，自由飲水。試驗期14 d，試驗開始和第14 d時稱重；試驗期間每周早上8:00結料，統(tǒng)計日采食量；記錄腹瀉發(fā)生情況。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平

于試驗第14 d時（35日齡），仔豬空腹12 h后，每欄選取1頭取前腔靜脈采血5 ml，置于普通離心管中，靜置30 min，3 500 r/min離心10 min，收集血清，置于-20℃保存待測。然后屠宰取樣，取出空腸段、并對肝臟和腎臟器官稱重。

1.4 試驗方法及測定指標

1.4.1 仔豬生長性能

記錄每日每圈試驗豬飼糧的供給量及剩余量，以測定仔豬生產性能，包括平均日采食量（ADFI），平均日增重（ADG），根據仔豬的ADFI和ADG計算料重比（F/G）；每天觀察試豬腹瀉情況，1頭試豬腹瀉1 d記為1次腹瀉。

腹瀉率（%）=[試驗期內腹瀉頭數/（試驗天數×試驗頭數）]×100[9]。

1.4.2 血清生理生化指標

血清樣品4℃解凍后，取250 μl用CX4型全自動生化分析儀(美國Beckman公司)測定血清生理生化指標：堿性磷酸酶（ALP）、血清葡萄糖（GLU）、總蛋白（TP）、膽固醇（CHO）、乳酸脫氫酶（LDH）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、血清尿素氮（BUN）。相關生化測定試劑盒購于北京利德曼生化股份有限公司。用酶聯免疫吸附法（ELISA）在全自動酶標儀（美國Bio-Tek Instuments INC.）上測定血清激素濃度，ELISA試劑盒購于CUSABIO BIOTECH CO.,LTD。

1.4.3 血清激素水平

采用放射免疫法(RIA)測定血清中胰島素、三碘甲狀腺素（T3）、四碘甲狀腺素（T4）和皮質醇水平。放射免疫試劑盒均購自北京解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放射免疫研究所。

1.4.4 腸道組織學相關指標

空腸組織切片的制備：2 cm的空腸段經冰凍生理鹽水輕輕沖洗后用濾紙吸干水分，浸入到10%的中性福爾馬林溶液中固定，72 h后取出。將固定的樣本經沖洗、脫水、透明、浸蠟、包埋等處理后切片，每段縱切各6張，厚度為5 μm，蘇木精-伊紅染色，中性樹膠封固。制備腸道組織切片。參照Phillips等[10]的方法觀察測定，每張切片選取10根最長，且走向平直、伸展良好的絨毛，采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)作定量分析，測量其絨毛高度及與之相連的隱窩深度，各指標取其平均數作為測定數據。

絨毛高度（VH）：從絨毛頂端至隱窩開口處的垂直距離[5]；

隱窩深度（CD）：從隱窩開口至隱窩基部的垂直距離[5]；

絨毛高度/隱窩深度比值（V/C值）。

1.5 統(tǒng)計分析

試驗數據經Excel2003初步整理后用SPSS17.0的獨立樣本T檢驗進行統(tǒng)計分析，數據以“平均數±標準誤”表示，以P＜0.05作為差異顯著的判斷標準。

2 結果與分析

2.1 仔豬生長性能和腹瀉率（見表2）

表2 仔豬生長性能和腹瀉率

由表2可知，SDPP組和YE組的ADFI、ADG、F/G、器官指數和腹瀉率均差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 仔豬血清生化指標（見表3）

表3 SDPP與YE對仔豬血清生理生化指標的影響

從表3可知，SDDP和YE組各項生理生化指標差異均不顯著（P＞0.05）。

2.3 血清激素水平(見表4)

表4 SDPP與YE對仔豬血清激素水平的影響

由表4可知，與SDPP組相比，YE組仔豬血清的T3含量顯著提高（P＜0.05），胰島素、T4和皮質醇含量均差異不顯著（P＞0.05），但飼喂YE后，皮質醇含量降低了15.13%。

2.4 腸道組織學相關指標（見表5）

表5 SDPP與YE對仔豬腸道形態(tài)（空腸）的影響

由表5可知，與SDPP組相比，YE組仔豬空腸段的隱窩深度降低，且差異顯著（P＜0.05），絨毛高度和V/C值均差異不顯著（P＞0.05），但飼喂YE后，仔豬空腸的V/C值提高了24.10%。

3 討論

斷奶應激過強可能會影響仔豬終生的生長性能，斷奶期間發(fā)病率和死亡率都會上升。與SDPP相比，YE對仔豬的生長性能和血清生化指標均無顯著性差異。與文獻報道的SDPP完全被YE替代后不影響仔豬的生長性能和其胃腸道發(fā)育[11]結果相符。

本試驗所用的YE除了富含多種必需氨基酸外，還含有豐富的核酸和核苷酸。研究表明，核苷酸能顯著降低腹瀉率，改善仔豬腸道形態(tài)[12]；Superchi等研究也發(fā)現額外補充核苷酸顯著降低了仔豬斷奶后的皮質醇激素水平進而緩解斷奶應激[13]，與本試驗結果一致。

甲狀腺在動物體內是一個很重要的內分泌器官，由他分泌的T3和T4是保證機體維持正常生理機能的重要激素，而且對生長發(fā)育、物質和能量代謝等都有重要作用[14]。本試驗中，與SDPP組相比，YE組仔豬血清的T3含量顯著提高（P＜0.05），說明飼料中添加YE可能更有利于仔豬生長。

腸道形態(tài)學變化可直接反映腸道的屏障功能。完整的腸絨毛可有效阻止病原微生物及毒素的入侵。仔豬斷奶后發(fā)生大面積腹瀉與腸絨毛脫落、絨毛變短、隱窩加深有關。絨毛高度和黏膜厚度增加可使小腸吸收面積擴大，有利于營養(yǎng)物質的吸收，腸道隱窩深度可以反映細胞的生成率：隱窩變淺則表明細胞的成熟率上升，其分泌功能相應增強[15]，在功能上將影響消化吸收機能[16]。

腸道V/C值通?？梢苑从承∧c上皮細胞的更新代謝程度，可以綜合反映小腸的功能狀態(tài)：比值下降則表明消化吸收功能降低，并常常會伴隨腹瀉發(fā)生；若比值上升則表明消化吸收功能增強，并伴隨腹瀉率的下降[17]。

本試驗中，與SDPP組相比，YE組仔豬空腸段的隱窩深度降低，且差異顯著（P＜0.05）；V/C值雖差異不顯著（P＞0.05），但提高了24.10%，與Carlson等[11]的研究結果一致。

4 結論

對早期斷奶仔豬而言，日糧中添加3%SDPP與3%YE對早期斷奶仔豬生長性能和血清生化指標無明顯差異，但仔豬血清激素水平和腸道黏膜形態(tài)有一定的差異。因此，在早期斷奶仔豬階段，酵母水解物替代血漿蛋白粉具有可行性，但對后期生長性能的影響有待進一步研究。