康新奇
冬蟲夏草的正品與混淆品的鑒別方法分析
康新奇
對于冬蟲夏草正品與混淆品的鑒別,藥學(xué)人員應(yīng)掌握各種鑒別方法,熟練應(yīng)用各種鑒別方法,并掌握冬蟲夏草的來源、性狀、理化性質(zhì)、顯微特征,以此判斷冬蟲夏草的偽劣。
冬蟲夏草;正品;混淆品;鑒別
DOI∶10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.17.198
冬蟲夏草是我國特有的名貴中藥材之一,其藥理作用顯著多樣,可滋補(bǔ)身體、調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)各器官功能等。冬蟲夏草有著較為特殊的生長環(huán)境,產(chǎn)量少,貨源緊缺;同時冬蟲夏草的價格不斷升高。而在現(xiàn)今市場上,冬蟲夏草的應(yīng)用存在相應(yīng)的安全隱患,有大批以次充好、偽劣冬蟲夏草與正品混淆一起,使臨床用藥安全性受到明顯影響。因此本文對冬蟲夏草的正品與混淆品進(jìn)行了有效鑒別,具體分析如下。
1.1 正品冬蟲夏草的來源 正品冬蟲夏草是蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上子座寄生有麥角菌科真菌,或?yàn)橛紫x尸體的復(fù)合體。
1.2 正品冬蟲夏草的性狀 蟲體與蠶相似,長度約3~5 cm,直徑3~8 mm,以黃棕色至土黃色為主,粗糙,有顯著環(huán)紋。頭部為紅棕色,子座;胸腹部顏色為深黃色至黃棕色,胸節(jié)、胸足各3個,腹節(jié)10個,腹足5對,中部存在較為明顯的4對腹足。表面存在20~30個環(huán)節(jié),質(zhì)脆,斷面呈淡黃色。子座細(xì)長呈圓柱形,稍微扭曲,較蟲體長,為灰棕色至棕褐色,縱皺紋,頭部膨大輕微,質(zhì)柔韌,斷面近似白色,如纖維狀,微腥,味苦。
1.3 顯微特征 蟲體見不規(guī)則橫切面,周圍生長著銳刺毛和長絨毛,長短不一。軀殼分布大量菌絲,間有裂隙,斷面白色,中心痕跡為消化道,周圍皮殼生長細(xì)剛毛,長度約為6~30 μm。子座外周橫切面為形狀卵圓形子囊殼組成,子囊殼基部于子座凹陷處填埋,先端突出子座,長約270~550 μm及直徑140~245 μm;子囊殼內(nèi)見大量子囊,呈線形,一個子囊內(nèi)分布線形約有2~8個及橫隔的約160~170 μm長、5.0~6.5 μm直徑子囊孢子,子囊孢子中央見大量菌絲,間有裂隙,不孕處則無子囊殼。
1.4 理化性質(zhì) 取1 ml硫酸乙醇提取液(1:7),在365 nm熒光燈下觀察,正品為淡藍(lán)色熒光。取0.5 g本品+5 ml浸泡1 h,搖勻,過濾,取1 ml溶液在365 nm熒光燈下觀察,正品熒光為黃藍(lán)色。以乙醇溶出1 g冬蟲夏草粉末雜質(zhì),氯仿提取,過濾,滴加2滴冰醋酸和乙酸酐及1~2滴濃硫酸,冬蟲夏草為棕黃色-紅紫色或污綠色。經(jīng)氯仿提取的粉末以20%乙醇回流提取,濃縮至0.5 ml液體,蒸餾水稀釋至2~3 ml,加40%氫氯化鈉溶液2 ml進(jìn)行振搖,適量滴加1%硫酸銅試劑,振搖,溶液漸變?yōu)樽霞t色,正品為弱顏色。
1.5 紫外吸收光譜鑒別 在365 nm處采取紫外吸收光譜實(shí)對冬蟲夏草進(jìn)行觀察,其熒光與亞香棒蟲草熒光存在一定差異,冬蟲夏草波長有4個特征峰,分別為270、281、295及304 nm,混淆品波長只有2個特征峰,為272、291 nm。
1.6 薄層層析 冬蟲夏草、分枝蟲草、蛹草、亞香棒蟲草均采取薄層層析法進(jìn)行鑒別,通過氯仿、甲醇提取,對照品為腺嘌呤,冬蟲夏草中存在309 nm波長最大吸收峰,與混淆品存在較大差異。
2.1 亞香棒蟲草 亞香棒蟲草于湖南、江西、安徽、廣西等地生產(chǎn),屬于麥角菌科真菌亞香棒蟲草的子座以及寄主幼體的干燥復(fù)合體。似蠶狀大小約3~5 cm長、4~6 mm直徑的蟲體,表面為黃棕色,近頭部存在較細(xì)的環(huán)裝,約有20~30個環(huán)裝皺紋。全身8對足,分別為3對近頭部、中部4對(最為明顯)及近尾部1對。頭部呈紅棕色,尾狀似蠶尾,存在白色菌膜。去除后顏色為褐色,質(zhì)脆,易折斷,斷面呈黃白色,較為平坦;氣微腥,味微苦。子座呈約2.8~8.0 cm長、3 mm直徑的長棒狀,頭部膨大不明顯,表面呈深棕色,存在細(xì)縱皺紋,頂端存在不育部分,約2~3 mm,氣微腥,味微酸。且亞香棒蟲草和野生的藏、川、滇等冬蟲夏草相比、其顏色發(fā)白,中部無突出四足,其他有較為相同的外表特征[1]。
經(jīng)顯微鑒別,亞香棒蟲草為不規(guī)則形蟲體,周圍軀殼為獨(dú)體,生長的銳刺毛、長絨毛長度不一,部分似分枝狀。軀殼見大量菌絲,間有裂隙。子座周圍組成為子囊殼,呈卵形或橢圓形,于凹陷子座內(nèi)埋下半部。其內(nèi)見細(xì)長子囊,子囊內(nèi)有多個橫隔子囊孢子,不育部內(nèi)大量菌絲,間有裂隙,無子囊殼。經(jīng)理化性質(zhì)鑒別,亞香棒蟲草熒光呈淡黃綠色。
2.2 涼山蟲草 涼山蟲草屬于麥角菌科真菌涼山蟲草,寄生在鱗翅目昆蟲幼蟲的子座和幼蟲尸體的干復(fù)合體。呈約4 cm長、0.6~1.0 cm粗、輕微彎曲呈蠶狀的蟲體,表面附有菌絲膜為棕色至棕褐色,除去為紫褐色,約有9~12個環(huán)紋,10對足,不明顯。子座呈分支或單生線狀,頂端不孕。頭部為紅褐色,腹部約為10對足,子座存在約為30 cm長分枝或單生,呈圓柱狀,以褐色或黑褐色,質(zhì)脆,易折斷,斷面呈黃白色。氣微腥,味淡。經(jīng)顯微鑒別子座上部組織表面生有子囊殼[2]。
2.3 蛹草 蛹草屬于同屬菌類蛹草菌Link的子座及蟲體的復(fù)合體,夜蛾科幼蟲為寄主,發(fā)育成蛹后死亡。其蟲體為橢圓形蛹,子座頭部頂端鈍圓,無不孕端,為橙黃色或橙紅色,柄細(xì)長,呈圓柱形。子座單生或有2~5 cm長的兩枝。顯微鏡見其斷面為灰白色,子囊殼短,內(nèi)有多個子囊,子囊見約8個纖細(xì)子囊孢子[3]。
2.4 分枝蟲草 分枝蟲草屬于麥角菌科真菌分枝蟲草,寄生于鱗翅目昆蟲幼蟲上的子座及蟲體。其蟲體呈黃褐色表面或?yàn)楹诤稚砻?腹部有較為細(xì)密環(huán)紋,頭部呈棕褐色,角質(zhì),光澤,見明顯8足。子實(shí)體彎曲,呈黑褐色,斷面外層為黑色,中心為黃白色。顯微鏡見子囊殼全部埋入子座,緊密排列[4]。
2.5 香棒蟲草 香棒蟲草屬于麥角菌科真菌香棒蟲草,寄生在鞘翅目昆蟲金龜子幼蟲的子座及幼蟲尸體復(fù)合體,其蟲體呈較粗的約為1.5~2.0 cm長、5 mm直徑的扁腎形,較為彎曲。棕黃色,頭部較小,呈棕褐色,環(huán)紋較密集,胸部有3對足。子座2~6 cm長、2 mm直徑的線狀。
正品冬蟲夏草有著較為明顯性狀特征,經(jīng)顯微鏡觀察、理化性質(zhì)分析,以及紫外吸收光譜、薄層層析等方法鑒別,可有效鑒別出正品冬蟲夏草與亞香棒蟲草、涼山蟲草、蛹草、分枝蟲草及香棒蟲草的差異性,需要藥學(xué)人員熟知正品冬蟲夏草的各種特性,掌握熟練的各種鑒別方法,并掌握冬蟲夏草的來源、性狀、理化性質(zhì)、顯微特征,以此判斷冬蟲夏草的偽劣,確保用藥安全。
[1]鐘欣.冬蟲夏草與亞香棒蟲草的分子及化學(xué)指紋圖譜鑒別.中國食品學(xué)報(bào),2009,9(1):175.
[2]楊艷青,段軍華.冬蟲夏草與其偽品的鑒別.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012,7(1):31.
[3]段軍華.冬蟲夏草與其混淆品的鑒別.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,6(12):1037.
[4]唐毅.名貴中藥材冬蟲夏草的真?zhèn)谓?jīng)驗(yàn)鑒別.重慶中草藥研究,2008,12(2):1.
2015-05-04]
∶471000 河南省洛陽市第二中醫(yī)院