賴錦茂，楊澤填，楊鴻權(quán)，張 斌

(廣州中醫(yī)藥大學 第一臨床醫(yī)學院，廣東 廣州510405)

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小青龍湯動物實驗研究進展

賴錦茂，楊澤填，楊鴻權(quán)，張 斌

(廣州中醫(yī)藥大學 第一臨床醫(yī)學院，廣東 廣州510405)

小青龍湯作為中醫(yī)十大名方之一，其功效卓著，備受后人推崇，近年來對其研究越來越熱門，其中以實驗動物研究最多。搜索數(shù)據(jù)庫中2010-2014年關(guān)于小青龍湯動物研究的相關(guān)文獻，對小青龍湯近五年的動物實驗研究進行綜述，發(fā)現(xiàn)小青龍湯動物實驗研究主要集中在對哮喘、變應(yīng)性鼻炎、肺炎型心臟病等疾病機理和機制方面。

小青龍湯；動物實驗；綜述

小青龍湯出自醫(yī)圣張仲景的《傷寒論》，被譽為治喘神方，備受后人推崇。小青龍湯由麻黃、芍藥、細辛、炙甘草、干姜、桂枝、五味子、半夏八味藥組成，配伍嚴謹，體現(xiàn)溫陽、益氣、化飲的作用。臨床上廣泛用于治療咳嗽、哮喘、肺源性心臟病等外寒里飲疾病。近年來，隨著小青龍湯在臨床上使用范圍的不斷拓展和延伸，其治療相關(guān)疾病作用機理的研究越來越受關(guān)注，針對小青龍湯的動物實驗研究主要圍繞哮喘、過敏性鼻炎、肺源性心臟病等疾病展開。筆者通過查閱2010-2014年與小青龍湯動物實驗有關(guān)的相關(guān)文獻，對小青龍湯近五年來的動物實驗研究進展做相關(guān)綜述。

1 小青龍湯治療哮喘機理研究

用大鼠、小鼠或者豚鼠進行造模，造模方法為以卵清白蛋白(OVA)致敏與激發(fā)建立哮喘大鼠氣道重塑模型。

1.1 INF-γ、IL-4途徑

謝培洪[1]通過實驗發(fā)現(xiàn)哮喘小鼠模型組血清中INF-γ、IL-4均升高，IL-4升高程度遠高于INF-γ，提示Th2細胞因子的優(yōu)勢地位可能是小鼠哮喘發(fā)作的免疫學機制。小青龍湯組中INF-γ明顯比哮喘模型組高，而IL-4升高程度低于哮喘模型組，提示小青龍湯治療哮喘的作用機制之一為升高哮喘發(fā)作小鼠血清INF-γ，拮抗IL-4分泌水平，從而達到調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡。董翠香等[2]研究小青龍湯對哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF)中INF-γ、IL-4水平及氣道炎癥的影響，也得出小青龍湯能夠升高肺泡灌洗液中INF-γ水平，降低IL-4水平，調(diào)節(jié)Th1/Th2失衡，從而有效改善氣道炎癥，其與人參五味子湯二步序貫治療效果及吸入布地奈德相似。陳紅霞等[3]研究小青龍湯、射干麻黃湯及其合方對大鼠哮喘模型肺泡灌洗液INF-γ/IL-4的影響，發(fā)現(xiàn)小青龍湯能有效緩解哮喘模型大鼠臨床表現(xiàn)及氣道炎癥，其作用機制可能是糾正Th1/Th2失衡，小青龍湯與射干麻黃湯合方比單方治療效果更顯著。郅琳等[4]發(fā)現(xiàn)小青龍湯能夠明顯降低BALF中炎癥細胞數(shù)量，并能夠明顯升高INF-γ水平，降低IL-4水平，改善哮喘氣道炎癥。

1.2 TGF-β1、Smad3途徑

楊帆[5-6]在探究小青龍湯對哮喘大鼠肺組織中TGF-β1、Smad3蛋白表達的影響時發(fā)現(xiàn)，造模后實驗組大鼠支氣管管壁厚度比正常對照組平滑肌厚度顯著增厚，小青龍湯組與哮喘模型組相比，增厚程度低，免疫顯示哮喘模型組和小青龍湯組TGF-β1、Smad3蛋白表達明顯高于正常組，但小青龍湯組蛋白表達明顯低于哮喘模型組，從而提出小青龍湯可能通過影響哮喘大鼠肺組織中TGF-β1、Smad3蛋白表達來拮抗氣道重塑。

1.3 TLR4、P-Akt途徑

莫碧文等[7]研究TLR4、P-Akt在哮喘大鼠氣道平滑肌遷移中的作用及小青龍湯對其影響。造模后測定氣道阻力，觀察氣道壁嗜酸性粒細胞浸潤情況，通過圖像分析軟件測定支氣管管壁面積，平滑肌面積和平滑肌至上皮下基底膜距離；免疫組化檢測TLR4、P-Akt蛋白表達。發(fā)現(xiàn)TLR4和P-Akt參與氣道平滑肌的遷移，小青龍湯組的蛋白表達明顯低于模型組，從而得出小青龍湯可能通過抑制TLR4和P-Akt的表達抑制哮喘氣道平滑肌的遷移，從而在哮喘氣道重塑方面發(fā)揮一定的作用。

1.4 IL-5、IL-13途徑

殷彬等[8]通過實驗發(fā)現(xiàn)哮喘模型大鼠血清中IL-5及IL-13含量異常增高，而小青龍湯組則可以降低IL-5及IL-13含量。國外有研究證實IL-5可以增強EOS對血管內(nèi)皮細胞的黏附能力，延長其存活時間，強化EOS毒性蛋白的釋放，進而增強EOS參與哮喘氣道炎癥的效應(yīng)[9]。IL-4/IL-5/IL-13都屬于Th2類分泌細胞因子，Kumar等[10]研究證實IL-13通過誘導趨化因子產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，調(diào)控轉(zhuǎn)化生長因子使肺組織纖維化等作用，在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中起非常重要的作用。

1.5 Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞途徑

吳奎等[11]研究小青龍湯對哮喘小鼠氣道變應(yīng)性炎癥的作用，觀察哮喘模型小鼠外周血和BALF中Foxp、CD T細胞的比例，發(fā)現(xiàn)小青龍湯可有效抑制哮喘模型小鼠氣道變應(yīng)性炎癥，作用途徑可能為誘導Foxp調(diào)節(jié)性T細胞的產(chǎn)生、增加IL-10的分泌，進而抑制Th2型免疫反應(yīng)。

1.6 MMP-9、T1MP-1途徑

韓征利等[12]研究小青龍湯和人參五味子湯二步序貫治療對于哮喘小鼠呼吸道炎癥與重塑的影響，研究指標為基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白組織酶抑制劑-1(T1MP-1)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小青龍湯組和人參五味子湯序貫治療組MMP-9、T1MP-1表達水平和MMP-9/T1MP-1明顯低于哮喘組，得出二步序貫治療能有效抑制呼吸道炎癥和重塑作用，一定程度上可以替代布地奈德吸入治療。

2 小青龍湯治療變應(yīng)性鼻炎機理研究

王樹鵬等[13]研究加味小青龍湯及其拆方對變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜病理形態(tài)和IL-4含量的影響，發(fā)現(xiàn)加味小青龍湯及其拆方作用下的變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜水腫、充血、炎癥細胞浸潤嗜酸性粒細胞浸潤上皮細胞壞死不完整現(xiàn)象均較模型組輕，且IL-4含量也明顯降低，提示了小青龍湯治療變應(yīng)性鼻炎的作用。王維賦等[14]研究麻黃附子細辛湯和小青龍湯對過敏性鼻炎豚鼠的作用，觀察指標為治療前后的行為學體征積分、血液組胺含量和鼻黏膜切片病理變化。實驗結(jié)果為用藥組治療后體征積分和血液組胺含量均有降低，鼻黏膜修復較造模組明顯，表明麻黃附子細辛湯和小青龍湯均能改善過敏性鼻炎豚鼠癥狀，對血液組胺有降低和修復鼻黏膜作用，前者效果優(yōu)于后者。李丹等[15]觀察小青龍湯對過敏性鼻炎大鼠癥狀積分及血清IgE 、IL-12、LTC4水平的影響，提出小青龍湯治療過敏性鼻炎可能是通過提高TH1類細胞因子IL-12水平，使Th1/Th2比例恢復平衡，降低血清中IgE水平，抑制過敏反應(yīng)物質(zhì)LTC4釋放，實現(xiàn)降低炎性介質(zhì)分泌從而改善黏膜水腫，緩解鼻炎癥狀。

3 小青龍湯治療肺炎型心臟病機理研究

王浩等[16]研究小青龍湯對肺源性心臟病大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)、NO及內(nèi)皮素-1(ET-1)的影響，造模后大鼠出現(xiàn)咳嗽，氣促，嘴唇紫紺，給藥后癥狀改善，與模型組相比給藥組ANG-Ⅱ、ET-1和NO含量具有顯著差異。從而提出小青龍湯通過調(diào)節(jié)ANG-Ⅱ、ET-1和NO含量的動態(tài)平衡有效改善大鼠肺動脈高壓。有研究者通過實驗發(fā)現(xiàn)小青龍湯能有效改善肺源性心臟病大鼠的肺功能、肺動脈高壓及右心肥厚程度[17]。

4 小青龍湯在其他方面的機理研究

張銀萍等[18]觀察小青龍湯對體外培養(yǎng)RBL-2H3細胞增殖及凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)小青龍湯對體外培養(yǎng)RBL-2H3細胞有抑制增殖和促凋亡的作用，效果呈一定的濃度依賴性，提示小青龍湯治療過敏性鼻炎可能與此有關(guān)。李科宇等[19]在探討大鼠體內(nèi)小青龍湯對茶堿藥動力學的影響時發(fā)現(xiàn)小青龍湯組與對照組相比，茶堿清除率顯著變小，清除半衰期和體內(nèi)滯留時間顯著延長，得出小青龍湯可能抑制大鼠體內(nèi)茶堿代謝過程的結(jié)論。此外王筠默[20]將小青龍湯及其拆方制成醇提水劑，用離體兔耳灌流法，發(fā)現(xiàn)給藥后小青龍湯及其拆方對離體兔耳血管灌流液的流出量較給藥前明顯增加，現(xiàn)象持續(xù)5～10min；將藥液注射到大鼠腹腔，與對照組相比，發(fā)現(xiàn)大鼠足底溫度先升溫后降溫的作用，機理尚不清楚。

5 結(jié)語

小青龍湯是治療外感風寒、寒飲內(nèi)停喘咳的常用方。其自古以來就備受各個醫(yī)家的喜愛，臨床運用甚為廣泛。本方主治外感風寒、寒飲內(nèi)停之證。風寒束表，皮毛閉塞，衛(wèi)陽被遏，營陰郁滯，故見惡寒發(fā)熱、無汗、身體疼痛。素有水飲之人，一旦感受外邪，每致表寒引動內(nèi)飲?！峨y經(jīng)·四十九難》說：“形寒飲冷則傷肺?！彼嗖瑑?nèi)外相引，飲動不居，水寒射肺，肺失宣降，故咳喘痰多而?。凰Ｐ南?，阻滯氣機，故胸痞；飲動則胃氣上逆，故干嘔；水飲溢于肌膚，故浮腫身重；舌苦白滑，脈浮為外寒里飲之佐證。對此外寒內(nèi)飲之證，若不疏表而徒治其飲，則表邪難解；不化飲而專散表邪，則水飲不除。故治宜解表與化飲配合，一舉而表里雙解。小青龍湯方中麻黃、桂枝相須為君，發(fā)汗散寒以解表邪，且麻黃又能宣發(fā)肺氣而平喘咳，桂枝化氣行水以利里飲之化；干姜、細辛為臣，溫肺化飲，兼助麻、桂解表祛邪；然而素有痰飲，脾肺本虛，若純用辛溫發(fā)散，恐耗傷肺氣，故佐以五味子斂肺止咳、芍藥和養(yǎng)營血，二藥與辛散之品相配，一散一收，既可增強止咳平喘之功，又可制約諸藥辛散溫燥太過之弊；半夏燥濕化痰，和胃降逆，亦為佐藥；炙甘草兼為佐使之藥，既可益氣和中，又能調(diào)和辛散酸收之品。藥雖八味，配伍嚴謹，散中有收，開中有合，使風寒解、水飲去、宣降復，則諸癥自平。近年來，隨著小青龍湯在治療哮喘、過敏性鼻炎、肺源性心臟病等疾病時取得了顯著的療效，對其的作用機理研究越來越受關(guān)注，并已經(jīng)取得了一定的成果。從以上論述可知小青龍湯對機體許多靶點都有調(diào)節(jié)作用。目前對小青龍湯功效的研究主要集中于其對某種、某類疾病治療效果的直觀觀察，針對其作用機制的研究雖有一些，但研究的廣度和深度遠遠不夠，因此尚需要進一步大量的研究來明確其作用機制。

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(責任編輯：魏 曉)

2015-01-27

賴錦茂(1992-)，男，廣州中醫(yī)藥大學在讀生，研究方向為中西醫(yī)臨床。

R285.5

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1673-2197(2015)13-0045-02

10.11954/ytctyy.201513017