周春元,王英平,樸向民
(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所,長(zhǎng)春 130112)
云芝多糖(CoriolusversicolorPolysaccharide)具有明顯的抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、鎮(zhèn)痛、消炎保肝、降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗氧化以及抗衰老等作用,已經(jīng)在功能食品和臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,這使得人們對(duì)云芝的開(kāi)發(fā)研究日益活躍,云芝逐漸成為中藥開(kāi)發(fā)的研究熱點(diǎn)之一。本文對(duì)云芝多糖的提取、分離純化和藥理活性等方面的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述,為云芝多糖的開(kāi)發(fā)提供一定的參考依據(jù)。
云芝多糖需要經(jīng)過(guò)一定的提取工藝制備。傳統(tǒng)提取工藝上采取水醇沉提法,這種提取方法受用水量、提取溫度、提取時(shí)間、提取次數(shù)等因素的影響。為了提高云芝多糖的含量,出現(xiàn)了許多與新技術(shù)相結(jié)合的提取方法。劉宇文等[1]采用正交試驗(yàn)的方法確定了云芝多糖的超聲提取最佳工藝:20倍量的水、超聲提取2次、每次15min。雷迎等[2]采用超聲波提取法,研究了云芝多糖的最佳提取工藝,在單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,以溶劑、超聲時(shí)間、溫度、pH作為提取因素,優(yōu)化云芝多糖的提取工藝,結(jié)果顯示,以2%的Na2CO3溶液為提取介質(zhì)、溫度45℃、pH 8.5、超聲時(shí)間50min,云芝多糖的提取率達(dá)到最高。胡成旭等[3]采用響應(yīng)面法探討了云芝多糖的最佳提取條件,提取溫度85℃、浸提時(shí)間105min、液料比27∶1,云芝多糖的提取率最高。這種方法是根據(jù)回歸分析來(lái)確定云芝多糖提取率的影響因子,可減少試驗(yàn)次數(shù),是一種提取云芝多糖最經(jīng)濟(jì)的方式。
無(wú)論從云芝子實(shí)體中提取還是菌絲體中提取的云芝多糖,都含有蛋白質(zhì)、色素、鞣質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸、酚類(lèi)、內(nèi)脂類(lèi)、低聚糖等各種成分,需要進(jìn)一步分離純化才能得到純度較高的云芝多糖。目前,離子交換柱和H2O22種方法均可以除去多糖中的色素,但H2O2這種氧化劑應(yīng)在低溫、低濃度下進(jìn)行,否則很容易引起多糖的降解[4~6]。去除多糖中的蛋白質(zhì)常采用Sevag法、三氟三氯二乙烷法、三氯乙酸法等方法,Sevag法是實(shí)驗(yàn)室去除游離蛋白的最常用方法。多糖中同時(shí)含有的游離蛋白質(zhì)和色素,可采用金屬絡(luò)合物的方法,再經(jīng)過(guò)陰離子交換樹(shù)脂分解生成金屬絡(luò)合物[7],從而達(dá)到去除的目的。
云芝多糖具有重要的免疫增強(qiáng)作用,近年來(lái)學(xué)者們對(duì)其進(jìn)行了深入地研究。牛曉暉等[8]研究發(fā)現(xiàn),云芝多糖體外給藥可明顯促進(jìn)小鼠T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞的增殖,提高腫瘤壞死因子(TNF)吞噬能力及細(xì)胞因子IL-1、IL-2和FN-γ的活性。云芝糖肽可提高紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)、T細(xì)胞亞群以及NK細(xì)胞的活性,降低免疫復(fù)合物花環(huán)細(xì)胞的活性,明顯改善胃癌患者手術(shù)及化療時(shí)免疫功能的影響[9]。魯進(jìn)宇等[10]研究表明,云芝多糖可提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和脾細(xì)胞產(chǎn)生溶血素能力,顯著增強(qiáng)了小鼠的免疫功能。
云芝多糖抗腫瘤的最大優(yōu)點(diǎn)是無(wú)毒無(wú)副作用,對(duì)多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移都起到良好的預(yù)防和治療效果。陸培新等[11]研究表明,云芝多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠肝癌細(xì)胞有顯著的抑制作用,并且對(duì)誘發(fā)生癌長(zhǎng)期病變也有較好的阻斷癌細(xì)胞發(fā)生的作用。Ikuzawa等[12]研究發(fā)現(xiàn),云芝多糖對(duì)小鼠肉瘤S-180和肺癌細(xì)胞具有很強(qiáng)的抑制率,抗癌作用明顯。曾淑君等[13]研究報(bào)道,連續(xù)口服云芝糖肽對(duì)裸鼠接種的人鼻咽癌和人肺腺癌有明顯的抑制作用,其抑制腫瘤的作用機(jī)理不通過(guò)環(huán)核普酸系統(tǒng)而起抗腫瘤作用。劉瑞等[14]研究發(fā)現(xiàn),云芝多糖可顯著抑制接種于小鼠皮下的肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng),抑制小鼠肝內(nèi)P53和VEGF的表達(dá),提高血清中IgG的含量,促進(jìn)胸腺T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移增生。此外,云芝多糖還能夠抑制胃癌和乳腺癌等細(xì)胞的增殖[15]。
云芝多糖對(duì)肝損傷的保護(hù)作用主要是通過(guò)提高抗氧化酶和谷胱甘肽(GSH)的活性,加速自由基的清除起作用的[16]。腹腔注射四氯化碳引起的實(shí)驗(yàn)性肝損傷大鼠,云芝多糖能有效降低谷丙轉(zhuǎn)氨酸合成,提高大鼠體內(nèi)氨基半乳糖的形成,顯著減輕肝細(xì)胞中毒現(xiàn)象[17]。胡承江等[18]探討了云芝多糖對(duì)肝損傷的作用機(jī)制,結(jié)果表明,云芝多糖保護(hù)組與模型組比較,云芝多糖保護(hù)組小鼠肝體指數(shù)降低,胸腺指數(shù)增加,并且小鼠血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性和肝勻漿中丙二醛(MDA)的含量下降。孫設(shè)宗等[19]研究了云芝多糖對(duì)化學(xué)性肝損傷的作用機(jī)制,結(jié)果表明,云芝多糖能有效地清除由四氯化碳引起的實(shí)驗(yàn)性肝損傷小鼠體內(nèi)自由基,誘導(dǎo)超氧化物歧化酶(SOD)和GSH的合成,降低一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)的含量,增強(qiáng)機(jī)體抗氧化的能力,對(duì)肝損傷有很好的保護(hù)作用。
云芝多糖具有一定的抗氧化活性。周海華等[20]研究了云芝多糖的體外抗氧化效果,并與Vc的抗氧化作用進(jìn)行了比較,結(jié)果表明,云芝多糖能清除自由基,但清除能力比Vc差。南鳳仙等[21]探討了云芝多糖對(duì)小鼠的抗氧化作用及其機(jī)制,對(duì)小鼠飲用云芝多糖水,測(cè)定血紅細(xì)胞超氧化物歧化酶的活性和羥脯氨酸的含量,確定云芝多糖的抗氧化作用,結(jié)果顯示,云芝多糖可增強(qiáng)機(jī)體清除脂質(zhì)過(guò)氧化物的能力,具有很強(qiáng)的抗氧化作用。
云芝多糖還具有降血脂、益氣解毒、鎮(zhèn)痛、抗衰老、抗動(dòng)脈粥樣化、抗體外微生物活性等藥理作用[22~26]。
云芝是一種重要的藥用真菌,近年來(lái),人們?cè)谠浦ザ嗵堑姆蛛x、純化、組成、結(jié)構(gòu)鑒定以及藥理活性等方面進(jìn)行了大量研究,并取得了一定的成果。但一些實(shí)驗(yàn)研究成果仍處在實(shí)驗(yàn)室階段,不能很好地應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。云芝多糖具有很多重要的藥理作用,但其作用機(jī)制還不清楚,還需要進(jìn)一步深入研究。由于云芝栽培技術(shù)還不成熟,目前,云芝多糖大多數(shù)是從菌絲體或發(fā)酵液中提取,云芝規(guī)模化種植技術(shù)還需要進(jìn)一步提高。隨著分離、純化技術(shù)的不斷創(chuàng)新和完善,云芝多糖會(huì)在更多領(lǐng)域具有更廣泛的發(fā)展前景。特別是科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,云芝多糖必將在食品、醫(yī)藥和保健品等領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)利用逐步深入。
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