張養(yǎng)華

鄒城市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東鄒城 273500

分析循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞與CRP對2型糖尿病合并冠心病的診斷價(jià)值

張養(yǎng)華

鄒城市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東鄒城 273500

目的對2型糖尿病合并冠心病患者血清CRP與循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞水平進(jìn)行研究，分析循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞與CRP對2型糖尿病合并冠心病患者診斷價(jià)值。方法對2012年1月—2014年6月該院收治的35例2型糖尿病合并冠心病患者進(jìn)行研究，以35例不合并糖尿病的冠心病患者以及31例健康體檢者作為對照，對患者的外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量以及血清CRP水平進(jìn)行測定。結(jié)果3組中2型糖尿病合并冠心病組CEC含量及CRP水平最高，單純冠心病組次之，而健康對照組CEC含量最低，P＜0.05。結(jié)論血管病變是糖尿病慢性并發(fā)癥之一,血管內(nèi)皮損傷導(dǎo)致糖尿病血管病變，極易累及冠狀動(dòng)脈，檢測CRP和CEC的聯(lián)合動(dòng)態(tài)，不僅有利于診斷糖尿病合并冠心病，還可以指導(dǎo)干預(yù)炎癥反應(yīng)和內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)劑的使用等臨床綜合治療手段，以降低并防止心腦血管并發(fā)癥的發(fā)生。

糖尿??；冠心病；循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞；C反應(yīng)蛋白

2 型糖尿病作為一種全身代謝性疾病，其中一個(gè)慢性并發(fā)癥就是血管病變。血管病變對患者的壽命和生存質(zhì)量有嚴(yán)重的影響[1],經(jīng)常伴隨有微血管和大血管病變，容易累及冠狀動(dòng)脈。2型糖尿病患者的冠心病發(fā)病率要高于正常人2～4倍，因?yàn)楣谛牟《l(fā)的死亡在糖尿病患者中占75%，C反應(yīng)蛋白（CRP），是一類炎癥標(biāo)志物，且已經(jīng)被證實(shí)可以在健康人群中作為發(fā)生未來冠狀動(dòng)脈事件的檢測指標(biāo)。通過循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）數(shù)量的改變可以直接判斷血管內(nèi)皮的損傷。該研究通過觀測2型糖尿病合并冠心病患者的血清CRP以及外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量的改變與2型糖尿病合并冠心病患者的相關(guān)性，探討其在微血管病變的發(fā)病機(jī)制中的作用以及意義，選取該院2012年1月—2014年6月期間收治的35例2型糖尿病合并冠心病患者為研究對象，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的2型糖尿病合并冠心病患者35例，男19例，女16例，年齡43～74歲，平均（53.7±11.5）歲，其中15例為穩(wěn)定性心絞痛，7例為陳舊性心肌梗死，14例為不穩(wěn)定性心絞痛。單獨(dú)患有冠心病的組35例，其中男20，女15例，年齡44～75歲，平均（54.1±12.1）歲，其中13例為穩(wěn)定心絞痛，8例為陳舊性心肌梗死，14例為穩(wěn)定心絞痛。健康對照組31例，男16例，女15例，年齡45～73歲，平均（53.9±12.5）歲。

1.2 CEC鑒定

首先配制密度為1.050(35%)的percoll液，把采集來的每份靜脈血均勻混合，然后用相同量的生理鹽水進(jìn)行稀釋后備用，在每支試管內(nèi)注入35%percoll液2 mL,將稀釋后的靜脈血沿管壁緩慢鋪于35%percoll液上,離心后,吸取上層和中層液1 mL于小試管內(nèi),將小試管離心后棄上清,并于每個(gè)小試管加生理鹽水0.5 mL震蕩混勻即得細(xì)胞懸液。等CEC懸液離心后，再選取沉淀制成圖片，風(fēng)干后利用冷乙醇進(jìn)行固定，最后通過免疫組織化學(xué)法檢測，用CD34把特異的內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記出來。CD34的染色結(jié)果表面特異的內(nèi)皮細(xì)胞在胞漿和胞膜有標(biāo)記，顏色變?yōu)樽攸S色，進(jìn)一步的還可以證明被標(biāo)記的細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞。

1.3 CRP測定

通過免疫散射速率比濁法可以進(jìn)行CRP測定，具體過程是通過全進(jìn)口試劑全自動(dòng)特種蛋白分析儀來完成的。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

不同組別的CEC含量2型糖尿病合并冠心病組的35例患者中CEC含量為（8.5±2.3）個(gè)/0.9 uL，單純冠心病組35例為（7.1±3.2)個(gè)/0.9 uL，對照組31例為（3.5±2.1）個(gè)/0.9 uL。2型糖尿病合并冠心病組CEC含量最高，單純冠心病組次之，健康對照組CEC含量最低，3組之間CEC含量經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

不同組別CRP水平2型糖尿病合并冠心病組的35例患者中CRP水平為（6.4±2.1）mg/L，單純冠心病組35例為（4.7±1.9）mg/L，對照組31例為（2.3±1.3）mg/L。2型糖尿病合并冠心病組CRP水平最高，單純冠心病組次之，健康對照組CRP水平最低，3組之間CRP水平經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)是目前評價(jià)血管損傷的惟一、特異而且直接的指標(biāo)[2]。來源于血管內(nèi)皮細(xì)胞。血管EC的新陳代謝會(huì)產(chǎn)生一些循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞，在病理情況下使CEC的數(shù)目稍微增加，從而直接表現(xiàn)為EC的脫落性損傷。在研究過程中發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，糖尿病合并冠心病患者的CEC數(shù)量較高，且外周血CEC數(shù)目的增加直接導(dǎo)致了血管內(nèi)皮損傷，其一方面是促使冠心病的主要因素，其更為主要的是可能與長期高血糖因素有關(guān)。在高糖狀態(tài)下，內(nèi)皮細(xì)胞膜上的特異受體與糖化終末端產(chǎn)物相結(jié)合，引發(fā)了內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激，形成氧自由基，造成內(nèi)皮細(xì)胞損傷，具體表現(xiàn)為內(nèi)皮細(xì)胞的恢復(fù)延遲、增值周期延長，從而出現(xiàn)細(xì)胞凋亡。另外高血糖還會(huì)增加抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖的各類血清蛋白的敏感度，從而使CEC增高?，F(xiàn)階段的一些研究中認(rèn)為高血糖本身并不會(huì)造成糖尿病血管損傷，而是通過胰島素抵抗（IR）的胰島素血癥所引起的。內(nèi)皮細(xì)胞損傷之后可以激活血小板和血凝系統(tǒng)，形成微血栓，完全的釋放內(nèi)皮素和血管生物活性等物質(zhì)，從而影響血流動(dòng)力和血管張力，破壞血管屏障，增加血管內(nèi)皮的通透性，形成一系列的病理改變。以上所示均是因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞的改變而造成的糖尿病微血管病變的原因。該研究資料顯示2型糖尿病合并冠心病組CEC含量最高，而健康對照組CEC含量最低。

C反應(yīng)蛋白是以白細(xì)胞介素－6為主的細(xì)胞因子刺激肝細(xì)胞所分泌的一種非糖基化聚合蛋白，機(jī)體組織受到損傷或發(fā)生炎癥時(shí)C反應(yīng)蛋白可增高[3]。胰島素抵抗和炎癥反應(yīng)呈正相關(guān)關(guān)系。2型糖尿病是由于免疫性疾病以及各種因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，和體內(nèi)的炎癥有關(guān)，是2型糖尿病發(fā)病機(jī)制的一個(gè)媒介。相關(guān)研究表明，CRP是一種在細(xì)胞因子和所有炎癥介質(zhì)中預(yù)測未來心血管危險(xiǎn)的重要炎癥標(biāo)志物。通告該研究發(fā)現(xiàn)，在糖尿病合并冠心病患者的體內(nèi)存在明顯的慢性炎癥，而引起升高的原因可能是胰島素抵抗導(dǎo)致各種分泌物的增加，這就導(dǎo)致了肝臟內(nèi)的CRP增加，同時(shí)動(dòng)脈樣硬化也會(huì)伴有炎癥，這些炎癥的出現(xiàn)也會(huì)導(dǎo)致CRP水平升高。已發(fā)現(xiàn)CRP在新發(fā)現(xiàn)或已診斷為糖尿病的患者中含量明顯增加，而在僅空腹血糖異?；蚍翘悄虿≈泻恳话阏4]。該研究資料顯示2型糖尿病合并冠心病組CRP水平最高，健康對照組CRP水平最低。

冠心病的一個(gè)重要發(fā)病因素就是糖尿病，在現(xiàn)階段已引起國內(nèi)外學(xué)者的高度重視。而且糖尿病的并發(fā)癥還有很多，包括大血管、小血管和微血管病變，這也是導(dǎo)致糖尿病致殘、致死的最重要的原因，冠狀動(dòng)脈病變是2型糖尿病的常見并發(fā)癥。通過該研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病合并冠心病患者CEC數(shù)量和CRP水平呈現(xiàn)出正相關(guān)的關(guān)系。CRP可以在一定程度上影響血管內(nèi)皮功能。高血糖可以刺激胰島細(xì)胞產(chǎn)生白介素-6，該物質(zhì)可以促進(jìn)肝臟CRP的產(chǎn)生，使血管內(nèi)皮縮血管物質(zhì)進(jìn)行釋放，增加內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，使血管內(nèi)皮細(xì)胞受到的損害進(jìn)一步增強(qiáng)，導(dǎo)致CEC數(shù)量增加。CRP還可以增加和血管內(nèi)皮細(xì)胞相粘附的蛋白質(zhì)基因的表達(dá)，使血管內(nèi)皮的功能受到更加嚴(yán)重的損害，也就進(jìn)一步形成動(dòng)脈粥樣硬化。CRP和CEC還可以影響糖尿病合并冠心病患者血管內(nèi)皮損失，其二者的協(xié)同作用可能在血管病變之中有重要的影響，對CEC和CRP的聯(lián)合動(dòng)態(tài)檢測不僅有利于診斷糖尿病合并冠心病，還可指導(dǎo)預(yù)炎癥反應(yīng)和使用內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)劑等臨床綜合治療手段，以預(yù)防以及減少心腦血管并發(fā)癥。

[1]胡智,劉英明.伐他汀對2型糖尿病患者血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用研究[J].實(shí)用心腦肺血管病雜志，2010,18(2):115.

[2]孔令希,陳建權(quán),陳玉芹,等.停用不同劑量辛伐他汀片對糖尿病腦梗死患者血管內(nèi)皮功能及血清循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響[J].河北中醫(yī), 2014,36(5):795.

[3]黃銀娥.血清超敏C-反應(yīng)蛋白與糖尿病并發(fā)腦血管意外的相關(guān)性研究[J].2013,26(4):229-230.

[4]Ford ES.Body mass index，diabetes，and C－reactive proteinamong U.S. adults[J].Diabetes Care，1999,22（12）：1971.

R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]1672-4062（2015）01（a）－0053-02

張養(yǎng)華（1974-），女，山東鄒城人，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。

2014-10-08）