具有突變和血緣關系的親子鑒定案例分析

喻 芳 任靜妮 龔肖清 張倍銘 朱 江 黃湘婷 王 馨 梁睿熙 辛麗梅

貴州省人口和計劃生育科學研究技術指導所（貴陽，550004）

親子鑒定主要是通過對遺傳基因的檢測，根據孟德爾遺傳規(guī)律判定被檢者之間是否存在生物學親生關系。短串聯(lián)重復序列（STR）的應用極大地提高了親子鑒定能力［1］，已成為親子鑒定的主要手段［2］，但與傳統(tǒng)的遺傳標記（如紅細胞血型、酶型和血清蛋白型等）相比，STR基因座突變率較高［2－3］，遺傳突變使親子之間的遺傳關系不符合遺傳規(guī)律；當爭議父（母）與真父（母）有血緣關系時，爭議父（母）與孩子之間（如祖孫、叔侄、姨甥等）就會有同源基因，而且血緣越近，有同源基因的STR基因座就會越多。這種情況下就會給親子鑒定尤其是單親案件的分析鑒定帶來困難?，F就本單位受理的兩例典型案例作一淺析。

1 資料背景

1.1 資料

2例親子鑒定案例均系紀檢部門委托，案例1要求鑒定爭議父1和爭議父2與孩子的親生血緣關系，爭議父1和爭議父2是親兄弟；案例2要求鑒定父母與孩子親生血緣關系，有領養(yǎng)其親戚小孩的背景。

1.2 方 法

應用無錫中德美聯(lián)公司 AGCU EX－22、21＋1加上性別基因共40個STR基因座，用Genomappe軟件將等位基因標準Ladder中的片段與樣本進行比較，確定樣本的基因分型。

1.3 判斷標準

根據《親權鑒定技術規(guī)范》（SF／Z JD0105001－2010），3個以上基因座不符合遺傳規(guī)律可排除親權關系，若基因座符合遺傳規(guī)律，計算親權指數PI，累計親權指數CPI≥10000支持親權關系存在；“二聯(lián)體親權指數計算標準”、“二聯(lián)體中存在不符合遺傳規(guī)律的遺傳標記時親權指數計算標準”參照《親權鑒定技術規(guī)范》和單親案鑒定的判斷標準［4］。

2 結果

2.1 案 例1

STR基因座分型見表1。從表1檢測結果分析，AGCU EX22STR復合擴增體系結果顯示爭議父1排除2個位點，不能下排除結論；爭議父2在vWA基因座不符合遺傳規(guī)律，通常會考慮發(fā)生突變，按突變基因座計算 PI值，CPI 3.2146E＋04＞10000，可下認定親權關系。但因考慮到爭議父1、父2是親兄弟關系，僅做AGCU EX22STR復合擴增體系下結論有風險，我們加做AGCU 21＋1體系，40個STR基因座分型結果顯示爭議父1排除3個位點以上，可排除爭議父1；爭議父2僅一個位點不符合，按突變基因座計算PI值，累計親權指數 ＞10000，不排除親生關系，支持親權關系存在。

2.2 案 例2

STR基因座分型見表2。從表2檢測結果分析，爭議父很明顯排除親緣關系，爭議母在AGCU EX22體系中只排除2個位點，不能下排除結論。慮到爭議母和孩子親生母親有可能具有血緣關系，我們加做AGCU21＋1后排除位點達3個以上，可下排除結論。

表1 爭議父1、父2和孩子40個STR基因座分型結果

表2 爭議父、母和孩子40個STR基因座分型結果

3 討論

在單親親子鑒定時，由于父子（或母子）組合缺少母親（或父親）的遺傳信息，勢必在排除信息親權指數 （似然率）和RCP值等方面都要低于父、母、子組合的親子鑒定，影響到親子鑒定的準確性。而且，在實踐中經常會遇到是爭議父（或母）和孩子親生父（或母）具有較近的血緣關系，若不注意咨詢委托方或當事人，很可能將面臨的是具有血緣關系且是單親的親子鑒定，如果再遇上有突變位點，將面臨較大風險。

STR基因座具有高度多態(tài)性，有很高的非父排除率，同時STR的突變率也很高，使本來是親生的父子之間也會出現不符合遺傳規(guī)律的現象（即出現矛盾基因座），使得解釋實驗結果變得困難。在實施親子鑒定時發(fā)現矛盾基因座現象時，需要設法確定是突變造成的，還是被檢查者之間本來就不存在親生關系（特別是具有血緣關系單親案件），也是用STR進行親子關系鑒定可能潛在錯誤的原因之一。如果所檢驗的男子（或者女子）與孩子的真父（母）可能有親緣關系時，會減少矛盾基因座的數量。有血緣關系時，爭議父（母）與孩子之間（如祖孫、叔侄、姨甥等）就會有同源基因，而且血緣越近有同源基因的STR基因座就會越多。本文案例1爭議父1和爭議父2在AGCU EX22STR復合擴增體系有20個同源基因，因此，鑒定時要充分考慮到血緣關系的影響再下結論。

STR產生突變的機制是復制時的模板滑動。突變時產生1個重復單位的變化占突變總數的90%以上［6］。如果在矛盾基因座上爭議父所能提供的等位基因和孩子的生父基因之間相差超過1個重復單位，更傾向于排除他們之間有親生關系。父系突變高于母系突變（相差約6倍），在母子親權鑒定時應該應用不同的策略。

因此，在受理親子鑒定司法案件時，盡量要求提供父、母樣本。單親親子鑒定應檢驗更多的STR基因座，若遇到有STR突變不要輕易下排除，有血緣關系時不要輕易下肯定。單親案在無法否定爭議父或爭議母是真父或真母的近親屬時，即使沒有發(fā)現矛盾基因座，也只作出“不排除親生關系”的結論。單親案鑒定起碼要檢測18個STR基因座以上，若發(fā)現矛盾基因座，要增加檢測至≥40個。按公式計算PI值＞10 000后，才可以做出“不排除親生關系”或“支持存在親生關系”的結論；若發(fā)現3個以上矛盾基因座，則應作出否定“親生關系”的結論［4］。目前法醫(yī)學廣泛使用的 Powerplex、IdentifilerTM、SinofilerTM、DNATyper TM15Plus、ACGU EX22、基點20A復合擴增體系均具有較高的個體識別率和非父排除率，通常檢測這些試劑盒的STR基因座已能基本滿足法醫(yī)物證中個體識別和親子鑒定的檢測要求，但在單親鑒定出現了突變、有血緣關系可能的案件中，我們的經驗通常若只單做一個STR試劑盒或加做以上常用STR試劑盒很難下結論，因為他們都有13個CODIS基因座重復，加做ACGU 21＋1擴增體系，往往可提高系統(tǒng)效能，滿足鑒定需求［7］。

［1］ Collete D，Sabine F，ceclle F，et al.A comprehensive genetic map of the human genome based on 5264microsatellites［J］.Nature，1996，380（14）：152－154.

［2］ America Association of Blood Banks.Annual report summary for testing in 2002 ［DB／OL］.http：／／www.aabb.org／about＿the＿AABB／stds＿and＿Accred／ptannrpt02.pdf.2003－11－01.

［3］ Brinkman B，klintschar M，Neuhuber F，et al.Mutation rate in human microsatellites：influence of the structureand length of the tandem repeat［J］.Am J Hum Genet，1998，62（6）：1408－1415.

［4］ 伍新堯，童大躍，朱運良，等.用STR分型技術作親權鑒定時判斷標準的研究 ［J］.中山大學學報，2010，31（1）：1－6.

［5］ 侯一平，吳瑾，顏靜，等.考慮突變影響的親子鑒定父權指數計算［J］.中華醫(yī)學遺傳學雜志，2008，25（2）：176－178.

［6］ 朱運良，黃艷梅，伍新堯，等.單親案親權鑒定結果判定策略［J］.法醫(yī)學雜志，2006，22（4）：281－284.

［7］ 邵偉波，張素華，李莉，等.21個非CODIS STR基因座的遺傳多態(tài)性 ［J］.法醫(yī)學雜志，2011，27（1）：36－38.