吳敏華，蔡 葵，劉棋楓

（佛山市第一人民醫(yī)院輸血科，廣東 528000）

Rh血型抗原抗體檢測(cè)對(duì)保障輸血安全的意義

吳敏華，蔡 葵，劉棋楓

（佛山市第一人民醫(yī)院輸血科，廣東 528000）

目的探討Rh血型系統(tǒng)抗原、抗體檢測(cè)在安全輸血中的意義。方法對(duì)2012年8月至2013年5月在該院住院的2 700例輸血患者進(jìn)行Rh系統(tǒng)抗原表型檢驗(yàn)和抗體篩查。結(jié)果Rh血型抗原表型所占比例由高到低依次為CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、CCDEe，5種抗原基因頻率由高到低依次為D、e、C、c、E。結(jié)論對(duì)于接收輸血者及供血者，除了要做必需的常規(guī)檢查外還應(yīng)進(jìn)行其他4種Rh血型抗原表型的檢查及相應(yīng)抗體的鑒定，從而避免因輸血而產(chǎn)生免疫性抗體，給患者再次輸血帶來困難。

Rh血型系統(tǒng)； 抗原； 抗體； 基因頻率； 輸血安全

Rh系統(tǒng)是一種極為復(fù)雜的血型系統(tǒng)，紅細(xì)胞上的Rh復(fù)合物存在豐富的抗原表位，具有很強(qiáng)的免疫原性，在臨床輸血中，其重要性僅次于ABO系統(tǒng)。在一般的常規(guī)交叉配血中，Rh血型只檢測(cè)D抗原，并沒有對(duì)E、C、c、e這些抗原進(jìn)行檢查，但某些患者在接受多次輸血或孕婦多次分娩后，血液中會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)抗體，再次輸血時(shí)可能會(huì)引起輸血反應(yīng)。本院輸血科對(duì)2 700例輸血患者進(jìn)行了Rh抗原表型和Rh抗體檢測(cè)，通過回顧性分析這些患者Rh（D）、Rh（C）、Rh（c）、Rh（E）、Rh（e）血型抗原以及相應(yīng)抗體的分布情況，旨在探討Rh血型系統(tǒng)抗原、抗體檢測(cè)在安全輸血中的意義，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年8月至2013年5月于本院住院并進(jìn)行輸血的2 700例患者，其中男1 252例、女1 448例，年齡6～82歲。

1.2 儀器與試劑 抗D（IgM＋I(xiàn)gG）、抗C、抗c、抗E、抗e抗體（來自上海血液生物制劑中心），抗體篩選細(xì)胞（一套3種）和譜細(xì)胞（一套10種）為上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任公司產(chǎn)品，抗人球微柱凝膠反應(yīng)卡為強(qiáng)生公司產(chǎn)品。主要儀器包括孵育儀（美國(guó)強(qiáng)生公司產(chǎn)品）與離心機(jī)（貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品）。

1.3 方法

1.3.1 Rh抗原檢測(cè) 取小試管5支，分別標(biāo)記“抗D”、“抗C”、“抗E”、“抗c”、“抗e”，按標(biāo)記分別加入用于分型的抗D（IgG＋I(xiàn)gM）、抗C、抗E、抗c、抗e抗體血清1滴，再分別加入5%受檢者紅細(xì)胞懸液一滴，混勻，以1 000×g離心15s，將試管輕輕搖動(dòng)，用肉眼觀察有無凝集或溶血現(xiàn)象。

1.3.2 結(jié)果判斷 如凝集則表示受檢者紅細(xì)胞上有相應(yīng)抗原；若無凝集則表示受檢者紅細(xì)胞上無相應(yīng)抗原。用5種抗Rh血清可檢測(cè)18種抗原表型。

1.3.3 Rh抗體檢測(cè) 先用抗體篩選譜細(xì)胞（一套3種）進(jìn)行意外抗體篩選，抗人球微柱凝膠反應(yīng)卡各加入0.8%～1%試劑紅細(xì)胞懸液50μL，然后加入患者血清50μL，在孵育儀37℃孵育15min，1 000r/min離心10min，肉眼觀察結(jié)果，紅細(xì)胞均勻沉于管底者為陰性，懸浮于凝膠表面或凝膠中段者為陽(yáng)性。對(duì)意外抗體陽(yáng)性的標(biāo)本用10種譜細(xì)胞進(jìn)行抗體類型鑒定（方法同上），然后統(tǒng)計(jì)Rh系統(tǒng)陽(yáng)性抗體。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)的錄入與計(jì)算采用Excel 2003軟件進(jìn)行。

2 結(jié) 果

檢測(cè)為E抗原陰性的有1 695例（62.8%），c抗原陰性的有1 502例（55.6%），e抗原陰性有137例（5.1%），C抗原陰性有193例（7.1%），D抗原陰性有7例（0.26%）。Rh血型抗原表型所占比例由高到低依次為CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、CCDEe；5種抗原陰性所占百分率由高到低依次為E、c、C、e、D。其中，D抗原陽(yáng)性而E陰性1 692例（62.6%），D抗原陽(yáng)性而c陰性1 501例（55.6%），D抗原陽(yáng)性而C陰性191例（7.1%），D抗原陽(yáng)性而e陰性138例（5.1%）。見表1。

2 700例患者D、C、c、E、e抗原頻率和基因頻率分布，見表2。抗原頻率為該抗原陽(yáng)性例數(shù)與統(tǒng)計(jì)總例數(shù)之比；基因頻率計(jì)算根據(jù)Hardy－Weinberg定律，采用文獻(xiàn)［1］的方法。結(jié)果得出5種抗原基因頻率由高到低依次為D、e、C、c、E。Rh血型系統(tǒng)抗體分布，見表3

3 討 論

天然產(chǎn)生的Rh抗體極為少見，幾乎所有的Rh抗體都是由于輸入血型不合的血液或母體Rh血型不合的妊娠等同種免疫作用而產(chǎn)生［2－4］。筆者對(duì)本院2 700例輸血患者進(jìn)行Rh血型系統(tǒng)抗原及產(chǎn)生的意外抗體分類，發(fā)現(xiàn)Rh血型抗原表型所占比例由高到低依次為：CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、CCDEe。5種抗原基因頻率由高到低依次為D、e、C、c、E；5種抗原陰性所占比例由高到低依次為E、c、C、e、D。從表1可以看出E抗原陰性的比例最高（62.8%），其次是c抗原（55.6%）。表3顯示檢出的20例抗體陽(yáng)性者中，抗E抗體11例（55%），比例最高，其次是抗c、抗cE聯(lián)合抗體分別是3例（15%）和2例（10%），符合抗原陽(yáng)性與陰性的百分率越接近，產(chǎn)生抗體的機(jī)會(huì)也越多的規(guī)律［5］。

本研究中，D抗原陽(yáng)性而E陰性者1 692例（62.6%），D抗原陽(yáng)性而c陰性1 501例（55.6%），D抗原陽(yáng)性而C陰性191例（7.1%），D抗原陽(yáng)性而e抗原陰性者138例（5.1%），而D抗原陽(yáng)性E、c聯(lián)合陰性者1 469例（54.4%）。這表明即使常規(guī)檢測(cè)Rh（D）抗原，輸血過程中也可能因其他4種抗原－抗體反應(yīng)而產(chǎn)生溶血反應(yīng)。張杰等［6］報(bào)道因?yàn)镋、c抗原性較強(qiáng)，若E和c抗原陽(yáng)性血輸入的比例較高會(huì)導(dǎo)致E和c抗原為陰性的患者在反復(fù)多次輸血的情況下，體內(nèi)抗E和抗c抗體的滴度逐漸增加，最終可能發(fā)生溶血反應(yīng)。

雖然D抗原性最強(qiáng)，但中國(guó)漢族人Rh D抗原陰性率極低（0.26%），故抗D抗體少于Rh系統(tǒng)其他幾種抗原免疫產(chǎn)生的抗體，并且中國(guó)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求輸血前要常規(guī)檢查患者Rh D血型，并對(duì)Rh D陰性患者采用自身輸血、同型輸血或配合型輸血，避免了盲目輸血所致的免疫反應(yīng)，抗D產(chǎn)生的頻率有下降趨勢(shì)。表3中兩例D抗體陽(yáng)性者均為經(jīng)產(chǎn)婦懷孕兩次以上而產(chǎn)生。鑒于中國(guó)人E、c抗原頻率分布陰、陽(yáng)性接近的特點(diǎn)，接受輸血者與獻(xiàn)血者在Rh E、Rh c等抗原均未知情況下輸血，使得Rh E、Rh c陰性接受輸血者產(chǎn)生同種免疫的可能性大大增加，而在這方面造成疑難配血及新生兒溶血病的可能性也較歐洲的白種人多［7］。母親與新生兒Rh血型不合可引起不同程度的新生兒溶血病，朱碎永等［8］報(bào)道，由抗D及Rh其他系統(tǒng)抗體引起新生兒溶血病較其他血型系統(tǒng)多見（ABO血型系統(tǒng)除外），但后遺癥和病死率卻高于ABO系統(tǒng)，這些患兒母親都曾有妊娠史或輸血史。因此對(duì)產(chǎn)前尤其是對(duì)曾有過妊娠史或輸血史的孕婦做產(chǎn)前夫妻Rh血型和孕婦Rh免疫性抗體篩查極有必要，可以對(duì)新生兒溶血病做出早期診斷和治療，達(dá)到優(yōu)生優(yōu)育的目的。

在中國(guó)，人群中紅細(xì)胞血型意外抗體出現(xiàn)最多的是Rh血型系統(tǒng)，據(jù)蔡葵等［9］報(bào)道中統(tǒng)計(jì)，38例產(chǎn)生意外抗體的輸血患者中，Rh血型系統(tǒng)的抗體占了83%。不同種族人群紅細(xì)胞Rh血型遺傳多態(tài)性決定了其抗原表型存在差異，接受Rh血型抗原免疫的機(jī)率也不同，Rh血型抗體的檢出頻率及抗體特異性分布也存在人群及地區(qū)差異。伍偉健等［10］對(duì)佛山地區(qū)獻(xiàn)血員的分布頻率做了統(tǒng)計(jì)，與本院輸血患者的抗原分布頻率無明顯差異，因此會(huì)導(dǎo)致在輸血中產(chǎn)生抗體的概率較高，所以國(guó)內(nèi)目前僅常規(guī)檢測(cè)Rh D抗原是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。

綜上所述，對(duì)于接受輸血者及供血者，除作必需的常規(guī)檢查外還應(yīng)進(jìn)行Rh血型其他4種抗原類型檢查和相應(yīng)的抗體鑒定，以便輸血科及時(shí)篩選好Rh抗原類型相合的血液，滿足臨床需要，避免因輸血而產(chǎn)生免疫性抗體，給患者再次輸血帶來困難。

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The significance of Rh blood group antigen and antibody detection in guaranteeing the safety of blood transfusion

Wu Minhua，Cai Kui，Liu Qifeng
（Department of Blood Transfution，the First Hospital of Foshan，Guangdong528000，China）

ObjectiveInvestigate the significance of the antibody and antigen detection of Rh blood group.MethodsDetecting Rh blood group antigen phenotypes and screen Rh blood group antibodies in 2 700inpatients from August 2012to May 2013.ResultsRh blood group antigen phenotypes in descending order of propotion were as follows：CCDee，CcDEe，CcDee，ccDEE，CCDEe.5antigen genes in descending order of frequency were D，e，C，c，E.ConclusionFor donors and donees，in addition to routine tests，the other 4types of antigen and antibodies in Rh blood group should be detected too，which helps avoid secondary transfusion difficulty because of the immunity antibodies generated in blood transfusion.

Rh blood group； antibody； antigen； gene frequency； transfusion safety

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.009

A

1673－4130（2015）03－0308－03

2014－10－10）

吳敏華，女，主管檢驗(yàn)技師，主要從事臨床輸血與檢驗(yàn)的相關(guān)研究。