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      T淋巴細(xì)胞功能及檢測(cè)方法*

      2015-03-21 05:39:58劉晨霞綜述吳麗娟審校
      關(guān)鍵詞:靶細(xì)胞抗原淋巴細(xì)胞

      但 剛,劉晨霞 綜述,吳麗娟審校

      (成都軍區(qū)總醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究與保障中心檢驗(yàn)科,四川 成都 610083)

      T淋巴細(xì)胞功能及檢測(cè)方法*

      但 剛,劉晨霞 綜述,吳麗娟△審校

      (成都軍區(qū)總醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究與保障中心檢驗(yàn)科,四川 成都 610083)

      T淋巴細(xì)胞; 免疫; 分化; 功能檢測(cè)

      經(jīng)典免疫反應(yīng)中T淋巴細(xì)胞是參與機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng),并在免疫應(yīng)答中起重要調(diào)節(jié)作用的免疫細(xì)胞。正常情況下T細(xì)胞及其亞群的數(shù)目在周圍組織中相對(duì)穩(wěn)定,但機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生變化,各類免疫細(xì)胞尤其是T淋巴細(xì)胞的數(shù)量比例及其功能也隨之發(fā)生相應(yīng)的變化。因此通過(guò)對(duì)T淋巴細(xì)胞功能的認(rèn)識(shí),檢測(cè)其數(shù)量比例,進(jìn)行功能試驗(yàn)的檢測(cè),可以為機(jī)體的免疫狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估。本文就T淋巴細(xì)胞的功能及檢測(cè)方法作一綜述。T淋巴細(xì)胞簡(jiǎn)稱T細(xì)胞,來(lái)源于骨髓的淋巴樣前祖細(xì)胞。在人體胚胎期和初生時(shí)期,部分多能干細(xì)胞或前T細(xì)胞從骨髓遷移到胸腺內(nèi),在胸腺激素的作用下誘導(dǎo)發(fā)育分化成熟,最終發(fā)育成為有免疫活性的T細(xì)胞,與B細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞共同參與了人體的免疫應(yīng)答。

      1 T淋巴細(xì)胞亞群及其功能

      T淋巴細(xì)胞依據(jù)因其CD3分子以外的其他表而標(biāo)記物,以及生物學(xué)功能不同,而分為許多亞群,各亞群T細(xì)胞既相互協(xié)作,又有各自的功能特點(diǎn),共同完成免疫應(yīng)答并發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。

      1.1 TCRαβ+T細(xì)胞和TCRγδ+T細(xì)胞 T細(xì)胞表面具有許多重要的膜分子,是區(qū)分T細(xì)胞及T細(xì)胞亞群的重要標(biāo)志。T細(xì)胞抗原受體(TCR)為所有T細(xì)胞均表達(dá)的特征性標(biāo)志,與CD3分子結(jié)合,形成TCR-CD3復(fù)合物。TCR有α、β、γ、δ四種類型的肽鏈,根據(jù)表達(dá)類型的不同,T細(xì)胞可分為T(mén)CRαβ+T細(xì)胞和TCRγδ+T細(xì)胞。兩者主要區(qū)別在于:前者具有TCR多樣性,具有自身MHC限制性;后者識(shí)別非肽類分子,其抗原受體缺乏多樣性,僅能識(shí)別多種病原體表達(dá)的共同抗原成分。兩者殺傷機(jī)制相同,活化后通過(guò)分泌細(xì)胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。

      1.2 Th、CTL和Tr細(xì)胞 根據(jù)免疫效應(yīng)功能,T淋巴細(xì)胞可分為:輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(Tc或CTL)、調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Tr)。這些細(xì)胞實(shí)際上是初始CD4+T細(xì)胞或初始CD8+T細(xì)胞活化后分化成的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞。

      1.2.1 輔助性T細(xì)胞 該細(xì)胞為CD4+T細(xì)胞,識(shí)別抗原時(shí)受MHC-Ⅱ類分子限制,根據(jù)分泌的細(xì)胞因子不同分為T(mén)h0、Th1、Th2和Th3四個(gè)亞型[1],發(fā)揮不同的免疫效應(yīng)。

      1.2.2 Th1細(xì)胞 Th1細(xì)胞在機(jī)體中抗胞內(nèi)病原體感染發(fā)揮重要作用,主要介導(dǎo)細(xì)胞毒及局部炎癥相關(guān)的免疫應(yīng)答,輔助抗體生成以參與細(xì)胞免疫和遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生。其分泌白細(xì)胞介素(IL)-2、干擾素(IFN)-α、IFN-γ、TNF-δ等。

      1.2.3 Th2細(xì)胞 主要參與機(jī)體的體液免疫,刺激B細(xì)胞增殖,生成免疫球蛋白IgG1和IgE抗體。其主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10。

      1.2.4 Th3細(xì)胞 主要作用為通過(guò)降低抗原遞呈細(xì)胞(APC)和Th1細(xì)胞的活性,起到免疫抑制的作用。其主要分泌IL-4和IL-10外,還大量表達(dá)TGF-δ,但不會(huì)分泌IL-2和IFN-γ。

      1.2.5 細(xì)胞分化 Th0細(xì)胞又稱前體細(xì)胞,主要分化為T(mén)h1,Th2和Th3細(xì)胞。未接觸抗原的T細(xì)胞被稱為T(mén)h細(xì)胞前體。細(xì)胞前體通過(guò)接觸天然免疫細(xì)胞攝取的抗原,進(jìn)而分化成一種不確定的狀態(tài)稱為T(mén)h0細(xì)胞。Th0細(xì)胞同時(shí)分泌Th1型細(xì)胞因子IL-2和IFN-γ,而且分泌Th2型細(xì)胞因子IL-4,并且可在不同信號(hào)的刺激下分別分化為T(mén)h1或Th2細(xì)胞。當(dāng)機(jī)體生理功能正常時(shí),為了維持機(jī)體主要的細(xì)胞免疫和體液免疫功能,Th1和Th2細(xì)胞相互間處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài);而當(dāng)機(jī)體受到外來(lái)刺激或某種抗原攻擊時(shí),Th1細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答功能和Th2細(xì)胞主導(dǎo)的體液免疫功能選擇性增強(qiáng),而另一功能則選擇性降低,這種現(xiàn)象稱為T(mén)h1/Th2漂移。在微環(huán)境中,細(xì)胞因子的種類是影響Th細(xì)胞分化的關(guān)鍵因素。通常認(rèn)為,在抗原的刺激下,由于不同的內(nèi)部微環(huán)境影響,Th0細(xì)胞會(huì)選擇性地分化為T(mén)h1或Th2細(xì)胞。

      1.2.6 細(xì)胞毒性T細(xì)胞 該細(xì)胞為CD8+T細(xì)胞,具有細(xì)胞毒作用,可殺傷病毒等細(xì)胞內(nèi)寄生物感染的靶細(xì)胞;也具有免疫調(diào)節(jié)作用。該類細(xì)胞識(shí)別抗原具有MHC-Ⅰ類分子的限制性;殺傷靶細(xì)胞具有抗原特異性等作用特點(diǎn)。CTL殺傷靶抗原的機(jī)制為:(1)表達(dá)Fas配體(FasL)與靶抗原(包括被感染細(xì)胞和癌細(xì)胞等)表而Fas分子交聯(lián),激發(fā)其凋亡的發(fā)生;(2)分泌穿孔素溶解靶細(xì)胞膜;(3)分泌細(xì)胞因子如IFN-γ、TNF-α和TNF-β等,抑制或破壞靶抗原DNA合成。CD8+T淋巴細(xì)胞是旱期抗感染和抗腫瘤最主要的免疫細(xì)胞[2]。

      1.2.7 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 Tr細(xì)胞亞群主要通過(guò)抑制性調(diào)節(jié)CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的活化與增值,達(dá)到免疫負(fù)調(diào)節(jié)的作用。

      2 T淋巴細(xì)胞的相關(guān)試驗(yàn)

      2.1 T淋巴細(xì)胞數(shù)量檢測(cè) 臨床上各種類型的免疫缺陷癥、自身免疫疾病以及腫瘤等疾病均可表現(xiàn)出淋巴細(xì)胞的數(shù)量比例的變化,因此檢測(cè)外周淋巴細(xì)胞的數(shù)量、比例,有助于判斷機(jī)體細(xì)胞水平,對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)發(fā)展,對(duì)患者病情的變化,對(duì)臨床診療的指導(dǎo)均有十分重要的意義。目前T淋巴細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)主要有以下方法:(1)免疫熒光法,通過(guò)直接或間接檢測(cè)T細(xì)胞標(biāo)志物,確定T細(xì)胞亞群及比例。如CD3+、CD4+、CD8+、免疫球蛋白等。(2)磁珠分離法,可利用已知抗細(xì)胞表面標(biāo)記的抗體交聯(lián)于微珠,與細(xì)胞懸液反應(yīng),磁珠借助抗體結(jié)合于相應(yīng)的細(xì)胞表面,將懸液傾入試管并置于磁場(chǎng)中,結(jié)合磁珠的細(xì)胞最終與未結(jié)合磁珠的細(xì)胞分離,即可得到高純度的含有已知細(xì)胞表面標(biāo)記物的細(xì)胞群或亞群。如采用抗CD3特異性抗體IMB,即可分離T淋巴細(xì)胞。(3)淘選法,將已知抗細(xì)胞表面標(biāo)記的抗體包被培養(yǎng)皿,加入淋巴細(xì)胞懸液,表達(dá)該細(xì)胞表面標(biāo)記的細(xì)胞貼附于固相上,與其他細(xì)胞分離。(4)流式細(xì)胞術(shù),流式細(xì)胞術(shù)是借助熒光激活細(xì)胞分選器,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行快速而準(zhǔn)確鑒定、分類的技術(shù)。流式技術(shù)常常用于T淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)。Ahn等[3]利用流式細(xì)胞內(nèi)因子染色技術(shù),檢測(cè)結(jié)合人乳頭瘤病毒E7亞單位瘤苗和重組腺病毒AdIL-12使用時(shí),所引起的CTL反應(yīng)強(qiáng)度。Suzuki等[4]使用流式細(xì)胞胞內(nèi)細(xì)胞因子分析法,鑒定了結(jié)核分枝桿菌保護(hù)性抗原的CTL表位。

      2.2 T淋巴細(xì)胞的功能檢測(cè) 機(jī)體免疫系統(tǒng)具有免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視功能。免疫細(xì)胞是主要的參與者,因此針對(duì)其功能設(shè)計(jì)的檢測(cè)技術(shù),往往比單獨(dú)測(cè)定淋巴細(xì)胞或其亞群的數(shù)量更能反映免疫細(xì)胞的功能及機(jī)體免疫功能的狀態(tài)。故通常采用以下技術(shù)評(píng)價(jià)T細(xì)胞的功能。

      2.2.1 T細(xì)胞增殖試驗(yàn) 在體外培養(yǎng)的環(huán)境下,特定抗原(結(jié)核菌素)或非特定的有絲分裂原,如植物血凝素(PHA)、豆刀蛋白A(Con A)會(huì)刺激淋巴細(xì)胞代謝和形態(tài)變化,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸和成增加,從而致使T細(xì)胞發(fā)生一系列增殖反應(yīng)。檢測(cè)方法主要為以下幾種。(1)形態(tài)學(xué)方法。T細(xì)胞增殖反應(yīng),形態(tài)學(xué)上主要表現(xiàn)為:細(xì)胞變大,胞質(zhì)增多、胞質(zhì)出現(xiàn)空泡、核染色質(zhì)疏松、核仁明顯,轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。借助光學(xué)顯微鏡鏡檢,計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,按以上形態(tài)變化特點(diǎn)為依據(jù)分類計(jì)數(shù),計(jì)算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,在一定程度上評(píng)價(jià)細(xì)胞免疫功能。該方法簡(jiǎn)單、成本低、適合基層實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展,但主觀性較強(qiáng),易受實(shí)驗(yàn)人員的專業(yè)素質(zhì)、能力經(jīng)驗(yàn)等影響。(2)放射性核素?fù)饺敕ǎ涸诹馨图?xì)胞與絲裂原共同培養(yǎng)終止前,加入放射性核素3H-TdR,其被轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞攝取而摻入新合成的DNA中。用液體閃爍儀測(cè)定放射性核素量,記錄每分鐘的脈沖數(shù)(cpm),計(jì)算刺激指數(shù)(SI),判斷淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化程度。該方法優(yōu)于形態(tài)學(xué)檢查,避免了主觀因素影響,但有放射性危害缺點(diǎn)[5]。(3)MTT法:其原理為活細(xì)胞線粒體含有琉拍酸脫氫酶,能使加入的MTT還原為難溶性的結(jié)晶物formazan并沉積在細(xì)胞中。依據(jù)此原理,將淋巴細(xì)胞與絲裂原共同培養(yǎng),培養(yǎng)一段時(shí)間后加入MTT,再加入SDS裂解液,溶解細(xì)胞中的結(jié)晶物甲瓚,結(jié)晶物呈紫色,利用比色儀在570nm波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度[6-7]。活細(xì)胞數(shù)與MTT結(jié)晶物形成的量成正相關(guān),增殖生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞產(chǎn)生的MTT更多,其吸光度更高,反之,則吸光度則更低[8]。MTT法排除形態(tài)觀察法的主觀差異性,避免同位素?fù)饺朔ǖ牟环€(wěn)定性和放射性污染,具有大量樣本快速檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn),故更適于T淋巴細(xì)胞的增殖功能和免疫功能評(píng)價(jià)[9-11]。

      2.2.2 T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn) CTL經(jīng)抗原刺激,可特異性殺傷相應(yīng)的靶細(xì)胞,主要通過(guò)細(xì)胞裂解和細(xì)胞凋亡兩種機(jī)制,對(duì)靶細(xì)胞表現(xiàn)出破壞和溶解作用,可用以下方法評(píng)價(jià)CTL殺傷活性:(1)形態(tài)學(xué)方法,待檢CTL與靶細(xì)胞混合培養(yǎng),瑞士染色后鏡檢,計(jì)數(shù)殘余腫瘤細(xì)胞數(shù),計(jì)算CTL細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率。該法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便易行,一般實(shí)驗(yàn)室即可開(kāi)展,缺點(diǎn)是受人員主觀影響大。(2)51Cr釋放法,51Cr釋放法創(chuàng)建于1960年,是測(cè)定CTL功能經(jīng)典方法,是評(píng)價(jià)抗原特異性CTL反應(yīng)的金標(biāo)準(zhǔn)。該法用51Cr標(biāo)記的靶細(xì)胞與效應(yīng)性CTL相互作用,靶細(xì)胞可釋放51Cro,測(cè)定51Cro產(chǎn)生的放射性,即可判定效應(yīng)細(xì)胞CTL的細(xì)胞毒活性。用相同的方法也可測(cè)定NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性。此方法結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好。但同時(shí)存在以下不足:51Cr半衰期短,只有27.8d,不能進(jìn)行多次測(cè)定;51Cr釋放法為定性分析;不能在單細(xì)胞水平測(cè)定;由于從外周血中直接采取得到的效應(yīng)細(xì)胞很少,需進(jìn)行多次體外刺激,取得效應(yīng)細(xì)胞,故而可能會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞的組成及活性與體內(nèi)狀態(tài)不同[12-13]。(3)LDH釋放法,在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞死亡數(shù)目與細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH活性成正比,所以,測(cè)定實(shí)驗(yàn)孔上清液中LDH活性,并與靶細(xì)胞對(duì)照孔中LDH活性進(jìn)行比較,即可計(jì)算出效應(yīng)細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷百分率[13]。LDH釋放法的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需預(yù)標(biāo)靶細(xì)胞,能夠避免同位素?fù)饺敕ǖ牟环€(wěn)定性和放射性污染。同時(shí)排除了細(xì)胞形態(tài)觀察法的人為主觀差異,能夠進(jìn)行大樣本快速檢測(cè)。LDH釋放法的缺點(diǎn)是效應(yīng)細(xì)胞作用于靶細(xì)胞后會(huì)有不同程度的細(xì)胞損傷,進(jìn)而釋放LDH,LDH可能存在部分自發(fā)釋放現(xiàn)象,都會(huì)影響到細(xì)胞活性毒性檢測(cè)。(4)基因轉(zhuǎn)染法,將具生物功能的核酸轉(zhuǎn)移或運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi),并使核酸維持其生物功能。利用其技術(shù),將熒光素酶(luc)或β半乳糖普酶(β-gal)之類的報(bào)告酶基因轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞,建立轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞系,測(cè)定CTL介導(dǎo)的細(xì)胞毒。通過(guò)測(cè)定釋放入培養(yǎng)液中的報(bào)告酶的活性,即計(jì)算出效應(yīng)細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的百分率。在實(shí)驗(yàn)中,β-gal因半衰期較長(zhǎng)而實(shí)際應(yīng)用較多[14]。

      2.2.3 T細(xì)胞分泌功能檢測(cè) T淋巴細(xì)胞活化后,能夠分泌如IL-2、IFN-γ、TNF-α等具有功能的細(xì)胞因子。根據(jù)細(xì)胞因子不同,可以區(qū)分出不同功能的細(xì)胞,如記憶細(xì)胞或效應(yīng)細(xì)胞。常用的檢測(cè)細(xì)胞分泌功能的方法有酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)、固相酶聯(lián)斑點(diǎn)法(ELISPOT)、PCR/RT、PCR及細(xì)胞內(nèi)因子檢測(cè)方法等。

      2.3 免疫學(xué)檢測(cè)

      2.3.1 ELISA ELISA是利用抗原與抗體的特異反應(yīng)來(lái)進(jìn)行定量檢測(cè)的方法。ELISA法可直接檢測(cè)細(xì)胞因子(如IL-2、IFN-γ或TNF-α)水平,也可用于測(cè)定激活的淋巴細(xì)胞(諸如LAK或CIK細(xì)胞)培養(yǎng)液中各細(xì)胞因子水平。ELISA法檢測(cè)的是細(xì)胞因子的總量,無(wú)法檢測(cè)出單一細(xì)胞的信息,也不能準(zhǔn)確估算抗原特異性T淋巴細(xì)胞的數(shù)量,而且,它不能檢測(cè)被抗原刺激后上的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力[15]。

      2.3.2 ELISPOT ELISPOT技術(shù)是基于酶聯(lián)免疫標(biāo)記技術(shù)的原理建立的。CTL細(xì)胞受抗原刺激后分泌具有功能的細(xì)胞因子,即可被預(yù)包埋的抗體捕獲,在局部形成斑點(diǎn)數(shù)目,通過(guò)檢測(cè)斑點(diǎn)數(shù),即可得出T淋巴細(xì)胞頻數(shù),進(jìn)而反映出CTL的活性。此方法具有較高的靈敏度。Bilhl等[14]使用循環(huán)ELLSPOT技術(shù),用少量外周血標(biāo)本,檢測(cè)了HIV病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、HBV病毒及HCV病毒等5種病毒的近400個(gè)CTL表位所引起的抗病毒免疫,結(jié)果顯示與普通ELLSPOT檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。此技術(shù)可用于評(píng)價(jià)多重病毒感染所引起的細(xì)胞免疫[16]。ELISPOT的優(yōu)點(diǎn)在于:敏感性很高;特異性很強(qiáng);且可直接檢測(cè)T淋巴細(xì)胞;能反復(fù)檢測(cè)多種細(xì)胞因子;同時(shí)反映其功能,與臨床結(jié)果具有較好的相關(guān)性。ELISPOT法缺點(diǎn):所檢測(cè)的T淋巴細(xì)胞必須分泌目標(biāo)細(xì)胞因子,如果不能分泌目標(biāo)細(xì)胞因子,就有可能導(dǎo)致特異性細(xì)胞的數(shù)量測(cè)定的降低。除了CTL外,(CD3+和CD4+)、NK細(xì)胞等一些輔助T淋巴細(xì)胞也能分泌類似的細(xì)胞因子,故還需結(jié)合細(xì)胞表型進(jìn)行分析[17]。

      2.3.3 染色細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞因子 此法是檢測(cè)人循環(huán)淋巴細(xì)胞中抗原特異性T淋巴細(xì)胞的可行方法。先在體外培養(yǎng)、刺激、活化細(xì)胞,使用Brefeldin A封閉細(xì)胞因子的分泌,使其在細(xì)胞內(nèi)累積。使用生物素或熒光標(biāo)記的CD4+或CD8+的mAb對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)志物染色,再經(jīng)去污劑固定,同時(shí)增高細(xì)胞通透性,最終使抗細(xì)胞因子熒光抗體結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)從而達(dá)到染色的目的。這種方法應(yīng)用細(xì)胞內(nèi)累積細(xì)胞因子進(jìn)行染色[18]。

      2.3.4 生物活性檢測(cè) 根據(jù)細(xì)胞因子的獨(dú)特生物學(xué)活性,選用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)體系,包括細(xì)胞增殖法、直接殺傷法、保護(hù)細(xì)胞免受病毒致病變法等。要求選用的細(xì)胞株增殖反應(yīng)水平與細(xì)胞因子濃度成正相關(guān),如IL-1、IL-2、IL-4及IL-6水平等。

      2.3.5 基因水平的檢測(cè) 通過(guò)PCR、RT-PCR或熒光定量PCR方法,可對(duì)細(xì)胞因子的DNA或RNA進(jìn)行檢測(cè)。它可以檢測(cè)一種或多種目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄水平,是一種較準(zhǔn)確的分子生物學(xué)方法。有學(xué)者曾用熒光定量RT-PCR法分析了冷凍保存的健康人血標(biāo)本中的細(xì)胞因子mRNA水平[19]。該法同時(shí)作為檢測(cè)免疫反應(yīng)的指標(biāo)應(yīng)用于腫瘤免疫的臨床試驗(yàn)中。熒光定量RT-PCR基本上不需要任何體外刺激步驟,即可準(zhǔn)確檢測(cè)抗原特異性T淋巴細(xì)胞的數(shù)目,是目前最敏感的細(xì)胞因子檢測(cè)技術(shù)[11,20]。

      3 小結(jié)與展望

      淋巴細(xì)胞,尤其是T淋巴細(xì)胞在機(jī)體免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要的作用。通過(guò)深入研究分析T淋巴細(xì)胞的功能,可以充分認(rèn)識(shí)免疫應(yīng)答的相應(yīng)環(huán)節(jié),進(jìn)一步研究機(jī)體免疫反應(yīng)有著重要意義。各種功能試驗(yàn)的認(rèn)識(shí),能直觀有效的評(píng)價(jià)機(jī)體的免疫狀態(tài),了解患者病情的發(fā)生發(fā)展,指導(dǎo)臨床診斷治療,評(píng)價(jià)臨床療效。另外,掌握各個(gè)功能試驗(yàn)的原理,舉一反三,有利于不斷的改進(jìn)優(yōu)化。

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      10.3969/j.issn.1673-4130.2015.03.039

      A

      1673-4130(2015)03-0377-04

      2014-10-01)

      成都軍區(qū)總醫(yī)院院管課題(42412E1A)。 作者簡(jiǎn)介:但剛,主管技師,主要從事臨床血液學(xué)檢驗(yàn)的研究?!?/p>

      ,E-mail:wulijuan1638@126.com。

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