張立敏,李 巖,胡金川，菅 強(qiáng)

(中國人民解放軍第281醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 秦皇島 066100)

電泳法解析尿干化學(xué)法蛋白質(zhì)定性與免疫比濁法尿微量白蛋白定量結(jié)果不符2例

張立敏,李 巖,胡金川，菅 強(qiáng)

(中國人民解放軍第281醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 秦皇島 066100)

蛋白尿是腎病的重要臨床癥狀，同時(shí)也和許多可導(dǎo)致腎功能損傷的其它疾病密切相關(guān)，如糖尿病、高血壓、冠心病、過敏性紫癜[1-4]等。腎臟損傷早期患者尿液中即可出現(xiàn)蛋白質(zhì)，其敏感性高于血液生化指標(biāo)。尿液檢測簡便、無損傷性，是常規(guī)檢查手段。尿液分析儀檢測尿蛋白(干化學(xué)試帶法，定性)和生化分析儀測尿微量白蛋白(免疫比濁法，定量)是尿液蛋白檢查的兩種常用方法，前者包含于尿常規(guī)檢查中。干化學(xué)試帶法靈敏性和特異性均不及免疫比濁法[5]，一般情況下，輕微腎損傷時(shí)，干化學(xué)試帶法尿蛋白質(zhì)陰性，而免疫比濁法測尿微量白蛋白異常；當(dāng)腎損傷加重至一定程度時(shí)，干化學(xué)試帶法出現(xiàn)尿蛋白陽性，而免疫比濁法尿微量白蛋白亦顯著升高，表明在腎損傷的早期診斷中，尿微量白蛋白檢測比尿常規(guī)蛋白質(zhì)檢測更有價(jià)值。但我們近期發(fā)現(xiàn)2例干化學(xué)試帶法檢測尿蛋白為陽性(排除假陽性)而尿微量白蛋白免疫比濁法定量測定為正常病例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 病例介紹

病例1，男，17歲，因間斷腹痛2月余，關(guān)節(jié)痛40 d，雙下肢皮膚出血點(diǎn)二十余天住院，之前曾于當(dāng)?shù)蒯t(yī)院B超檢查肝、膽、脾、胰未見異常，遂未做處治。當(dāng)天本院門診查抗“O”陰性，尿常規(guī)未見異常，血常規(guī)、血腎功、血糖、血脂未見異常，谷丙轉(zhuǎn)氨酶44 IU·L-1。尿微量白蛋白73.9 mg·L-1，NAG酶13 IU·L-1，半乳糖苷酶21 IU·L-1。住院檢查心電圖未見異常，CT掃描心、肺、膈未見異常。診斷：過敏性紫癜，紫癜性腎炎。我們在常規(guī)檢驗(yàn)工作中發(fā)現(xiàn)此病人同一尿標(biāo)本干化學(xué)試帶法測蛋白質(zhì)陽性(+)，而免疫比濁法測微量白蛋白4.1 mg·L-1，在正常范圍(0～30 mg·L-1)內(nèi)。

病例2，男，25歲，因間斷腹痛，黑便，雙下肢皮膚出血點(diǎn)、淤斑一月余住院。住院查體抗“O”陰性，尿常規(guī)蛋白微量(±)，血常規(guī)、血糖、腎功正常，血沉41 mm·h-1，谷丙轉(zhuǎn)氨酶59 IU·L-1，超敏C反應(yīng)蛋白19.54 mg·L-1。尿微量白蛋白14.4 mg·L-1，NAG酶11 IU·L-1，半乳糖苷酶33 IU·L-1。心電圖檢查未見異常，超聲肝、膽、胰、脾、雙腎未見異常。診斷：過敏性紫癜。我們觀察到該病例同一尿液標(biāo)本檢查中有三次干化學(xué)試帶法尿蛋白質(zhì)均微量(±)，而免疫比濁法測尿微量白蛋白結(jié)果分別為14.4、4.6和13.8 mg·L-1，均在正常范圍內(nèi)。

2 討 論

過敏性紫癜(HSP)是以急性毛細(xì)血管炎為主的變態(tài)反應(yīng)性疾病，常伴有不同程度的腎功能損害，尿液蛋白質(zhì)檢測有助于評價(jià)患者腎功能,對腎損害的早期診斷、病情監(jiān)測和預(yù)后判斷具有重要意義。正常情況下，人尿液中有少量蛋白存在，但由于其濃度很低，普通方法難以檢出，如干化學(xué)試帶法。尿中蛋白質(zhì)包括白蛋白、球蛋白、血紅蛋白、本周蛋白和粘蛋白等，尿常規(guī)檢查采用的干化學(xué)試帶法蛋白反應(yīng)區(qū)主要對尿中白蛋白靈敏，但也能檢測其它蛋白質(zhì)，因此，尿中任何一種或多種蛋白質(zhì)含量達(dá)到其檢出限，結(jié)果即可表現(xiàn)為陽性，該法不具有特異性。微量白蛋白指的是在尿液中含量甚微的白蛋白，白蛋白是小分子蛋白質(zhì)，當(dāng)腎小球損傷，白蛋白含量又超過腎小管的重吸收能力后，尿液中白蛋白會(huì)隨著病情的加重而逐漸增多。采用免疫比濁法檢測尿微量白蛋白具有靈敏度高、特異性好的優(yōu)點(diǎn)，在腎小球損傷時(shí)會(huì)先于尿常規(guī)檢查發(fā)生變化。有文獻(xiàn)報(bào)道，當(dāng)總蛋白超出參考值5倍時(shí)，白蛋白可達(dá)參考值的25倍，所以尿白蛋白比總蛋白更能敏感地反映腎臟早期病變，對糖尿病、高血壓、過敏性紫癜、早期腎小球腎炎及其它能引起早期腎損傷的病人具有更為重要的臨床意義[6]。

本次報(bào)道的2例病例兩種方法檢查尿蛋白結(jié)果不符，且尿微量白蛋白正常而尿常規(guī)蛋白質(zhì)陽性或弱陽性，與常規(guī)相反。為揭示其原因，我們做了如下工作：首先，排除假陽性干擾，干化學(xué)試帶法檢測尿蛋白質(zhì)引起假陽性的因素較多，對其主要因素進(jìn)行篩查，發(fā)現(xiàn)pH>8、高比重[5]、藥物[7]等導(dǎo)致假陽性的因素在這2例病例中均不存在；其次，通過做加熱乙酸法和磺基水楊酸法蛋白定性試驗(yàn)進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果均為陽性(+)；最后，采用電泳法確定尿中蛋白質(zhì)種類及比例，所用儀器為法國Sebia公司HYDRASYS型電泳儀，采用瓊脂糖凝膠電泳原理，依據(jù)蛋白質(zhì)分子量大小和帶電荷情況，使得尿中蛋白質(zhì)被分離成不同的蛋白區(qū)帶，對2例病例“問題”尿液進(jìn)行電泳，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2樣本電泳區(qū)帶白蛋白都明顯缺失，在白蛋白區(qū)帶前后均發(fā)現(xiàn)其它蛋白區(qū)帶且其峰度較高，表明檢測樣本中白蛋白含量甚微，故采用免疫比濁法檢測微量白蛋白無異常，而同一標(biāo)本干化學(xué)試帶法測蛋白質(zhì)陽性。此種情況通常與尿液中含有的球蛋白、血紅蛋白、本周蛋白、粘蛋白等大量增加有關(guān)，該2例病例血紅蛋白、本周蛋白均陰性。

我們對干化學(xué)試帶法測蛋白質(zhì)陽性的具體成分并未進(jìn)一步深究，因此，該2例病例兩種尿蛋白質(zhì)檢測方法結(jié)果不符的原因在于尿液中所含蛋白種類及其含量出現(xiàn)異常，導(dǎo)致結(jié)果異常的原因可能包括生理性和病理性的。如果檢驗(yàn)?zāi)康脑谟诿鞔_腎小球損傷，則應(yīng)以尿微量白蛋白檢查結(jié)果為準(zhǔn)，若為明確其它生理、病理狀態(tài)，則可參考尿常規(guī)檢查結(jié)果。

[1]蔣新潤.尿微量白蛋白檢查對糖尿病早期腎損傷的診斷意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2010，17(4)：342.

[2]陳旭明.高血壓患者檢測尿微量白蛋白的臨床意義[J].中國中醫(yī)藥咨訊，2010,2(2)：224.

[3]李衛(wèi)娟,胡小煒,周麗麗.尿微量蛋白測定對冠心病早期腎損害的臨床意義探討[J].放射免疫學(xué)雜志，2005,18(3)：235-236.

[4]王曉衛(wèi)，鐘天鷹，常勇，等.過敏性紫癜患兒尿微量白蛋白測定的意義[J].浙江臨床醫(yī)學(xué)，2009，11(12)：1365-1366.

[5]夏建新.尿液分析儀法與尿微量白蛋白檢測法尿蛋白結(jié)果之比較[J].中國醫(yī)藥指南，2005，3(3)：256-258.

[6]吳學(xué)飛.速率散射比濁法測定尿微量白蛋白[J].陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，1999，14(1)：62-63.

[7]邱兵,王旭東.尿蛋白檢測中藥物對分析的干擾[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18(1)：77-78.

[責(zé)任編輯：李薊龍]

張立敏(1981-)，女，技師，主要從事臨床生化檢驗(yàn)工作。

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10.3969/j.issn.1673-1492.2015.02.031

來稿日期：2014-11-18