莫祥蘭，黃永塔

(廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院，南寧530021)

鼻咽癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分子機(jī)制研究進(jìn)展

莫祥蘭，黃永塔

(廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院，南寧530021)

鼻咽癌(NPC)是EB病毒相關(guān)性惡性腫瘤，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移為其首要致死因素。癌基因與抑癌基因、細(xì)胞黏附和侵襲相關(guān)基因和microRNA表達(dá)失衡等與NPC轉(zhuǎn)移有關(guān)，找出敏感度和特異度高的預(yù)測NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)記物，及時發(fā)現(xiàn)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移潛能的NPC，及早采取有效措施，是進(jìn)一步提高NPC生存率的關(guān)鍵。

鼻咽癌；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；分子機(jī)制

鼻咽癌(NPC)是EB病毒相關(guān)性惡性腫瘤，廣西南部是高發(fā)區(qū)，發(fā)病率居該地區(qū)惡性腫瘤之首。雖然大部分病例對放療敏感，早期診治部分患者可治愈，但仍有部分患者死于NPC，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移為首要致死因素。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移是多因素參與、多步驟完成的分子生物學(xué)變化過程，涉及多種基因及多條信號傳導(dǎo)通路，包括細(xì)胞增殖與分化、細(xì)胞黏附與侵襲等等。本文對近年來NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分子機(jī)制相關(guān)研究綜述如下。

1 癌基因與抑癌基因表達(dá)失衡

癌基因與抑癌基因表達(dá)失衡與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。多種腫瘤相關(guān)基因表達(dá)異常與NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。研究已證實，癌基因C-met、EGFR、COX-2等異常表達(dá)與NPC的發(fā)生及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞新生，在部分人類惡性腫瘤中高表達(dá)。Lv等[1]發(fā)現(xiàn)，血清VEGF水平與NPC臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和總生存率有關(guān)，并為判斷其預(yù)后的獨(dú)立因子。 新近研究發(fā)現(xiàn)，Delta樣配體4 (DLL4)在部分NPC組織中表達(dá)上調(diào)，表達(dá)強(qiáng)度與VEGF表達(dá)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[2]。

既往研究認(rèn)為，p53、p16、nm23等抑癌基因突變或表達(dá)異常與NPC發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；近來研究發(fā)現(xiàn)，更多的抑癌基因異常與NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。最先從乳腺癌細(xì)胞株中鑒定出來的乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因1 (BRMS1)可抑制乳腺癌肺轉(zhuǎn)移，隨后體內(nèi)外實驗研究證實其還可抑制黑色素瘤、卵巢癌、膀胱癌、肺癌等惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。Cui等[3]研究發(fā)現(xiàn)，BRMS1在NPC組織和NPC細(xì)胞株中低表達(dá)，低表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及總生存率低密切相關(guān)；體內(nèi)外實驗證實，BRMS1可抑制NPC細(xì)胞遷移、侵襲和肺轉(zhuǎn)移。nm23為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，其失活與腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，表達(dá)水平與腫瘤轉(zhuǎn)移能力呈負(fù)相關(guān)。nm23-H1為nm23家族成員，在NPC組織中表達(dá)下調(diào)，低表達(dá)者易至遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且總生存率較低，多因素分析提示其為NPC預(yù)后的獨(dú)立因子[4]。

2 細(xì)胞黏附和侵襲相關(guān)基因表達(dá)失衡

腫瘤在侵襲轉(zhuǎn)移過程中，腫瘤細(xì)胞必須從原發(fā)灶黏附部位脫離，脫離原發(fā)灶的腫瘤細(xì)胞必須降解細(xì)胞外基質(zhì)，才能向外擴(kuò)散；黏附可抑制轉(zhuǎn)移，細(xì)胞外基質(zhì)降解可促進(jìn)轉(zhuǎn)移。已證實黏附因子、金屬基質(zhì)蛋白酶(MMPs)等表達(dá)異常與NPC轉(zhuǎn)移有關(guān)，近年來發(fā)現(xiàn)更多的細(xì)胞黏附和侵襲相關(guān)基因參與了NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。

Claudins是上皮細(xì)胞間緊密連接骨架蛋白,緊密連接有維持細(xì)胞極向排列和屏障功能。 Hsueh等[5]研究發(fā)現(xiàn)，大部分NPC組織高表達(dá)Claudins 1、4而低表達(dá)Claudins 7，低表達(dá)Claudin 4和高表達(dá)Claudin 7與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。 Ezrin蛋白是一種細(xì)胞膜與細(xì)胞骨架的連接蛋白,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架肌動蛋白,調(diào)整細(xì)胞形態(tài)、黏附和活性,參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等功能。研究表明，Ezrin高表達(dá)的NPC患者易致遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，且總生存期較短[6]。

N-cadherin為鈣依賴黏附素家族成員。有研究顯示，N-cadherin在細(xì)胞質(zhì)或核中高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分裂增殖，誘導(dǎo)MMPs基因表達(dá)，促進(jìn)腫瘤血管的形成及基底膜細(xì)胞外基質(zhì)的破壞，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移。N-cadherin在部分NPC組織中高表達(dá)，核高表達(dá)者與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后差有關(guān)[7]。Capn4為一種鈣蛋白酶小亞基，在腫瘤遷移或侵襲中起重要作用。Zheng等[8]研究發(fā)現(xiàn)，Capn4在NPC中高表達(dá)，表達(dá)水平與淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，高表達(dá)者生存期短；體外研究提示，Capn4可通過激活NF-κB上調(diào)MMP2表達(dá)。

3 microRNA(miR)表達(dá)失衡

MiR是一種短的、非編碼RNA，其編碼基因主要位于基因間隔區(qū)和蛋白質(zhì)編碼基因的內(nèi)含子區(qū)，占人類基因組的1%～5%；成熟miR與RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)結(jié)合，按Watson-Crick 堿基互補(bǔ)規(guī)律與靶mRNA的3′末端非翻譯區(qū)結(jié)合，依照堿基互補(bǔ)程度使靶mRNA降解(大部分堿基互補(bǔ))或抑制翻譯(互補(bǔ)堿基數(shù)少)，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)。研究表明，部分miR為癌基因或抑癌基因[9，10]，在人類惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào)或下調(diào)[11，12]。miR表達(dá)異常與腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，miR通過調(diào)節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)影響腫瘤轉(zhuǎn)移[13,14]。 MiR-10b 為促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的miR，直接調(diào)節(jié)Twist1基因表達(dá),其高表達(dá)與乳腺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。EBV相關(guān)性NPC中，EBV編碼的LMP-1上調(diào)MiR-10b 表達(dá)，促進(jìn)NPC細(xì)胞轉(zhuǎn)移[15]；體外實驗證明，其可促進(jìn)鼻咽細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，上調(diào)MMP-9表達(dá)[16]。miR-144是近年來發(fā)現(xiàn)的與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)基因，在多種人類惡性腫瘤中表達(dá)異常。研究發(fā)現(xiàn)，miR-144在NPC中高表達(dá)，抑制其表達(dá)可抑制NPC細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，下調(diào)抑癌基因PTEN和E-cadherin表達(dá)，上調(diào)pAkt和Cyclin D1表達(dá)，促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移[17]。

miR-29c是miR-29家族成員，可抑制p85a和CDC42表達(dá)，上調(diào)p53表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。miR-29c在NPC細(xì)胞表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致下游多種靶基因的表達(dá)上調(diào)[18]，而這些靶基因編碼的多種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(如膠原蛋白及層粘連蛋白1)參與NPC細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。體外實驗表明，外源性表達(dá)miR-29c抑制NPC細(xì)胞遷移和侵襲；體內(nèi)實驗表明，miR-29c抑制肺轉(zhuǎn)移灶形成。miR-26a定位于3號染色體，在大多數(shù)組織中表達(dá)，其表達(dá)異常與腫瘤發(fā)生有關(guān)。目前已證實，在腫瘤中miR-26a的直接作用靶點(diǎn)有Ezh2、PTEN、Cyclin D2、Cyclin E2、GSK-3β等，miR-26a通過作用于這些靶點(diǎn)發(fā)揮其調(diào)控腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的作用。miR-26a在不同類型的腫瘤中所扮演的角色不同；在一些腫瘤如肝癌、乳腺癌中為抑癌基因；而在另一些腫瘤如膠質(zhì)瘤和前列腺癌等則為癌基因。 在NPC中，miR-26a通過抑制 Ezh2表達(dá)，從而抑制NPC細(xì)胞增殖和腫瘤形成，抑制腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移[19]，起抑癌基因的作用。miR-9在不同腫瘤中表達(dá)不一，其調(diào)控的基因各異。miR-9在NPC中表達(dá)低下，低表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和進(jìn)展期有關(guān)[20]；體內(nèi)外實驗表明，miR-9通過下調(diào)CXCR4表達(dá)抑制NPC細(xì)胞增殖、遷移、侵襲等功能[21]。

研究還發(fā)現(xiàn)，EBV可編碼miR(EBV-miR) ，從而調(diào)節(jié)病毒和宿主細(xì)胞mRNA表達(dá)。目前已鑒定出40多種成熟EBV-miR，來源于BHRF1和BART集合。體外實驗證實了EBV-miR可作用于EBV-mRNA，調(diào)節(jié)病毒相關(guān)蛋白的表達(dá)，確定病毒感染形式；同時EBV-miR可與宿主細(xì)胞mRNA堿基互補(bǔ)位點(diǎn)結(jié)合，抑制靶mRNA翻譯，從而擾亂宿主細(xì)胞基因表達(dá)模式，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，EBV-miR可上調(diào)NPC細(xì)胞miR-155表達(dá)，后者通過上調(diào)TGF-β表達(dá)，促進(jìn)上皮與間質(zhì)轉(zhuǎn)換和細(xì)胞遷移，從而促進(jìn)NPC細(xì)胞轉(zhuǎn)移[22]。EBV編碼的MiR-BART9在NPC組織中高表達(dá)，體內(nèi)外實驗均證明其通過特異性抑制E-cadherin誘導(dǎo)的間質(zhì)樣現(xiàn)象，促進(jìn)鼻咽細(xì)胞遷移[23]。

綜上所述，多種腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因及miR表達(dá)失衡與NPC轉(zhuǎn)移有關(guān)，但哪些基因是調(diào)控NPC轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵基因尚不清楚。因此，深入研究NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分子機(jī)制，尋找調(diào)控NPC轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵基因，找出敏感度和特異度高的預(yù)測NPC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)記物，及時發(fā)現(xiàn)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移潛能的NPC，及早采取有效措施，是進(jìn)一步提高NPC生存率的關(guān)鍵。

[1] Lv X, Xiang YQ, Cao SM, et al. Prospective validation of the prognostic value of elevated serum vascular endothelial growth factor in patients with nasopharyngeal carcinoma: more distant metastases and shorter overall survival after treatment[J]. Head Neck, 2011,33(6):780-785.

[2] Zhang JX, Cai MB, Wang XP, et al. Elevated DLL4 expression is correlated with VEGF and predicts poor prognosis of nasopharyngeal carcinoma[J]. Med Oncol, 2013,30(1):390.

[3] Cui RX, Liu N, He QM, et al. Low BRMS1 expression promotes nasopharyngeal carcinoma metastasis in vitro and in vivo and is associated with poor patient survival[J]. BMC Cancer, 2012(12):376.

[4] Li X, Hu R, Qu J, et al. Identification of nm23-H1 as a metastatic suppressor and prognostic factor in nasopharyngeal carcinoma by proteomic analysis[J]. Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban, 2012,37(1):17-26.

[5] Hsueh C, Chang YS, Tseng NM, et al. Expression pattern and prognostic significance of claudins 1, 4, and 7 in nasopharyngeal carcinoma[J]. Hum Pathol, 2010,41(7):944-950.

[6] Wang L, Lin GN, Jiang XL, et al. Expression of ezrin correlates with poor prognosis of nasopharyngeal carcinoma[J]. Tumour Biol, 2011,32(4):707-712.

[7] Luo WR, Wu AB, Fang WY, et al. Nuclear expression of N-cadherin correlates with poor prognosis of nasopharyngeal carcinoma[J]. Histopathology, 2012,61(2):237-246.

[8] Zheng PC, Chen X, Zhu HW, et al. Capn4 is a marker of poor clinical outcomes and promotes nasopharyngeal carcinoma metastasis via nuclear factor-κB-induced matrix metalloproteinase 2 expression[J]. Cancer Sci, 2014,105(6):630-638.

[9] Costinean S, Zanesi N, Pekarsky Y, et al. Pre-B cell proliferation and lymphoblastic leukemia/high-grade lymphoma in E(mu)-miR155 transgenic mice[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2006,103(18):7024-7029

[10] Watanabe A, Tagawa H, Yamashita J, et al. The role of microRNA-150 as a tumor suppressor in malignant lymphoma[J]. Leukemia, 2011,25(8):1324-1334.

[11] Kluiver J, Poppema S, de Jong D, et al. BIC and miR-155 are highly expressed in Hodgkin, primary mediastinal and diffuse large B cell lymphomas[J]. J Pathol, 2005,207(2):243-249.

[12] Ng SB, Yan J, Huang G, et al. Dysregulated microRNAs affect pathways and targets of biologic relevance in nasal-type natural killer/T-cell lymphoma[J]. Blood, 2011,118(18):4919-4929.

[13] Ma L, Weinberg RA. Micromanagers of malignancy: role of microRNAs in regulating metastasis[J]. Trends Genet, 2008,24(9):448-456.

[14] Nicoloso MS, Spizzo R, Shimizu M, et al. MicroRNAs the micro steering wheel of tumour metastases[J]. Nat Rev Cancer, 2009,9(4):293-302.

[15] Li G, Wu Z, Peng Y, et al. MicroRNA-10b induced by Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein-1 promotes the metastasis of human nasopharyngeal carcinoma cells[J]. Cancer Lett, 2010,299(1):29-36.

[16] Sun XJ, Liu H, Zhang P, et al. miR-10b promotes migration and invasion in nasopharyngeal carcinoma cells[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2013,14(9):5533-5537.

[17] Zhang LY, Ho-Fun Lee V, et al. MicroRNA-144 promotes cell proliferation, migration and invasion in nasopharyngeal carcinoma through repression of PTEN[J]. Carcinogenesis, 2013,34(2):454-63.

[18] Sengupta S, den Boon JA, Chen IH, et al. MicroRNA 29c is down-regulatedin nasopharyngeal carcinomas, up-regulating mRNAs encoding extracellular matrix proteins[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2008,105(15):5874-5878.

[19] Yu L, Lu J, Zhang B, et al. miR-26a inhibits invasion and metastasis of nasopharyngeal cancer by targeting EZH2[J]. Oncol Lett, 2013,5(4):1223-1228.

[20] Lu J, Xu X, Liu X, et al. Predictive value of miR-9 as a potential biomarker for nasopharyngeal carcinoma metastasis[J]. Br J Cancer, 2014,110(2):392-398.

[21] Lu J, Luo H, Liu X, et al. miR-9 targets CXCR4 and functions as a potential tumor suppressor in nasopharyngeal carcinoma[J]. Carcinogenesis, 2014,35(3):554-563

[22] Du ZM, Hu LF, Wang HY, et al. Upregulation of MiR-155 in Nasopharyngeal Carcinoma is Partly Driven by LMP1 and LMP2A and Downregulates a Negative Prognostic Marker JMJD1A[J]. PLoS One, 2011,6(4):e19137.

[23] Hsu CY, Yi YH, Chang KP, et al. The Epstein-Barr virus-encoded microRNA MiR-BART9 promotes tumor metastasis by targeting E-cadherin in nasopharyngeal carcinoma[J]. PLoS Pathog, 2014,10(2):e1003974.

國家自然科學(xué)基金項目(81360355 )；廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳科研課題(Z2010237，Z2013355)。

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.08.044

R739.6

A

1002-266X(2015)08-0103-03

2013-10-15)