康愛(ài)君,李雨薇,王學(xué)文,胡建國(guó),劉君芳,鄭振輝

（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部，北京 100191）

天然山泉水對(duì)老齡小鼠SOD和MDA含量的影響

康愛(ài)君,李雨薇,王學(xué)文,胡建國(guó),劉君芳,鄭振輝

（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部，北京 100191）

目的 探討天然山泉水對(duì)老齡小鼠脂質(zhì)過(guò)氧化水平的影響。方法 8月齡SPF級(jí)雄性ICR小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)5 d后，禁食16 h，取血，測(cè)血清丙二醛（MDA）含量。根據(jù)MDA含量，將ICR小鼠隨機(jī)分為兩組：天然山泉水組和自來(lái)水對(duì)照組。天然山泉水組自由飲用天然山泉水，自來(lái)水對(duì)照組自由飲用自來(lái)水，連續(xù)飲用兩個(gè)月，飲用1個(gè)月和兩個(gè)月時(shí)禁食16 h，取血，測(cè)血清丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。結(jié)果 給予天然山泉水兩個(gè)月后，與自來(lái)水對(duì)照組相比，天然山泉水組丙二醛（MDA）含量顯著降低（P＜0.05），超氧化物歧化酶（SOD）活力無(wú)顯著性差異。結(jié)論 飲用天然山泉水對(duì)緩解老齡小鼠脂質(zhì)過(guò)氧化水平有一定的作用。

天然山泉水；老齡小鼠；超氧化物歧化酶；丙二醛

機(jī)體抗氧化酶的活性會(huì)隨著年齡的增長(zhǎng)而不斷下降，導(dǎo)致體內(nèi)氧自由基不能及時(shí)被清除，生成過(guò)氧化脂質(zhì)等過(guò)氧化物，從而引起細(xì)胞的衰老和死亡，加速機(jī)體的衰老［1]。作為體內(nèi)重要的氧自由基清除劑，SOD是體內(nèi)清除自由基的重要抗氧化酶［2-3]，可以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。檢測(cè) SOD含量的高低可以間接反映機(jī)體清除自由基的能力。MDA是過(guò)氧化脂質(zhì)的降解產(chǎn)物，其含量與細(xì)胞損傷的程度呈正相關(guān)，檢測(cè)MDA含量的變化可間接反應(yīng)氧自由基含量的變化［2-3]。

本文選用老齡小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)觀察其飲用天然山泉水后，血清中MDA和SOD含量的變化，探討該天然山泉水是否具有降低脂質(zhì)過(guò)氧化作用，是否具有升高抗氧化酶活力作用，以及是否具有抗氧化作用，進(jìn)而探討其保健作用。

1 材料和方法

1.1 受試物

天然山泉水，由某生物科技有限公司提供，2014年12月6日生產(chǎn)，350mL塑料瓶裝。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為ICR小鼠，SPF級(jí)，共30只，雄性，8月齡，44～47 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供【SCXK（京）2012-0001】。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)5 d后，禁食 16 h，取血，測(cè)定血清中丙二醛（MDA）含量。根據(jù)MDA含量，將ICR小鼠隨機(jī)分為兩組：天然山泉水組自由飲用天然山泉水；自來(lái)水對(duì)照組自由飲用自來(lái)水，連續(xù)飲用兩個(gè)月。ICR小鼠飼養(yǎng)于屏障環(huán)境【SYXK（京）2011-0039】，溫度為24℃ ±2℃，相對(duì)濕度為55％ ±15％。并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道的關(guān)懷。

1.3 血清總超氧化物歧化酶（SOD﹞和丙二醛（MDA﹞的測(cè)定

飲用天然山泉水一個(gè)月和兩個(gè)月，小鼠禁食16 h，取血，應(yīng)用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒分別測(cè)血清丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。試劑盒生產(chǎn)批號(hào)為20141219。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 小鼠體重

天然山泉水組小鼠體重與自來(lái)水對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（表1）。

2.2 小鼠每日飲水量

天然山泉水組小鼠飲水量與自來(lái)水對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（表2）。

2.3 小鼠血清中MDA和SOD結(jié)果

給予天然山泉水前，與自來(lái)水對(duì)照組相比，天然山泉水組MDA含量無(wú)顯著差異；實(shí)驗(yàn)進(jìn)行一個(gè)月時(shí)，與自來(lái)水對(duì)照組相比，天然山泉水組MDA含量、SOD活力均無(wú)顯著性差異；實(shí)驗(yàn)進(jìn)行兩個(gè)月時(shí)，與自來(lái)水對(duì)照組相比，天然山泉水組MDA含量顯著降低（P＜0.05），SOD活力無(wú)顯著性差異（表3和表4）。

表1 各組小鼠體重的比較（g）Tab.1 The comparison of body weight of different groups ofmice

表2 各組小鼠飲水量的比較（mL）Tab.2 he comparison of water-drinking capacities of different groups ofmice.

表3 各組小鼠丙二醛（MDA）含量比較（nmol/mL）Tab.3 The comparison of Malondialdehyde（MDA）content of different groups ofmice

表4 各組小鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性比較（U/mL）Tab.4 The comparison of superoxide dismutase（SOD）activities of different groups ofmice

圖1 各組小鼠MDA含量（nmol/mL）

3 討論

水為生命之源，健康之本。隨著社會(huì)的進(jìn)步，健康水日益受到人們的關(guān)注，世界衛(wèi)生組織（WHO）也提出了“健康水”的概念。指出健康水的指標(biāo)［4-6]除了符合清澈、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)色無(wú)味、無(wú)毒等基本要求外，還強(qiáng)調(diào)了以下幾方面：（1）水的硬度要適中（2）人體所需的礦物質(zhì)含量要適中，（3）要呈弱堿性，pH值為7.0～8.0（4）水中溶解氧要適中，不低于7 mg/L；（5）水的媒體營(yíng)養(yǎng)生理功能（溶解力、滲透力、代謝力、乳化力等）要強(qiáng)（6）水分子團(tuán)17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度應(yīng)在90Hz下。

我們探討的天然山泉水源自涌泉，采用仿生大自然水循環(huán)原理，利用聲、光、磁、波技術(shù)、完成過(guò)濾、加熱、冷卻以及人體必需的礦物元素的篩取提留等多重技術(shù)處理，重組水分子結(jié)構(gòu)排序，去除了水中正電荷，提取大量氫氧根負(fù)電離子，使水分子團(tuán)17O-NMR半幅度達(dá)到50～60 Hz左右的細(xì)微化，同時(shí)水呈弱堿性，pH值為7.2～7.8，水中溶解氧達(dá)到9mg/L。

本研究中，我們以老齡小鼠作為研究對(duì)象，初步探討了天然山泉水對(duì)其脂質(zhì)過(guò)氧化水平的影響。脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)是自由基攻擊細(xì)胞膜上的多不飽和脂肪酸而引發(fā)的一系列鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，其終產(chǎn)物是MDA。研究結(jié)果顯示，飲用天然山泉水30 d后，老齡小鼠血液中MDA含量未見(jiàn)顯著降低，飲用天然山泉水60 d后，可以使老齡小鼠血液中MDA含量顯著降低，提示隨著飲水時(shí)間的延長(zhǎng)，天然山泉水具有降低組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化的作用。本實(shí)驗(yàn)中血清中T-SOD水平未有顯著提高，是否通過(guò)其他抗氧化途徑參與自由基的清除過(guò)程有待進(jìn)一步探討。

從上世紀(jì)九十年代開(kāi)始，科研人員用17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度對(duì)水的分子團(tuán)的大小進(jìn)行定性的測(cè)定，特別是日本、臺(tái)灣和美國(guó)等國(guó)家對(duì)各種水進(jìn)行半幅寬的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，國(guó)際上認(rèn)定的長(zhǎng)壽村水、天然的優(yōu)質(zhì)水的半幅寬都小于100 Hz，而蒸餾水、雨水和自來(lái)水的半幅寬一般都在100 Hz以上［6-7]。越來(lái)越多的研究表明［7]，利用17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬可以定性地反映液態(tài)水團(tuán)簇的大小。一般說(shuō)，譜線(xiàn)越寬，團(tuán)簇越大；譜線(xiàn)越窄，團(tuán)簇越小。團(tuán)簇小的水對(duì)物質(zhì)，包括中藥和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的溶解性高。本實(shí)驗(yàn)中飲用天然山泉水可降低老齡小鼠的MDA水平，可能與該天然山泉水17O-核磁共振譜（NMR）半幅寬度有關(guān)。該天然山泉水水分子團(tuán)17O-NMR半幅度僅為50～60 Hz，更利于細(xì)胞吸收。

本文首次應(yīng)用老齡小鼠探討其飲用天然山泉水對(duì)過(guò)氧化水平的影響，為健康水的保健作用提供客觀資料。

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Effect of naturalmountain spring on SOD and MDA content in m ice aging

KANG Ai-jun，LIYU-wei，WANG Xue-wen，HU Jian-guo，LIU Jun-fang，ZHENG Zhen-hui
（Department of Laboratory Animal Science，Health Science Center，P.K.U.Beijing 100191，China）

Objective To observe the effect of Natural mountain spring on oxidative damage of aging mice.M ethods Thirtymale agingmice were randomly divided into experimental group（drink Naturalmountain spring）and control group（drink tap water）according to the level of MDA.The serum in the two groupswas taken for T-SOD activity and MDA content analysis after twomonths.Results The MDA content in experimental group decreased markedly than that in control group.Conclusion Naturalmountain spring could alleviate oxidative damage by free radicals to extent.

Naturalmountain spring；Agingmice；Superoxide dismutase；Malondialdehyde

R-332

A

1671-7856（2015﹞10-0034-04

10.3969.j.issn.1671.7856.2015.010.008

康愛(ài)君（1971-），女，副主任技師，研究方向：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，E-mail：kangaijun1028@163.com。

﹞2015-08-26

研究報(bào)告