楊光勇， 葛 婧, 王偉萍

(新疆維吾爾自治區(qū)食品藥品檢驗所， 烏魯木齊 830004)

GC-ECD及GC-MS法測定祖卡木顆粒及其部分原料藥中20種有機氯農(nóng)藥殘留量

楊光勇， 葛 婧, 王偉萍

(新疆維吾爾自治區(qū)食品藥品檢驗所， 烏魯木齊 830004)

目的 建立測定維藥祖卡木顆粒及其部分原料藥中20種有機氯農(nóng)藥殘留的氣相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用法。方法 分別采用乙腈、CARBON/PSA固相萃取柱對祖卡木顆粒及其部分原料藥進行提取和凈化，MS和ECD分別進行檢測，根據(jù)色譜保留時間和質(zhì)荷比信息對樣品進行定性分析，GC-ECD法進行定量分析。以DB-5MS色譜柱對待測組分進行分離，柱溫采用程序升溫方式，柱流量1 mL/min，進樣口溫度230℃，ECD溫度300℃；離子源為EI源，解離電壓70 eV，離子源溫度240℃，傳輸線溫度250℃，四級桿溫度150℃，采用SCAN模式，掃描質(zhì)荷比范圍m/z 45～400。結(jié)果 20種有機氯農(nóng)藥分離良好(分離度≥1.512)，各組分平均回收率為72.4%～108.9%(n=6)，有機氯類農(nóng)藥在0.002～0.500μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r2≥0.997 1)。結(jié)論 該方法簡便、準(zhǔn)確且可靠，可以為祖卡木顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供參考依據(jù)。

祖卡木顆粒； 固相萃取；GC-ECD；GS-MS； 農(nóng)藥殘留

有機氯農(nóng)藥的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在環(huán)境中降解緩慢，并可通過生物鏈富集在動物和植物體內(nèi)，危害較大。我國已于20世紀(jì)80年代禁止使用有機氯農(nóng)藥，但至今仍能在水域、土壤、生物體內(nèi)檢出。祖卡木顆粒是由山柰、睡蓮花、破布木果、薄荷、大棗、洋甘菊、甘草、蜀葵子、大黃、罌粟殼10味中藥制成的顆粒劑，適用于感冒咳嗽、咽喉腫痛等癥狀[1]。其采用的多種植物器官性藥材在種植過程中可能會吸收農(nóng)藥并有殘留，但目前未見相關(guān)研究報道。殘留農(nóng)藥的提取和凈化方式主要有超臨界流體萃取[2-3]、固相萃取[4-5]、微波輔助提取[6-7]、免疫親和色譜等技術(shù)[8-9]，GC-ECD法對于痕量級的有機氯農(nóng)藥殘留檢測具有靈敏度高和精密度好的優(yōu)勢[10-12]。本研究分別采用乙腈、CARBON/PSA固相萃取柱對樣品進行提取和凈化，采用GC-MS法對樣品各組分進行定性分析，再以GC-ECD法進行定量分析，首次對祖卡木顆粒及其部分原料藥中的20種有機氯農(nóng)藥殘留進行了分離分析，旨在為祖卡木顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供參考依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器GC-2010Plus氣相色譜儀(日本島津公司)，QP-2010Plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津公司)，超聲波振蕩器(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本東京理化器械公司)，METTLER AE200S電子天平(德國梅特勒-托利多公司)，固相萃取裝置(美國安捷倫公司)，固相萃取CARBON/PSA小柱(Waters公司)。

1.2 試藥祖卡木顆粒、山柰、睡蓮花、大棗、洋甘菊、甘草均由某生產(chǎn)廠家提供。農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品：艾氏劑、狄氏劑、順氯丹、反氯丹、P,P′-DDE、P,P′-DDD、O,P′-DDT、P,P′-DDT、異狄氏劑、七氯、環(huán)氧七氯、六氯代苯、α-BHC、β-BHC、δ-BHC、林丹、五氯硝苯(購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所，濃度均為100 μg/mL)，五氯苯胺(100 μg/mL)、甲基五氯苯硫醚(100 μg/mL)和氧氯丹(100 μg/mL)購自德國。乙腈(Fisher公司)為色譜純，正己烷(Honeywell Burdick & Jackson公司)、甲苯(Merck-Millipore公司)均為農(nóng)藥殘留級。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器條件

2.1.1 氣相色譜條件 以DB-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm)彈性石英毛細管色譜柱對待測組分進行分離；采用程序升溫方式，柱溫程序為：100℃維持1 min，10℃/min升至220℃維持5 min，8℃/min升至250℃維持3 min，30℃/min升至290℃維持11 min；柱流量1 mL/min；進樣口溫度230℃，進樣量1 μL，分流比10；ECD溫度300℃。

2.1.2 質(zhì)譜條件 電離方式：離子源為EI源，解離電壓為70 eV，離子源溫度為240℃，傳輸線溫度250℃ ，四級桿溫度150℃，SCAN模式，掃描m/z范圍為45～400。

2.2 供試品溶液制備精密稱取經(jīng)研磨(祖卡木顆粒)或粉碎(藥材)并過3號篩(50目)的供試品5 g，置于25 mL容量瓶中，加入20 mL乙腈，超聲提取20 min，過濾，收集濾液；再加20 mL乙腈，重復(fù)上述操作，合并2次收集的濾液，置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，30℃蒸發(fā)至約5 mL。取上述濃縮液置于CARBON/PSA 凈化管中，收集流出液，并用45 mL乙腈∶甲苯(3∶1)洗脫，收集并合并流出液，30℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用正己烷溶解至5 mL，即為供試品溶液。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的測定及系統(tǒng)適用性

2.3.1 GC-ECD測定結(jié)果 取各農(nóng)藥殘留混合對照溶液1 μL注入氣相色譜儀，結(jié)果顯示各峰分離度均≥1.512，理論塔板數(shù)≥479 366，色譜圖見圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品的GC-ECD色譜圖

(1：α-BHC；2：六氯代苯；3：β-BHC；4：林丹；5：五氯硝苯；6：δ-BHC；7：五氯苯胺；8：七氯；9：甲基五氯苯硫醚；10：艾氏劑；11：氧氯丹；12：環(huán)氧七氯；13：反氯丹；14：順氯丹；15：P,P′-DDE；16：狄氏劑；17：異狄試劑；18：P,P′-DDD；19：O,P′-DDT；20：P,P′-DDT)

2.3.2 GC-MS測定結(jié)果 取各農(nóng)藥殘留混合對照溶液1 μL注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，在既定的色譜質(zhì)譜條件下進行掃描，根據(jù)保留時間對各組分進行分析，分別選取2～3個質(zhì)荷比離子進行定性分析，見圖2、表1。

圖2 標(biāo)準(zhǔn)品的TIC圖

2.4 線性范圍分別吸取上述有機氯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL置于100 mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液；分別吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備溶液0.1、0.2、0.5、5、10、25 mL置于50 mL容量瓶中，正己烷稀釋至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度溶液，濃度分別為0.002、0.004、0.01、0.1、0.2、0.5 μg/mL。分別取各梯度濃度的對照品溶液1 μL注入氣相色譜儀，記錄實驗結(jié)果。以濃度(C)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積(A)為縱坐標(biāo)，計算回歸方程。結(jié)果表明：有機氯類農(nóng)藥在0.002～0.500μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r2≥0.997 1)。各組分回歸方程及R2值見表1。

2.5 回收率試驗稱取樣品細粉6份，每份1g，精密稱定，置25mL量瓶中，分別精密加入0.5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液1mL，按上述供試品溶液制備方法和測定條件測定含量，各組分的平均回收率見表1。

表1 各組分保留時間、線性回歸方程及回收率

2.6 樣品測定結(jié)果精密量取制備好的祖卡木顆粒及藥材溶液1μL注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，分別根據(jù)色譜保留時間和質(zhì)荷比信息對樣品中各色譜峰進行定性分析。排除假陽性干擾后，再精密量取陽性檢出的樣品溶液1μL注入氣相色譜儀，根據(jù)峰面積以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算各殘留農(nóng)藥的含量，結(jié)果見表2。

表2 供試品中農(nóng)殘含量測定結(jié)果/(μg/kg)

3 結(jié)論

本研究分別考查了DB-5MS型、DB-624型、RTX-3型等不同型號色譜柱在不同色譜柱溫下對待測組分的分離能力，最終確定上述色譜條件。同時考查了不同超聲提取時間、不同洗脫液組成比例以及不同洗脫體積對待測組分含量的影響。建立了氣相色譜法及氣質(zhì)聯(lián)用法同時檢測祖卡木顆粒及所含部分藥材中20種有機氯農(nóng)藥殘留的方法，該方法簡便，可操作性強，在實現(xiàn)準(zhǔn)確定量的同時，有效排除了假陽性的干擾，各組分分離良好，極大地簡化了操作過程，節(jié)約成本，有望為相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供技術(shù)支持。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)維吾爾藥分冊[S].烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社,1998:175.

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(本文編輯 施洋)

Determination of twenty organochlorine pesticide residues in Zukamu Granules and part of its crude drug by GC-ECD and GC-MS

YANG Guangyong，GE Jing，WANG Weiping

(InstitutionforFoodandDrugControlXinjiangUyghurAutonomousRegion，Urumqi830004，China)

Objective To establish a method for determination of 20 organochlorine pesticide residues in Zukamu Granules and part of its crude drug. Methods Acetonitrile and CARBON/PSA SPE were used to extract and purify Zukamu Granules and part of its crude drug, ECD and MS were introduced as the detections respectively, the column DB-5MS was used for the separations of target pesticides, column flow was at 1 mL/min， the inlet was set at 230℃ and ECD at 300℃， ion source was EI，electron energy was at 70eV, and the source temperature was set at 240℃, transfer line and quadrupole were set at 250℃ and 150℃, scan mode was used, the range is m/z 45～400. Results 20 organochlorine pesticide were separated well by this method (Resolution ≥1.512), the recovery rate was at the range of 72.4%～108.9%, there were good linear relationships between the peak area and concentration at the range of 0.002～0.500 μg/mL (R2≥0.997 1)． Conclusion The method is simple, accurate reliable, and can provide reference basis for improving quality standard of Zukamu Granules．

Zukamu Granules； SPE； GC-ECD； GC-MS； pesticide residues

國家藥品(維藥)標(biāo)準(zhǔn)提高研究課題項目(793)

楊光勇(1983-)，男，本科，藥師，研究方向：藥品與食品理化檢驗。

R

A

1009-5551(2015)12-1500-04

10.3969/j.issn.1009-5551.2015.12.011

2015-3-12]