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      順氣通腑合劑對胃腸動力障礙大鼠血漿胃動素、乙酰膽堿和生長抑素的影響*

      2015-08-10 09:31:38周紹榮焦蘭農(nóng)姚建根何國華袁成業(yè)包卿兵
      關(guān)鍵詞:沙比利順氣通腑

      周紹榮,焦蘭農(nóng),姚建根,何國華,袁成業(yè),包卿兵,毛 躍

      (南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬泰州醫(yī)院普外科,江蘇 泰州226001)

      胃腸動力障礙性疾病是臨床常見病,大多與胃腸蠕動功能減弱有關(guān),而在調(diào)節(jié)胃腸運動中,胃腸激素是重要介質(zhì)[1]。順氣通腑合劑為我院外科經(jīng)驗方,具有順氣通腑、益氣健脾之功效。本實驗選取SD 大鼠構(gòu)建食積動物模型,研究順氣通腑合劑對胃腸激素MTL、Ach 和SS 的影響,探討其促進(jìn)胃腸動力的作用機(jī)制,現(xiàn)報告如下。

      1 實驗材料

      1.1 實驗藥品

      順氣通腑合劑由南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬泰州醫(yī)院制劑室提供,批準(zhǔn)文號:藥制字Z1620030009。枸櫞酸莫沙比利片:江蘇豪森制藥業(yè)股份有限公司,批號:140306。乙酰膽堿(Ach)Elisa 試劑盒:上海源葉生物科技有限公司,批號:14082601。胃動素(MTL)Elisa 試劑盒:上海源葉生物科技有限公司,批號:14082602。生長抑素(SS)Elisa 試劑盒:上海源葉生物科技有限公司,批號:14082603。特制高蛋白、高熱量飼料:由魚松、豆粉、面粉、牛奶粉按1∶2∶1∶1 的比例配成,攪拌均勻后,加水做成餅干,用電熱恒溫干燥箱烘干備用。

      1.2 實驗動物

      SD 大鼠,40 只,SPF 級,雄性,180~210g,由浙江省實驗動物中心供給。合格證:SCXK(浙)2014-0001。

      1.3 實驗條件

      給藥前后,SD 大鼠分籠飼養(yǎng),每籠5 只,喂以全價顆粒鼠飼料(南京協(xié)同生物工程有限公司),自由飲水飲食,室溫20~25℃,每天人工光照12h,室內(nèi)通風(fēng)良好,實驗室相對濕度:65%~70%.

      2 實驗方法

      2.1 模型制備

      40 只SD 大鼠隨機(jī)分成4 組:正常對照組、陰性對照組、莫沙比利組、順氣通腑合劑組,各組動物均為10 只。實驗時,正常對照組喂常規(guī)飼料;其余3組參考李中南等[2]食積動物模型方法制備胃腸動力障礙模型,喂特制的高蛋白、高熱量飼料,自由攝食和飲水,第2 日起加喂25%濃度的牛乳,每次5mL,1 日2 次,連喂5 d。

      2.2 樣本采集及檢測

      第7 日起,均給予常規(guī)飼料,并給予相應(yīng)藥物灌胃(20mL/kg,2 次/日):正常對照組、陰性對照組給予生理鹽水,順氣通腑合劑組給予順氣通腑合劑(34.67g/kg),莫沙比利組給予莫沙比利(0.006g/kg)。

      連續(xù)給藥7 d 后,各組SD 大鼠以1%戊巴比妥鈉腹腔麻醉,腹主動脈采血,置于抗凝管中,混勻后立即在4℃以下,以3 000 轉(zhuǎn)/min 離心10min,分離血漿于-70℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆?,測定血漿乙酰膽堿(Ach)、胃動素(MTL)和生長抑素(SS)的表達(dá)水平。具體檢測步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。

      3 統(tǒng)計方法

      采用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以x±s 表示,多組間比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD 法,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

      4 實驗結(jié)果

      4.1 順氣通腑合劑對食積大鼠體重的影響

      造模前,正常對照組和造模組大鼠進(jìn)食飲水正常,體質(zhì)量無明顯差異性,造模后,造模組大鼠體質(zhì)量增長較少,與正常對照組比較有顯著性差異(P<0.05),造模成功,見表1。治療后,陰性對照組大鼠體質(zhì)量增長緩慢,與正常組比較有顯著性差異(P<0.01);順氣通腑合劑組、莫沙比利組大鼠體質(zhì)量與正常組比較無顯著性差異(P>0.05),與陰性對照組比較有顯著性差異(P<0.05),見表2。

      表1 造模前后大鼠體質(zhì)量變化(x±s)

      表2 順氣通腑合劑對食積大鼠體質(zhì)量的影響(x±s)

      4.2 順氣通腑合劑對食積大鼠血漿Ach、MTL 和SS 的影響

      模型組大鼠血漿Ach、MTL 含量降低,SS 含量升高,與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后,順氣通腑合劑組、莫沙比利組可以升高大鼠血清Ach、MTL 含量,降低SS 含量,與陰性對照比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);順氣通腑合劑組與莫沙比利組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。順氣通腑合劑組、莫沙比利組升高血漿Ach 含量,與正常對照組比較有顯著性差異(P<0.05),升高血漿MTL 含量,降低SS,與正常對照組比較無差異性(P>0.05)。見表3。

      表3 順氣通腑合劑對食積大鼠血漿Ach、MTL和SS 的影響(x±s)

      5 討論

      胃腸動力障礙性疾病屬中醫(yī)學(xué)“腹?jié)M、痞證”等范疇,以腹部脹氣、惡心、嘔吐、噯氣、納差等為主要表現(xiàn),多因脾胃失調(diào)、升降失司所致。《景岳全書·雜證謨·脾胃》篇云:“凡欲察病者,必先察胃氣;凡欲治病者,必須常顧胃氣,胃氣無損,諸可無慮”,說明胃腸消化功能在疾病的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸中起重要的作用。治宜瀉胃腸積滯,通胃腸腑氣,恢復(fù)脾胃升降協(xié)調(diào)功能。順氣通腑合劑(黨參、白術(shù)、生大黃、土茯苓、木香、火麻仁、杏仁、厚樸等組成),以生大黃為君藥,取其祛瘀導(dǎo)滯,清腸通便;以黨參、白術(shù)益氣健脾而補中;佐以木香、厚樸行氣止痛;土茯苓利濕健脾;配以火麻仁、杏仁潤腸通便;諸藥相伍,增強(qiáng)消化道的推進(jìn)性蠕動[3],全方共奏順氣通腑、益氣健脾之功效。

      現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,胃腸運動功能是受體液調(diào)節(jié)和神經(jīng)調(diào)節(jié)的復(fù)雜生理過程,其中腸神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性和抑制性神經(jīng)元控制著胃腸道的協(xié)調(diào)運動[4]。胃腸激素作為一種調(diào)節(jié)肽在人體內(nèi)廣泛分布,對胃腸動力起重要的調(diào)節(jié)作用,成為胃腸動力藥發(fā)揮藥理作用的生理學(xué)基礎(chǔ)[5]。MTL 作為胃腸激素,在消化期,呈周期性釋放,誘發(fā)胃強(qiáng)烈收縮和小腸明顯的分節(jié)運動。據(jù)報道,MTL 作用于消化道平滑肌上的受體引起平滑肌內(nèi)環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)濃度增加,使細(xì)胞內(nèi)Ca2+從微粒體釋放,Ca2+濃度增加后可引起平滑肌收縮[6],促進(jìn)胃腸運動。李穎等[7]研究表明,大黃與枳殼、芒硝、厚樸配伍可調(diào)節(jié)實驗動物MTL等胃腸激素的分泌,促進(jìn)胃腸運動,減輕腸黏膜炎性反應(yīng),促進(jìn)排便。Ach 是目前已知胃腸道最主要的一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)[8],作用于平滑肌M 受體,通過cAMP 作為第二信使的細(xì)胞膜信號傳導(dǎo)[4],開放質(zhì)膜上L 型Ca2+通道,Ca2+內(nèi)流使胃腸平滑肌收縮[9]。SS是一種抑制性腦腸肽,廣泛存在于胃腸道粘膜的D細(xì)胞中,以胃竇和胃體最高,在腸內(nèi)越往下含量越低,有抑制胃腸道及胰腺的外分泌的作用,可明顯減少胃液分泌量,并可降低胃液的酸度[10],抑制胃腸道平滑肌運動,減少小腸對水、電解質(zhì)及營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[11]。而且能與胃泌素(GAS)組成GAS-SS-胃酸分泌軸維持胃腸的正常生理功能[12]。大黃可通過促進(jìn)胃黏膜GAS 的分泌,抑制SS 的分泌,進(jìn)而增加胃黏膜的營養(yǎng)性反應(yīng),減少胃黏膜的細(xì)胞凋亡,實現(xiàn)其對胃腸黏膜的防護(hù)作用[13]。

      本實驗結(jié)果顯示,造模大鼠與正常對照組比較,體質(zhì)量增長緩慢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且用藥后順氣通腑合劑組大鼠體質(zhì)量與陰性對照組比較有顯著性差異(P<0.05),說明順氣通腑合劑有促進(jìn)胃腸動力恢復(fù)和營養(yǎng)吸收的作用。模型對照組MTL、Ach 含量均顯著降低,SS 含量升高,與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),用藥后,順氣通腑合劑血漿MTL、Ach 水平顯著升高,SS 含量顯著降低,與模型對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示順氣通腑合劑可調(diào)節(jié)血漿中胃腸激素整體水平平衡,以促進(jìn)胃腸動力的作用。武玉清等[14]報道大黃提取物番瀉苷在增強(qiáng)小鼠瀉下功能時,能使腸道MTL 釋放增加,而SS 的釋放降低。順氣通腑合劑促進(jìn)胃腸動力的作用機(jī)制可能是:①通過升高血漿MTL 和Ach 含量,使胃腸平滑機(jī)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加,從而促進(jìn)胃腸平滑肌收縮;②通過抑制SS 分泌,促進(jìn)胃腸道及胰腺外分泌,并激活對胃腸粘膜及機(jī)體的保護(hù)作用,維持胃腸道正常生理功能。本研究為順氣通腑合劑的臨床推廣應(yīng)用提供了理論依據(jù),并為開發(fā)療效好、副作用少的促胃腸動力的中藥新藥提供了思路。

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