兔眼藍莓外植體啟動培養(yǎng)研究

孫永平　曹榮祥　郭成寶等

摘要： 研究了南京地區(qū)主栽兔眼系列藍莓品種燦爛、粉藍、頂峰、梯夫藍、園藍的外植體啟動培養(yǎng)，優(yōu)化了WPM基礎培養(yǎng)基適合硬度的瓊脂含量和酸度，基本W(wǎng)PM培養(yǎng)基的瓊脂濃度為12 mg/L，加壓滅菌后pH值為5.8；新發(fā)枝條的后端粗莖段萌發(fā)率可以達到95%，接種50 d后大多成小植株；篩選出適合外植體萌發(fā)的培養(yǎng)基WPM+1.0 mg/L6-BA +1.5 mg/L ZT ，在此培養(yǎng)基上不同品種兔眼藍莓萌發(fā)率較高。

關鍵詞： 兔眼藍莓；組織培養(yǎng)；外植體；啟動培養(yǎng)

中圖分類號： S663.904+.3 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）08-0045-01

藍莓（Vaccinium spp.）作為一種新興果樹，是近年來許多國家發(fā)展十分迅速的優(yōu)良果樹之一，尤其是歐美國家。英國權威營養(yǎng)學家將藍莓列為 15 種健康食品之首，聯(lián)合國糧農組織也將藍莓列為人類五大健康食品之一 [1]。藍莓進行商業(yè)化栽培時間不足百年，但發(fā)展迅速。中國科學院南京植物所于 1987 年開始藍莓栽培研究，并篩選出適合中國南方地區(qū)栽培的優(yōu)良品種 [2]，南京溧水白馬地區(qū)種植藍莓20余年，育苗、生產上都形成了較大的規(guī)模，在帶動農民致富上作用顯著。

目前，生產上農戶藍莓繁苗大多通過扦插繁殖，常規(guī)繁殖存在速度慢、品種容易退化的缺點，利用組培快繁技術既可加快繁殖速度又能保持品種的種性 [3]。本試驗進行了本地區(qū)主栽兔眼藍莓組培外植體啟動培養(yǎng)研究，以期為藍莓工廠化育苗奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

材料為兔眼藍莓品種燦爛、粉藍、頂峰、梯夫藍、園藍新生綠枝，于2014年6月取于南京市農科所金陵綠谷現(xiàn)代園藝科技示范園。

1.2 試驗方法

將健壯的植株上剪取的新生嫩綠枝條分為前端莖段、中端莖段和后端粗莖段3部分，每部分枝條剪成帶2個腋芽枝段作為1個莖段進行后繼消毒處理。莖段用流水沖洗 120 min，之后先用50%的84消毒液浸泡消毒30 min，再用無菌水沖洗30 min，后用75%的乙醇浸泡60 s，然后用0.1% HgCl2處理15～30 min，最后用無菌水沖洗5～6次。在超凈工作臺上將腋芽朝上，接入誘導分化培養(yǎng)基中。以WPM為基本培養(yǎng)基，加蔗糖30 g/L，瓊脂8、10、12、14、16、18 g/L，用0.5 mol/L H2SO4調整pH值到6.5。培養(yǎng)室溫度為 （25±1） ℃，光照度1 500～2 000 lx，光照時間8 h/d，誘導培養(yǎng)基為WPM+1.0～3.0 mg/L BA+0.5～4.5 mg/L ZT，分別于50 d對結果進行統(tǒng)計。

2 結果與分析

2.1 WPM基礎培養(yǎng)基硬度和酸度的優(yōu)化

由表1可知，在高溫加壓之前，WPM培養(yǎng)基pH值在6.5左右，高溫加壓滅菌后，降低到5.8左右，在藍莓合適生長的酸度范圍。從培養(yǎng)基硬度看，滅菌前瓊脂含量在8～10 mg/L時硬度適合，而滅菌后瓊脂含量在12 mg/L時基本培養(yǎng)基的硬度合適。因此優(yōu)化出藍莓基本W(wǎng)PM培養(yǎng)基的瓊脂濃度應在12 mg/L，加壓滅菌前調整pH值在6.5。

2.2 藍莓嫩枝不同部位莖段萌發(fā)率的差異

由表2可知，藍莓嫩枝不同部位莖段萌發(fā)率存在一定差異，新發(fā)枝條的后端粗莖段腋芽的萌發(fā)率最高，達到95%，而中端和前端莖段萌發(fā)率只有20%。接種50 d后，芽大多已經(jīng)長成小植株。

2.3 不同激素濃度對兔眼藍莓不同品種萌發(fā)率的影響

由表3可知，不同品種在不同激素配比下，萌發(fā)率差異較大，頂峰在較低濃度下（1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT）萌發(fā)率最高，達到91%，而園藍、燦爛在這一濃度配比下萌發(fā)率為0。綜合比較供試5個品種萌發(fā)率，發(fā)現(xiàn)1.0 mg/L 6-BA 和1.5 mg/L ZT配比下不同品種兔眼藍莓都有萌發(fā)且萌發(fā)率較高。因此，選擇WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT培養(yǎng)基作為兔眼藍莓啟動培養(yǎng)的優(yōu)化培養(yǎng)基。

3 小結

本試驗對南京地區(qū)主栽兔眼藍莓組培外植體啟動培養(yǎng)進行了研究，燦爛、梯夫藍、頂峰是適宜鮮食品種，園藍和粉藍是適于加工的品種 [4]。優(yōu)化了WPM基礎培養(yǎng)基的適合硬度的瓊脂含量和酸度，WPM培養(yǎng)基的瓊脂濃度在12 mg/L，加壓滅菌前調整pH值為 6.5，可獲得適于藍莓培養(yǎng)的培養(yǎng)基硬度和酸度。新發(fā)枝條的后端粗莖段的萌發(fā)率可以達到95%，接種50 d后大多成小植株；篩選出適合外植體萌發(fā)的激素配比培養(yǎng)基WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT，不同品種兔眼系列藍莓燦爛、粉藍、頂峰、梯夫藍、園藍萌發(fā)率較高。

參考文獻：

[1] 李亞東. 藍莓優(yōu)質豐產栽培技術[M]. 北京：中國三峽出版社，2007.

[2]黃國輝，姚 平. 藍莓組培苗瓶外生根的研究[J]. 江蘇農業(yè)科學，2011，39（4）：227-228.

[3]王淑珍，來文國，周歷萍，等. 南高叢藍莓組培再生技術研究[J]. 現(xiàn)代農業(yè)科技，2011（21）：119-120.

[4]聶 飛，文光琴，方品武. 5個兔眼藍莓品種在黔中地區(qū)的表現(xiàn)及栽培評價[J]. 江蘇農業(yè)科學，2012，40（8）：126-128.