菜粉蝶微孢子蟲對家蠶胚種傳染性與蠶桑質(zhì)量的影響

陳世良　楊榮貴　高建華等

摘要： 據(jù)報(bào)道，菜粉蝶微孢子蟲能感染家蠶并對家蠶生理代謝產(chǎn)生一定的影響。近年來，筆者對家蠶各級(jí)原種、1代雜交種進(jìn)行母蛾鏡檢發(fā)現(xiàn)橢圓形偏細(xì)的微孢子蟲，而且檢出率極高，其形態(tài)大小與家蠶微孢子蟲存在一定差異，即長軸與家蠶微孢子蟲長軸相當(dāng)，而短軸偏短。經(jīng)顯微鏡觀察測量發(fā)現(xiàn)，該微孢子蟲形態(tài)呈橢圓形，大小平均（3 52±038） μm×（1 52±0 13） μm，與野外菜粉蝶寄生的微孢子蟲形態(tài)相似，大小、體積、長短軸比相當(dāng)。同一地理位置野外分離得到的微孢子蟲與家蠶寄生微孢子蟲親緣關(guān)系較近，對家蠶的胚種傳染性如何？為了進(jìn)一步弄清楚菜粉蝶微孢子蟲對家蠶的危害情況，對正常家蠶添食當(dāng)?shù)厣@收集純化的菜粉蝶微孢子蟲，分析微孢子蟲對當(dāng)代蠶和子代蠶的胚種傳染性，并綜合評價(jià)菜粉蝶微孢子蟲對蠶桑質(zhì)量的影響。結(jié)果表明，感染微孢子蟲的家蠶生長發(fā)育正常并能完成其生活世代，對體質(zhì)、繭質(zhì)、卵量的影響不明顯，但對種繭育母蛾檢驗(yàn)毒率的判定影響很大。

關(guān)鍵詞： 菜粉蝶；微孢子蟲；家蠶；胚種傳染性；蠶桑質(zhì)量

中圖分類號(hào)：S882 3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）08-0241-03

微粒子病是昆蟲能夠進(jìn)行胚種傳染的唯一疾病，也是其危害嚴(yán)重的重要原因。近年來，由于在蠶種檢疫中異型微孢子蟲的頻繁出現(xiàn)， 野外昆蟲微孢子蟲對家蠶的交叉感染備受關(guān)注。普遍認(rèn)為，各級(jí)蠶種母蛾檢驗(yàn)毒率的升高與野外昆蟲微孢子蟲對家蠶的交叉感染關(guān)系極大。為了給家蠶微粒子病防控提供有效的科學(xué)依據(jù)，筆者對從云南省蒙自地區(qū)捕捉到的菜粉蝶中分離的微孢子蟲進(jìn)行了多次試驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)菜粉蝶中的微孢子蟲種類具有多樣態(tài)性、胚種傳染性，試驗(yàn)研究結(jié)果與部分學(xué)者的報(bào)道有一定的差異性。為降低菜粉蝶微孢子蟲對蠶業(yè)生產(chǎn)的危害，使蠶業(yè)生產(chǎn)健康發(fā)展，在蠶種繁育過程中必須控制其對各級(jí)家蠶母蛾的感染。

1 歷年對菜粉蝶攜帶微孢子蟲的調(diào)查情況

多數(shù)十字花科的作物都是菜粉蝶幼蟲（菜青蟲）的食源。自2008年以來，筆者采集云南蒙自地區(qū)桑園周圍的菜粉蝶，并調(diào)查其體內(nèi)微孢子蟲自然感染情況，結(jié)果見表1。

從3年的調(diào)查情況（表1）看，各年度采集的菜粉蝶微孢子蟲自然感染率均有差異，3年平均為39 83%。但在同一年中，隨著抽樣時(shí)間的后移，微孢子自然感染率增加。據(jù)國內(nèi)外學(xué)者報(bào)道，在各地發(fā)現(xiàn)的微孢子自然感染率也不盡相同 [1]。

2 添食試驗(yàn)材料與方法

2 1 添食病原提取

本次添食試驗(yàn)的菜粉蝶微孢子，是從原蠶點(diǎn)桑園附近的紫甘藍(lán)菜地捕捉到的菜粉蝶中提取的，共鏡檢927頭菜粉蝶，有372頭體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了多態(tài)型微孢子，帶毒率為4013%。分別將其研磨、集中提取離心，病原原液濃度達(dá)107粒/mL。

2 2 添食蠶品種

青松、皓月原蠶，云蠶7×云蠶8的1代雜交種。

2 3 鏡檢調(diào)查材料

添食菜粉蝶微孢子感染的當(dāng)代4～5齡死蠶、死蛹、母蛾及其子代3齡起蠶和4～5齡死蠶、死蛹、母蛾。

2 4 添食試驗(yàn)方法

2 4 1 分區(qū)添食當(dāng)代蠶

把飼養(yǎng)至4齡的青松、皓月原蠶和云蠶7×云蠶8的1代雜交蠶分為4個(gè)小區(qū)，每區(qū)定200頭進(jìn)行飼養(yǎng)并全程跟蹤調(diào)查。其中青松、皓月原蠶試驗(yàn)各1區(qū)，區(qū)號(hào)（編號(hào)）為1、2，云蠶7×云蠶8的1代雜交種試驗(yàn)1區(qū)，區(qū)號(hào)（編號(hào)）為3，另設(shè)一區(qū)云蠶7×云蠶8的1代雜交種為對照。

2 4 2 添食濃度

添食青松、皓月、云蠶7×云蠶8的濃度為4 48×107、3 00×107、1 95×107粒/mL，對照區(qū)不添食。將以上3種濃度的菜粉蝶微孢子蟲液均勻涂抹在桑葉上稍晾干，分別給青松、皓月原蠶（4齡第2天添）和云蠶7×云蠶8的1代雜交蠶（5齡餉食添），待添食葉基本吃完后再按常規(guī)飼養(yǎng)，給桑3次/d，并全程清洗桑葉。

3 結(jié)果與分析

3 1 菜粉蝶微孢子蟲對當(dāng)代蠶體質(zhì)量和繭質(zhì)的影響

上蔟的前1 d（第7天）對各添食試驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)的蠶分別進(jìn)行蠶體質(zhì)量稱量。上蔟后對各飼育區(qū)號(hào)的全繭量、結(jié)繭率、死籠率等進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果見表2。

桑蠶的體質(zhì)量、全繭量、結(jié)繭率、死籠率4個(gè)指標(biāo)直接反映蠶食桑量的大小及蠶體的健康程度。食桑量越大，蠶體越重，蠶體健康度越高，絲量越多，全繭量越高。從表2可以看出，各添食試驗(yàn)區(qū)與對照區(qū)在5齡第7天的蠶體質(zhì)量、上蔟后的全繭質(zhì)量方面雖有一定差距，但差異不太明顯，表明各試驗(yàn)區(qū)蠶體健康。從結(jié)繭率、死籠率方面看，也沒有明顯差異，表明給家蠶添食菜粉蝶微孢子后，對家蠶當(dāng)代蠶桑飼養(yǎng)影響較小。

3 2 菜粉蝶微孢子對當(dāng)代家蠶母蛾及所產(chǎn)卵量、卵質(zhì)的影響

發(fā)蛾后，通過對各試驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)的母蛾進(jìn)行單蛾鏡檢，發(fā)現(xiàn)添食試驗(yàn)區(qū)母蛾感病率很高，平均感病率高達(dá)97%，而對照種感病率為0。通過對交制種，調(diào)查了患病母蛾所產(chǎn)的蠶卵與對照種所產(chǎn)的蠶卵在各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)上的差異性，結(jié)果見表3。

從表3可以看出，試驗(yàn)區(qū)與對照區(qū)蠶卵在各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)上都無明顯差異，產(chǎn)卵數(shù)、良卵數(shù)、良卵率、孵化率均合格，均在農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)允許的范圍之內(nèi)，表明菜粉蝶微孢子蟲對當(dāng)代母蛾及所產(chǎn)卵量、卵質(zhì)的影響較小或無影響。

3 3 菜粉蝶微孢子對家蠶胚種傳染性的影響

通過對添食蠶的當(dāng)代母蛾進(jìn)行鏡檢，發(fā)現(xiàn)母蛾感病率非常高，每個(gè)視野中菜粉蝶微孢子達(dá)40粒以上的比例占367%。對感染微孢子的當(dāng)代母蛾所產(chǎn)的蠶卵孵化后分別鏡檢卵殼和蟻蠶，以蛾為單位計(jì)算，蟻蠶檢出有菜粉蝶微孢子蟲的平均概率為92 41%，對照區(qū)檢出率為0；卵殼檢出有菜粉蝶微孢子的概率為88 61%，對照區(qū)檢出率為0，感病母蛾所生產(chǎn)的蠶種并不是每一個(gè)卵圈（蟻蠶、卵殼）都能檢驗(yàn)到微孢子蟲，這與雄蛾帶毒通過交配傳給雌蛾有關(guān)（表4） [2]；隨后，對當(dāng)代母蛾檢驗(yàn)感病的部分卵圈收蟻飼養(yǎng)，對3齡起蠶進(jìn)行菜粉蝶微孢子檢測。結(jié)果表明：檢驗(yàn)到3齡起蠶611頭，有菜粉蝶微孢子蟲的有31頭，檢出菜粉蝶微孢子的平均概率只有5 07%，說明菜粉蝶孢子蟲對家蠶的胚種傳染率不高 [3]。

3 4 菜粉蝶微孢子蟲對子代蠶蛾感染情況分析

通過對當(dāng)代感病母蛾所產(chǎn)的2個(gè)卵圈與1個(gè)對照種卵圈分別進(jìn)行繼代飼養(yǎng)，調(diào)查結(jié)果見表5。

由表5可以看出，雖然當(dāng)代感病母蛾每個(gè)鏡檢視野中含有的微孢子數(shù)不同，但是其子代因菜粉蝶微孢子感染的蠶蛾以及飼養(yǎng)過程中病死蠶、病死蛹的比例都很低，只有少數(shù)蠶蛾（3%～5%）帶毒，說明菜粉蝶微孢子后期感染力較弱 [4]，應(yīng)該是由寄主與宿主之間的不適應(yīng)性所造成的。

3 5 子代家蠶蠶繭的各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的調(diào)查

從子代蠶產(chǎn)繭的情況看，蠶在上蔟后沒有不結(jié)繭蠶發(fā)生，結(jié)繭率高，產(chǎn)繭量、全繭量、繭層量、繭層率都在正常范圍，達(dá)到常規(guī)飼養(yǎng)水平，單張產(chǎn)繭可達(dá)到40 kg左右，與對照區(qū)無明顯差異（表6）。

4 小結(jié)

通過對添食菜粉蝶微孢子的當(dāng)代和子代家蠶進(jìn)行試驗(yàn)研究，全面了解了菜粉蝶微孢子對家蠶幼蟲、蠶繭、母蛾、蠶卵的危害情況。為在檢驗(yàn)過程中識(shí)別該類型孢子提供判別依據(jù)，明確孢子來源，可進(jìn)一步減少該類型孢子給蠶種檢疫帶來的風(fēng)險(xiǎn)。野外昆蟲中菜粉蝶成蟲的微孢子自然感染率很高，調(diào)查顯示云南蒙自地區(qū)3年平均感染率為39 83%。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，添食該微孢子后雖然對家蠶有很強(qiáng)的感染力， 可使母蛾感病率達(dá)97%，感病母蛾所產(chǎn)的蠶卵、卵殼和下一代蟻蠶的檢出率都很高（以蛾為單位集團(tuán)檢驗(yàn)），但3齡起蠶的單頭檢出率卻不高，即胚種傳染率比家蠶微孢子胚種傳染率低了很多（此次試驗(yàn)的菜粉蝶微孢子胚種傳染率為507%，而家蠶微孢子胚種傳染率為11 4%～27 9% [5]）。

如果在蠶的幼蟲階段食下菜粉蝶微孢子，蠶能正常生長、發(fā)育，完成其生活世代，對當(dāng)代蠶的體質(zhì)、繭質(zhì)、產(chǎn)卵量、卵質(zhì)等各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)及次代蠶的各項(xiàng)繭質(zhì)指標(biāo)無不良影響。因此，對感病母蛾所生產(chǎn)的蠶種，只要精心飼養(yǎng)，能正常上蔟結(jié)繭，對絲繭育產(chǎn)量質(zhì)量基本沒有影響。但是它對種繭育影響非常大，對各級(jí)蠶種生產(chǎn)在母蛾檢驗(yàn)中孢子鑒別帶來了很大的難度 [6]，加大了母蛾微孢子的檢出率，增加了蠶種淘汰的風(fēng)險(xiǎn)，影響蠶業(yè)生產(chǎn)的健康發(fā)展。因此，還是要進(jìn)一步控制其對家蠶的感染。為降低其對蠶業(yè)生產(chǎn)的危害，在原蠶飼養(yǎng)區(qū)域附近、桑園周圍不得種植十字花科作物，特別是不能種植甘藍(lán)科蔬菜，以減少菜粉蝶的發(fā)生源，減少菜粉蝶微孢子對家蠶的交叉感染。

參考文獻(xiàn)： [HJ1 75mm]

[1] 沈中元，徐 莉，王紅林，等 菜粉蝶微孢子蟲對家蠶的病原性研究[J] 中國蠶業(yè)，1996（3）：10-11

[2]陳世良，高建華，楊榮貴，等 家蠶雌雄蛾交配后微孢子蟲對雌蛾的影響[J] 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（2）：115-117

[3]陳世良，高 翔，張金祥，等 云南菜粉蝶微孢子蟲感染家蠶的病原性研究[J] 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015（2）：913-917

[4]廖模祥，劉吉平，張國平，等 兩種昆蟲微孢子蟲對家蠶致病性研究[J] 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（7）：139-142

[5]孫 勝，宗 浩，楊小蓉 家蠶微孢子對菜青蟲的感染與致病性研究[J] 四川師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，24（1）：69-71

[6]劉吉平，曾 玲 微孢子蟲生物多樣性研究的述評[J] 昆蟲知識(shí)，2006，43（2）：153-158