王 檀，仕 麗

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，長(zhǎng)春 130021）

助陽通痹顆粒對(duì)博萊霉素致肺纖維化模型大鼠肺組織MMP-9和MMP-13活性的影響

王 檀，仕 麗*

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，長(zhǎng)春 130021）

目的 研究助陽通痹顆粒對(duì)肺纖維化動(dòng)物模型大鼠肺組織中MMP-9、MMP-13含量的影響，明確助陽通痹顆粒治療間質(zhì)性肺疾病及改善相關(guān)指標(biāo)的藥效學(xué)作用。方法 根據(jù)供試品助陽通痹顆粒的功能及主治，采用氣管內(nèi)一次性注射博萊霉素方法復(fù)制肺纖維化動(dòng)物模型，分別于造模后第7、14、28天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)選取10只動(dòng)物做相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。以醋酸潑尼松片作為陽性對(duì)照藥物。結(jié)果 助陽通痹顆粒在肺纖維化早期階段阻止了肺組織內(nèi)MMP-9、MMP-13含量的增多，抑制肺泡間隔增厚，延緩肺纖維化進(jìn)程;晚期阻止了肺組織內(nèi)MMP-9含量的增多，以及MMP-13含量的降低，抑制肺間質(zhì)膠原的增多，降低了肺纖維化的損傷程度。結(jié)論 助陽通痹顆?？擅黠@抑制肺纖維化造成的肺實(shí)變，可阻止博萊霉素所致的肺纖維化的進(jìn)程，對(duì)其造成的損傷有一定抑制作用。

助陽通痹顆粒;博萊霉素;肺纖維化;MMP-9;MMP-13

肺纖維化是間質(zhì)性肺疾病的終末結(jié)局［1］。博萊霉素是從鏈霉菌屬中一個(gè)產(chǎn)抗生素株中提取出的糖膚類物質(zhì)，使用早期可出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)及類似肺炎癥狀，后期則產(chǎn)生嚴(yán)重的肺纖維化［2］。由于其導(dǎo)致動(dòng)物肺間質(zhì)纖維化模型與人類肺間質(zhì)纖維化病理過程相似，常被用來制作肺纖維化的動(dòng)物模型［3］。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)Wistar大鼠，體質(zhì)量220～250 g，雌、雄各半，180 只。

1.2 藥品與試劑 助陽通痹顆粒，10 g/袋;醋酸潑尼松片，5 mg/片，100 片/瓶。

1.3 試驗(yàn)儀器 電子天平:型號(hào):YP1201N;可調(diào)高速勻漿器:FSH-2A型;賀利氏（Heraeus）臺(tái)式離心機(jī)Stratos。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 試驗(yàn)分組及給藥方法 SPF級(jí)Wistar大鼠，180只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，每組30只動(dòng)物。分別為假手術(shù)組;模型組;陽性對(duì)照藥醋酸潑尼松（強(qiáng)的松）5 mg/（kg·d）組，按實(shí)驗(yàn)大鼠與人等效劑量換算系數(shù)5.4倍折算［4］，給藥劑量約為該藥物臨床每天使用等效劑量的2倍;助陽通痹顆粒為高、低劑量4.64、2.32 g/（kg·d）2個(gè)劑量組［5］。

1.4.2 檢測(cè)指標(biāo)［6］分別于造模后第7、14、28天給藥后1 h，每組隨機(jī)選取10只動(dòng)物，處死后剖取右側(cè)肺組織，按每克肺組織加9 mL生理鹽水，制成10%組織勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)肺組織MMP-9和MMP-13活性［7］。

2 結(jié)果

助陽通痹顆粒對(duì)肺纖維化大鼠肺組織MMP-9、MMP-13活性的影響，見表1。

表1 助陽通痹顆粒對(duì)肺纖維化模型大鼠肺組織MMP-9、MMP-13活性的影響（±s，n=10） U/mg

表1 助陽通痹顆粒對(duì)肺纖維化模型大鼠肺組織MMP-9、MMP-13活性的影響（±s，n=10） U/mg

注:與模型組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01

組 別 給藥劑量/g/（kg·d）MMP-9活性第7天 第14天 第28天MMP-13活性第7天 第14天 第28天假手術(shù)組 — 13.86 ±1.20## 13.12 ±1.04## 12.84 ±1.00## 39.52 ±09.81## 39.79 ±1.02## 39.16 ±2.55##模型組 — 17.93 ±1.55 19.32 ±2.88 16.92 ±1.47 50.43 ±4.77 52.98 ±4.86 32.10 ±4.29醋酸潑尼松組 10 15.67 ±1.89# 15.17 ±1.75# 15.18 ±1.54# 44.67 ±4.26# 45.11 ±4.47## 36.33 ±2.47#助陽通痹顆粒組 4.64 16.07 ±1.50# 16.33 ±1.41# 15.76 ±0.74 45.09 ±3.83# 46.52 ±2.83## 36.09 ±3.55#助陽通痹顆粒組 2.32 16.93 ±1.03 16.93 ±1.27# 16.76 ±0.63 45.05 ±7.28 48.87 ±2.79# 35.27 ±4.14

3 小結(jié)

基質(zhì)金屬蛋白酶-9可以降解基底膜，使基底膜和肺泡隔中形成許多空隙，有利于激活成纖維細(xì)胞向肺泡隔空隙中遷移和增殖，導(dǎo)致肺泡隔增厚［8-12］?；|(zhì)金屬蛋白酶-13主要降解Ⅰ-Ⅲ型膠原，并具有明膠酶樣作用，是鼠類主要的間質(zhì)膠原酶。因此，MMP-9、MMP-13共同參與了肺泡炎形成，肺基底膜破壞及肺纖維化形成過程。助陽通痹顆?？擅黠@抑制肺纖維化造成的肺實(shí)變，可阻止博萊霉素所致的肺纖維化的進(jìn)程，對(duì)其造成的損傷有一定抑制作用。

:

［1］葉清，李燕芹.肺纖維化動(dòng)物模型［J］.臨床肺科雜志，2011，16（8）:1248.

［2］WANG Q J，WANG Y J，DALLAS M，et al.Effect of antibody againstinte grin on Bleomycin induced pulmonary fibrosis in mice［J］.Biochan Phatxnae，2000，60（12）:1949-1958.

［3］仕麗，胡少丹，王檀，等.溫肺通痹顆粒對(duì)間質(zhì)性肺疾病患者血清TNF-α的影響［J］.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，30（2）:288-289.

［4］趙陽，周賢梅.肺纖維化發(fā)病機(jī)制研究概況［J］.吉林中醫(yī)藥，2010，30（3）:274-276.

［5］鄒宇，張偉.從虛論治肺間質(zhì)纖維化［J］.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，25（1）:60-61.

［6］楊光，宮曉燕，張海洋，等.中藥復(fù)方抗肺纖維化機(jī)制研究［J］.吉林中醫(yī)藥，2014，34（4）:15-16.

［7］練毅剛，張立山，吳華陽，等.扶正剔邪搜絡(luò)方改善肺纖維化大鼠肺功能的機(jī)制研究［J］.吉林中醫(yī)藥，2015，35（4）:92.

［8］唐霞，辛華雯，李維亮，等.黃連素對(duì)HepG2細(xì)胞CYP3A4和P-gp的影響和作用機(jī)制研究［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2015，36（1）:13-19.

［9］丁明橋，許朝霞，陳瑞，等.銀杏葉提取物對(duì)肺纖維化大鼠模型血清PDGF及TGF-β1的影響［J］.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27（4）:19-20.

［10］孔勤，陳民利.特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2012，12（8）:77-83.

［11］李麗君，李麗娜，李根茂，等.不同配比與劑量黃芪當(dāng)歸對(duì)藥對(duì)肺纖維化小鼠肺形態(tài)學(xué)及羥脯氨酸含量影響［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，10（3）:32-35.

［12］郭蘇云.斂肺止咳飲治療肺纖維化43例臨床療效［J］.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2015，31（12）:105-106.

Zhuyang Tongbi granule on pulmonary fibrosis caused by bleomycin model rat lung tissue MMP-9 and the activity of MMP-13

WANG Tan，SHI Li*
（The Affiliated Hospital to Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130021，China）

ObjectiveTo study the Zhuyang Tongbi particles the animal model of pulmonary fibrosis in rat lung tissue MMP-9，the influence of the content of MMP-13，clear Zhuyang Tongbi particles in the treatment of interstitial lung disease and improve the pharmacodynamic effect of related indicators.MethodsAccording to the test samples to Zhuyang Tongbi particles function and attending，endotracheal one-off injection of bleomycin methods copying animal model of pulmonary fibrosis in building 7，14，28 days after each group of randomly selected from three time points related parameters of 10 animals do detection.The prednisone acetate as a positive control drug.ResultsZhuyang Tongbi particles in the early period of pulmonary fibrosis block MMP-9 in the lung tissue，MMP-13 content increasing，inhibition of thickening of alveolar interval，delay the process of pulmonary fibrosis;Terminal block MMP-9 levels in the lung tissue，and the content of MMP-13，inhibition of pulmonary intersdtitial collagen increased，decreased the damage degree of pulmonary fibrosis.ConclusionZhuyang Tongbi granule can obviously inhibit consolidation of the lung caused by pulmonary fibrosis，can prevent pulmonary fibrosis induced by bleomycin process，the damage has certain inhibitory effect.

Zhuyang Tongbi particles;Bleomycin;pulmonary fibrosis;MMP-9;MMP-13

R285.5

A

2095－6258（2015）04－0686－02

10.13463/j.cnki.cczyy.2015.04.009

吉林省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（201215160）。

王 檀（1963－），男，博士，主任醫(yī)師，主要從事中醫(yī)內(nèi)科學(xué)方向研究。

仕 麗，電話－15948000558，電子信箱－15948000558@163.com

2015－04－22）