蔡振榮　凌　佳　闞麗虹　莊曉華　陸　銘★　羅心平

·臨床研究·

急性冠脈綜合征患者細(xì)胞因子檢測及臨床意義

蔡振榮凌佳闞麗虹莊曉華陸銘★羅心平

目的 探討急性冠脈綜合癥患者冠脈病變程度與血清IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-10水平變化關(guān)系。方法 選取2013年1月至2014年6月急性冠脈綜合征患者120例作為觀察組，同期選取健康獻(xiàn)血者40例作為對照組，采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測定白細(xì)胞介素-1（IL-1）、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和IL-10，分析觀察組和對照組差異，觀察組治療前后差異及相關(guān)性分析。結(jié)果 急性冠脈綜合征患者IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α高于正常健康人，IL-10低于正常健康人，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組血清細(xì)胞因子水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），經(jīng)兩兩比較，多支病變組血清促炎細(xì)胞因子水平較高，抑炎因子水平較低（P＜0.01）；冠狀動(dòng)脈介入（PCI）治療后患者IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α均明顯降低，IL-10明顯升高（P＜0.01）；冠脈病變支數(shù)和促炎細(xì)胞因子IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α成正相關(guān)，與抑炎細(xì)胞因子IL-10成負(fù)相關(guān)。結(jié)論 急性冠脈綜合征患者冠脈病變程度與細(xì)胞因子水平關(guān)系密切，監(jiān)測細(xì)胞因子水平可作為判斷急性冠脈綜合征患者冠脈病變程度及預(yù)后的指標(biāo)。

急性冠脈綜合征 促炎細(xì)胞因子 抑炎細(xì)胞因子

急性冠脈綜合征（ACS）是一組由急性心肌缺血引起的臨床綜合征，病情兇險(xiǎn)。近年來，發(fā)病率增高，且有年輕化趨勢［1］。以往判斷急性冠脈綜合征患者冠脈病變程度必須依靠冠脈造影檢查，而冠脈造影為有創(chuàng)手術(shù)，手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)大，手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥多，擁有導(dǎo)管室及介入資質(zhì)醫(yī)生的醫(yī)院才能開展，而測細(xì)胞因子只需外周血，操作方便，醫(yī)療費(fèi)用低［2］。本文對120例ACS患者進(jìn)行血清白細(xì)胞素-1（IL-1）、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和IL-10檢測，探討ACS患者冠脈病變程度與細(xì)胞因子水平關(guān)系及臨床意義，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 選取2013年1月至2014年6月在本院住院或門診診治的ACS患者120例（觀察組），均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］，其中男78例，女42例；平均年齡（62.6±8.8）歲。其中急性心肌梗死30例、不穩(wěn)定性心絞痛90例。同期選取本院健康獻(xiàn)血者40例作為對照組，其中男26例，女14例；平均年齡（50.6±6.2）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合急性冠脈綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）年齡20～70歲，性別不限。（3）簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：有慢性嚴(yán)重心肺功能不全者，有糖尿病史者，有惡性腫瘤者，妊娠或哺乳期婦女。病例脫落：符合入觀察組標(biāo)準(zhǔn)而納入患者，無論何時(shí)何因未能完成半年的觀察期，均判為脫落病例。

1.2方法 （1）觀察組治療前及對照組兩組清晨空腹采肘靜脈血3ml，室溫下分離血清后于-20℃保存至同批測定IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-10。采用雙抗體夾心法進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），細(xì)胞因子測定試劑盒購自深圳晶美公司，具體操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。（2）根據(jù)冠脈造影結(jié)果分單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組。（3）觀察組患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上經(jīng)過冠脈造影及冠狀動(dòng)脈介入（PCI）術(shù)，支架置入術(shù)后半年測定血清IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-10水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，方差不齊的采用近似t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)。治療前后比較采用配對t檢驗(yàn)，三組均數(shù)的比較，先采用F檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)采用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1觀察組治療前與對照組血清細(xì)胞因子的比較 見表1。

表1　觀察組治療前與對照組血清細(xì)胞因子的比較［ng/L，（±s）］

表1　觀察組治療前與對照組血清細(xì)胞因子的比較［ng/L，（±s）］

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2.2單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組血清細(xì)胞因子的比較 見表2、表3。

表2　單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組血清細(xì)胞因子的比較［ng/L，（±s）］

表2　單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組血清細(xì)胞因子的比較［ng/L，（±s）］

注：與治療前比較，*P＜0.01，#P＜0.05；與單支或雙支組比較，▲P＜0.05

組別nIL-1IL-2IL-4治療前治療后治療前治療后治療前治療后單支247.98±4.675.38±2.36*23.16±2.218.36±1.88*28.01±8.129.56±3.64*雙支569.48±5.145.89±3.14*25.64±3.879.47±2.14*33.45±8.8810.84±2.59*多支4011.32±6.13▲7.01±3.11*#27.64±4.33▲11.24±3.15*#36.87±8.11▲11.48±2.87*# F 32.5445.23124.3584.33244.3876.314 P 0.0000.0000.0000.0000.0000.000

2.3冠脈病變支數(shù)與細(xì)胞因子水平的相關(guān)性分析 冠脈病變支數(shù)和促炎細(xì)胞因子IL-1（rs=0.717，P=0.002）、IL-2（rs=0.717，P=0.000）、IL-4（rs=0.822，P=0.000）、IL-6（rs=0.846，P=0.000）、IL-8（rs=0.886，P=0.000）、TNF-α（rs=0.889，P=0.000）成正相關(guān)，與抑炎細(xì)胞因子IL-10（rs=-0.843，P=0.000）成負(fù)相關(guān)。

表3　單支、雙支及多支病變?nèi)齻€(gè)亞組血清細(xì)胞因子的比較［ng/L，（x±s）］

3　討論

近年來研究發(fā)現(xiàn)ACS的發(fā)生和發(fā)展與免疫反應(yīng)密切相關(guān)［3］。目前研究表明，某些細(xì)胞因子如IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8和TNF-α等與部分心血管疾病的發(fā)生和發(fā)展有一定的關(guān)系，其可由血管內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑細(xì)胞分泌，在血管內(nèi)的炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)中起重要介導(dǎo)作用，同時(shí)IL-1、IL-2、TNF、IL-4、IL-6和IL-8能促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞DNA合成及增殖［4］，因而與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生密切相關(guān)［3］。IL-1又稱淋巴細(xì)胞激活因子，是急性期免疫反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)因子，對T細(xì)胞激活，誘導(dǎo)IL-2產(chǎn)生起著基本的作用；IL-2主要由活化T細(xì)胞產(chǎn)生，是具有多向性作用的細(xì)胞因子（主要促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長、增殖、分化），其對機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染有重要作用，主要刺激T細(xì)胞生長；誘導(dǎo)細(xì)胞毒作用；對B細(xì)胞的生長及分化有一定的促進(jìn)作用［5］；IL-6可促進(jìn)T細(xì)胞表面IL-2R的表達(dá)，增強(qiáng)IL-1和TNF對TH細(xì)胞的有絲分裂作用；在感染或外傷引起的急性炎癥反應(yīng)中誘導(dǎo)急性期反應(yīng)蛋白的合成；促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化并產(chǎn)生抗體［6］；TNF分為TNFα、TNFβ兩型。前者來源于單核細(xì)胞、吞噬細(xì)胞；后者來源于T細(xì)胞。兩型的結(jié)構(gòu)雖然不同，但生物活性類似［7］。兩型均可引起腫瘤組織出血、壞死和殺傷作用，亦可引起抗感染的炎癥反應(yīng)效應(yīng)，以及對免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)、誘生作用［7］。IL-10是由輔助性T細(xì)胞2（Th2）、B細(xì)胞、單核細(xì)胞和肥大細(xì)胞等細(xì)胞產(chǎn)生具有多種生物活性的細(xì)胞因子［8］，其可抑制T細(xì)胞分泌γ干擾素（IFN-γ）和IL-2，同時(shí)亦可抑制T細(xì)胞增殖、作為炎癥遞質(zhì)的單核因子的產(chǎn)生以及由T細(xì)胞亞群產(chǎn)生的細(xì)胞因子［9］。

本資料結(jié)果顯示，急性冠脈綜合征患者IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α等炎癥因子水平高于正常健康人，而抑炎因子IL-10明顯低于正常健康人。說明ACS患者體內(nèi)出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，反映炎癥持續(xù)進(jìn)展，會(huì)導(dǎo)致冠脈病變程度越來越嚴(yán)重，提示可以通過某種藥物阻止炎癥反應(yīng)的發(fā)生，阻止冠脈病變進(jìn)一步發(fā)展［10，11］。研究顯示，在冠脈多支病變的患者，促炎因子濃度明顯高于雙支或單支病變患者，說明促炎因子濃度越高，冠脈病變越嚴(yán)重，通過檢測促炎癥因子濃度可判斷冠脈病變預(yù)后情況，通過治療后不同程度冠脈病變支炎癥因子濃度明顯減低，抑炎因子濃度明顯上升，提示通過監(jiān)測促炎因子或抑炎因子的水平可以判斷臨床治療效果［12，13］。另外，相關(guān)性分析結(jié)果顯示，冠脈病變支數(shù)和促炎細(xì)胞因子IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α成正相關(guān)，與抑炎細(xì)胞因子IL-10成負(fù)相關(guān)，提示通過檢測促炎因子或抑炎因子水平可反映冠脈病變支數(shù)及嚴(yán)重程度。

綜上所述，促炎因子IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和抑炎因子IL-10在急性冠脈綜合征患者動(dòng)脈粥樣硬化變化過程中發(fā)揮極其重要的作用，促炎反應(yīng)和抗炎反應(yīng)失衡可能是導(dǎo)致ACS發(fā)生的主要原因，因此監(jiān)測急性冠脈綜合征患者血清IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和抑炎因子IL-10水平，對ACS患者病情的嚴(yán)重程度可能有實(shí)用的預(yù)測價(jià)值，可用于臨床指導(dǎo)對ACS患者的治療。由于研究樣本例數(shù)較少，其準(zhǔn)確意義尚需大規(guī)模的臨床實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

1 徐風(fēng)玲，李念順，陳永生. 急性冠脈綜合征患者血清TNF-a、IL-6、IL-8變化的臨床意義. 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床，2010，21（3）：31～32.

2 張雪寧，鞠鵬. IL-6和 TNF-α水平與急性冠脈綜合征的關(guān)系及臨床意義. 吉林醫(yī)學(xué)，2014，35（27）：5990～5991.

3 何永泉，宮麗鴻，高峰，等.解毒活血對急性冠脈綜合征患者PCI術(shù)后IL-8及ICAM-1 表達(dá)的影響.中國中醫(yī)急癥，2012，21（10）：1549～1550.

4 姚瑤，王琳琳.白細(xì)胞介素-8研究進(jìn)展.實(shí)用兒科臨床雜志，2009，24（10）： 789～792.

5 Simsek E，Karapinar K，Bugra O.Effects of albumin and synthetic polypeptide-coated oxygenators on IL-1，IL-2，IL-6，and IL-10 in open heart surgery.Asian J Surg，2014， 37（2）93～99.

6 Fragoso JM，Delgadillo H，Llorente L.Interleukin 1 receptor antagonist polymorphisms are associated with the risk of developing acute coronary syndrome in Mexicans. Immunol Lett，2010，133（2）：106～111.

7 Wang YN，Che SM，Ma AQ. Clinical significance of serum cytokines IL-1beta， sIL-2R， IL-6， TNF-alpha， and IFN-v in acute coronary syndrome. Chin Med Sci J，2004，19（2）：120～124.

8 Mizia-Stec K，Gasor Z，Zahorska-Markiewicz B.Serum tumour necrosis factor-alpha， interleukin-2 and interleukin-10 activation in stable angina and acute coronary syndromes. Coron Artery Dis，2003，14（6）：431～438.

9 Kumagai Y， Tajima Y， Ishiguro T. Production of Intraperitoneal Interleukin-6 Following Open or Laparoscopic Assisted Distal Gastrectomy. Int Surg， 2014， 99（6）：812～818.

10 Ikeda U， Ito T， Shimada K. Interleukin-6 and acute coronary syndrome. Clin Cardiol，2001，24（11）：701～704.

11 Ragino IuI，Kuimov AD，Polonskaia IaV.Dynamics of changes of blood inflammatory-oxidative biomarkers in acute coronary syndrome. Kardiologiia，2012，52（2）：18～22.

12 Zhang X，Zhang B，Zhang M.Interleukin-8 gene polymorphism is associated with acute coronary syndrome in the Chinese Han population. Cytokine，2011，56（2）：188～191.

13 Pigossi SC，Alvim-Pereira F，Alvim-Pereira CC.Association of interleukin-4 gene polymorphisms with dental implant loss. Implant Dent， 2014，23（6）：723～731.

Objective To explore the relationship between the severity of coronary lesions in patients with acute coronary syndrome and changes of serum IL-1，IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，TNF- and IL-10 levels. Methods From January in 2013 to June in 2014，120 cases with Acute coronary syndrome accepted treatment in our hospital was as the observation group，at the same period，40 cases normal person was as the control group，using double antibody sandwich enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）for determination of IL-1，IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，TNF- alpha and IL-10，the analysis of the observation group and the control group differences，to observe and analyze the difference and correlation between groups before and after treatment. Results The patients with acute coronary syndrome IL-1，IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，TNF- alpha was higher than that in normal healthy people，IL-10 lower than normal healthy people，the difference was statistically signifi cant（P＜0.01）；comparison of single branch，double branch and multi branch lesion in three subgroups of serum cytokine levels，the difference was statistically signifi cant（P＜0.01），The two two comparison，multi vessel disease group serum proinfl ammatory cytokines levels of infl ammatory cells is higher，anti infl ammatory factor level is low（P＜0.01）；after treatment，IL-1，IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，TNF- alpha were signifi cantly decreased，IL-10 increased signifi cantly（P＜0.01）；coronary disease and proinfl ammatory cytokines IL-1，IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，TNF- alpha is positive correlation，and anti infl ammatory cytokines IL-10 negatively correlated. Conclusion Acute coronary syndrome in patients with coronary artery disease and degree of cytokine levels closely，factor level monitoring cell can be used to judge the degree of coronary artery lesions in patients with acute coronary syndrome and prognosis of patients with index.

Acute coronary syndrome Infl ammatory cytokine Anti infl ammatory cytokines

上海市衛(wèi)生計(jì)生委課題（20124232）

201399 上海市浦東醫(yī)院（蔡振榮 凌佳 闞麗虹 莊曉華 陸銘）

200040復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院心內(nèi)科（羅心平）