董衛(wèi)英（河北省張家口市經(jīng)開(kāi)區(qū)姚家房鎮(zhèn)政府 075000）

新城疫La Sota疫苗飲水對(duì)蛋雞免疫效果試驗(yàn)

董衛(wèi)英（河北省張家口市經(jīng)開(kāi)區(qū)姚家房鎮(zhèn)政府 075000）

在蛋雞養(yǎng)殖過(guò)程中，免疫工作非常重要，特別是對(duì)雞新城疫（ND）的免疫最關(guān)鍵。本試驗(yàn)研究新城疫La Sota苗飲水對(duì)蛋雞的免疫效果，以期為生產(chǎn)提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

（1）試驗(yàn)動(dòng)物：1日齡雛雞600只，購(gòu)于河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)。

（2）雞新城疫低毒力活疫苗（La Sota株，至少106.0EID50/羽份），購(gòu)于瑞普生物制品廠。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組

將全部試驗(yàn)用雞按不同免疫途徑隨機(jī)各平均分成4組，每組50只。試驗(yàn)雛雞于35日齡進(jìn)行ND-La弱毒活疫苗免疫，Ⅰ～Ⅳ組分別用2、3、4、5倍量飲水免疫，全部雞只采用統(tǒng)一供料自由采食、自由飲水。

1.2.2 飲水免疫

免疫前對(duì)雞群停水2～3h，疫苗采用涼開(kāi)水稀釋，并加入0.1～0.2%的脫脂牛奶，于0.5～1h內(nèi)飲完。

1.3 測(cè)定指標(biāo)

1.3.1 血清抗體滴度（Hl）測(cè)定

分別在免疫前和免疫后1W、2W、3W、4W在不同免疫途徑的各分組隨機(jī)挑起5只雞，稱重，經(jīng)頸動(dòng)脈采血，制備血清，采用微量血凝集抑制試驗(yàn)（HI）檢測(cè)ND抗體滴度，結(jié)果以Nlog2表示。

1.3.2 免疫器官指數(shù)的計(jì)算

上述采血完畢，采集脾臟、胸腺、法氏囊三種免疫器官，稱取濕重，按公式：脾臟（胸腺或法氏囊）指數(shù)=脾臟（胸腺或法氏囊）濕重（g）/雞活體重（kg），計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 飲水免疫HI抗體滴度變化規(guī)律

由表1可見(jiàn)，飲水免疫不同劑量組新城疫HI抗體滴度在免疫1W后3倍量與5倍量差異不顯著（P＞0.05）；免疫后第2W各組差異不顯著（P＞0.05）；免疫后第3W，4倍量組與其它各組比較，均高于其它組，且差異極顯著（P＜0.01），2、3、5倍量組新城疫HI抗體效價(jià)均低于4log2。說(shuō)明新城疫La Sota弱毒苗飲水免疫適宜的使用劑量是4倍量，且每隔3W免疫1次，對(duì)ND的感染能夠起到很好地保護(hù)作用。

2.2 飲水免疫對(duì)胸腺發(fā)育的影響

從表2看出，飲水免疫后胸腺指數(shù)變化，1～4W隨著免疫時(shí)間的延長(zhǎng)，胸腺指數(shù)增高，但在2～3W上升緩慢，甚至略有下降。3W后迅速上升，最高4倍量組達(dá)到5.77±0.02g/kg，且與各組間差異極顯著（P＜0.01），說(shuō)明飲水免疫4倍量組更有利于促進(jìn)胸腺的發(fā)育；3和5倍量組差異不顯著（P＞0.05）。免疫后1、2W各組間差異極顯著（P＜0.01）

2.3 飲水免疫對(duì)法氏囊發(fā)育的影響

由表3可知，飲水免疫后法氏囊指數(shù)的變化，2和5倍量組在免疫后1W達(dá)到高峰，之后法氏囊指數(shù)開(kāi)始下降。3和4倍量組在免疫后2W達(dá)到高峰，之后開(kāi)始法氏囊萎縮明顯，法氏囊指數(shù)下降迅速。免疫后4W時(shí)4倍量組高于3倍量組，比較差異極顯著（P＜0.01）。2倍量組法氏囊指數(shù)最低，與各組間差異極顯著。

表1 飲水免疫后不同時(shí)間內(nèi)各組雞血清HI效價(jià)

表2 飲水免疫對(duì)胸腺的影響

表3 飲水免疫對(duì)法氏囊的影響

2.4 飲水免疫對(duì)脾臟發(fā)育的影響

由表4可知，飲水免疫脾臟指數(shù)變化，免疫后2W脾臟指數(shù)達(dá)到高峰，3和5倍量組差異不顯著；4倍量組最高，與其它各組差異極顯著（P＜0.01）。2～3W下降較緩。4W4倍量組脾臟指數(shù)極顯著高于其它劑量組（P＜0.01）；3和5倍量組差異不顯著（P＞0.05）；2倍量組最低。

3 小結(jié)

在本試驗(yàn)中飲水免疫屬于黏膜免疫，主要通過(guò)特異性黏膜免疫系統(tǒng)來(lái)完成，即黏膜結(jié)合淋巴組織（眼結(jié)膜、腸道黏膜和生殖道黏膜）誘導(dǎo)產(chǎn)生分泌型IgA，并通過(guò)淋巴和血液循環(huán)到達(dá)全身黏膜組織發(fā)揮免疫效應(yīng)。試驗(yàn)證明，新城疫La Sota疫苗是通過(guò)黏膜進(jìn)行免疫接種，可產(chǎn)生大量的SIgA，在黏膜局部產(chǎn)生免疫應(yīng)答，還可引起全身性的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答。

本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)35日齡雛雞血清中的抗體監(jiān)測(cè)表明，同樣的La Sota弱毒苗和免疫日齡，采取不同的免疫劑量，雞體產(chǎn)生抗體水平有一定差異。飲水免疫方法簡(jiǎn)單、省事，對(duì)雞產(chǎn)生的應(yīng)激較小，抗體水平在免疫后2W達(dá)到最高峰，以4倍量組最好。

胸腺和法氏囊是禽類中樞免疫器官，胸腺參與細(xì)胞免疫，法氏囊早期是B細(xì)胞發(fā)育的主要場(chǎng)所，參與體液免疫；脾臟是外周免疫器官，是T、B細(xì)胞定居繁殖的場(chǎng)所，提供特異性細(xì)胞免疫和體液免疫力。它們的器官指數(shù)可直接反映該器官的發(fā)育狀態(tài)。本次試驗(yàn)通過(guò)免疫指數(shù)的變化證明，雛雞使用弱毒疫苗進(jìn)行免疫，產(chǎn)生的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答持續(xù)時(shí)間較短，這可能與雛雞黏膜免疫系統(tǒng)不夠完善有關(guān)。飲水免疫能很好促進(jìn)胸腺、法氏囊和脾臟的發(fā)育，提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能，且以4倍量效果較好。因此，蛋雞新城疫La Sota苗飲水免疫的適宜劑量為4倍量。

表4 飲水免疫對(duì)脾臟的影響