傅金瑞

目前國(guó)外有關(guān)自身抗體的親和力高低與相關(guān)自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸等關(guān)系的研究已有報(bào)道。如Fialová等［1］發(fā)現(xiàn)與年齡、性別等方面相對(duì)應(yīng)的疑似神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者對(duì)比，多發(fā)性硬化癥患者腦脊液中抗神經(jīng)細(xì)絲低分子量亞基抗體以及抗tau蛋白抗體的親和力顯著增高，提示自身抗體親和力的檢測(cè)有助于自身免疫性疾病的診斷。又如Cucnik 等［2］研究了自身抗體抗 β2 糖蛋白 I（anti－β2 glucoprotein I，anti－β2GPI） 的親和力高低與抗心磷脂綜合征（antiphospholipid syndrome，APS）以及系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupuserythematosus，SLE）臨床表現(xiàn)之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)在SLE組，低親和力antiβ2GPI占多數(shù)；而高親和力 anti－β2GPI在 APS組占優(yōu)勢(shì)，同時(shí)該研究結(jié)果顯示，具有高親和力antiβ2GPI的患者多表現(xiàn)為血管栓塞。上述研究均說(shuō)明某些自身抗體親和力的高低與相關(guān)自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展及臨床表現(xiàn)等方面存在著某種關(guān)聯(lián)。本文研究對(duì)抗甲狀腺球蛋白抗體（anti－thyroglobulin antibody，anti－TG Ab）和抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體（anti－thyroid peroxidase antibody，anti－TPOAb）親和力與橋本甲狀腺炎（hashimoto＇sthyroiditis，HT）患者甲狀腺功能的相關(guān)性作初步探討，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年2月至2014年8月間在我院就診且anti－TG Ab和anti－TPOAb檢測(cè)均為陽(yáng)性，并據(jù)臨床表現(xiàn)、體征、甲狀腺彩超、實(shí)驗(yàn)室檢查及組織病理學(xué)檢查確診的HT患者52例，其中男6例，女 46例，年齡 17～64 歲，平均年齡（38.8±16.3）歲，其中甲狀腺功能異常（減退）患者33例，甲狀腺功能正?；颊?9例。甲狀腺功能異常（減低）判斷標(biāo)準(zhǔn)：促甲狀腺激素升高（＞4.2 mU／L），伴有游離 T4減低（＜10.3 pmol／L）或正常。所有患者均除外心血管、肝、腎、肺等疾病。

1.2 標(biāo)本采集 抽取患者空腹肘靜脈血5 ml，以1200 g離心10 min分離血清，置－80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法

1.3.1 anti－TG Ab、anti－TPOAb 定 量 檢 測(cè) 采 用ELISA 法定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè) anti－TG Ab、anti－TPOAb水平，兩種抗體檢測(cè)試劑盒均由德國(guó)ORGENTEC公司提供。

1.3.2 anti－TG Ab和anti－TPOAb 親和力檢測(cè) 采用尿素對(duì)患者血清樣本處理后，如果患者樣本吸光度值較處理前顯著降低，則表明存在低親和力抗體，通過(guò)以下公式計(jì)算其相對(duì)親和力指數(shù)（relative avidity index，RAI）。RAI＝經(jīng)尿素處理樣本的濃度值×100／未經(jīng)尿素處理樣本的濃度值［3］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用±s表示，兩組間計(jì)量資料的比較采用t檢驗(yàn)，兩組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)。通過(guò)繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC） 曲線評(píng)價(jià) anti－TG Ab和anti－TPOAb判斷HT患者甲狀腺功能正常與否的診斷價(jià)值，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HT患者甲狀腺功能正常、異常兩組間anti－TG Ab和anti－TPOAb的RAI結(jié)果比較 甲狀腺功能異常組 anti－TG Ab和anti－TPOAb的 RAI檢測(cè)結(jié)果均高于正常組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝3.720，t＝2.840，P＝0.000，P＝0.007），見(jiàn)表1、圖1。

表1 HT患者甲狀腺功能正常、異常兩組間anti－TGAb和anti－TPOAb 的 RAI結(jié)果比較（±s）

表1 HT患者甲狀腺功能正常、異常兩組間anti－TGAb和anti－TPOAb 的 RAI結(jié)果比較（±s）

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2.2 anti－TG Ab和anti－TPOAb 的 RAI用于判斷HT患者甲狀腺功能正常與否的診斷價(jià)值評(píng)價(jià) anti－TG Ab和anti－TPOAb 的 RAI用于判斷 HT 患者甲狀腺功能正常與否的cutoff值分別為39和35，ROC曲線下面積分別為0.779和0.730，靈敏度分別為 84.8%和81.6%，特異性分別為 63.2%和64.1%，其診斷性能評(píng)價(jià)指標(biāo)見(jiàn)表2，兩種抗體RAI用于判斷HT患者甲狀腺功能狀況的ROC曲線見(jiàn)圖2、3。2.3 HT患者甲狀腺功能異常組、正常組間anti－TG Ab和anti－TPOAb的RAI異常率比較 在甲狀腺功能異常HT組，兩種抗體同為高RAI的占54.5%（18／33），在甲狀腺功能正常 HT 組僅為15.8%（3／19），兩組間異常率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝7.520，P＝0.007）； 在甲狀腺功能異常 HT組，兩種抗體同為低 RAI的占 6.1%（2／33），在甲狀腺功能正常 HT 組達(dá) 47.4%（9／19），兩組間異常率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝12.330，P＝0.000）；僅一種抗體RAI增高的情形在甲狀腺功能異常HT組占 39.4%（13／33），在甲狀腺功能正常 HT 組占36.8%（7／19），兩組間異常率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝0.030，P＝0.868），見(jiàn)表3。

圖1 HT患者甲狀腺功能正常、異常兩組間 anti－TGAb和anti－TPOAb的 RAI結(jié)果比較

3 討論

圖2 anti－TGAb 的 RAI用于判斷甲狀腺功能正常與否的ROC曲線

圖3 anti－TPOAb 的 RAI用于判斷甲狀腺功能正常與否的ROC曲線

表2 anti－TGAb和anti－TPOAb的RAI用于判斷HT患者甲狀腺功能正常與否的診斷價(jià)值評(píng)價(jià)指標(biāo)

表3 HT患者甲狀腺功能異常組、正常組間anti－TGAb和anti－TPOAb的RAI異常率比較［n（%）］

HT是一種以自身甲狀腺組織為抗原的慢性炎癥性自身免疫性疾病。1912年日本九州大學(xué)Hashimoto首先在德國(guó)醫(yī)學(xué)雜志上報(bào)道了4例，為臨床最常見(jiàn)的甲狀腺炎癥。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為HT是自身免疫性疾病，而且是一種有明確遺傳傾向的器官特異性自身免疫性疾病，發(fā)病過(guò)程中甲狀腺結(jié)構(gòu)被大量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)，濾泡萎縮，結(jié)締組織增生，最終大多數(shù)病例伴有甲狀腺功能減退。本病多見(jiàn)于中年女性，起病隱匿，發(fā)展緩慢，病程較長(zhǎng)，主要表現(xiàn)為甲狀腺腫大，體積約為正常甲狀腺的2～3倍，表面光滑，質(zhì)地堅(jiān)韌有彈性如橡皮，明顯結(jié)節(jié)則少見(jiàn)，無(wú)壓痛，與四周無(wú)黏連，可隨吞咽運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。多數(shù)為彌漫性，少數(shù)可為局限性，部分以顏面、四肢腫脹感起病。本病發(fā)展緩慢，有時(shí)甲狀腺腫在幾年內(nèi)似無(wú)明顯變化，初期時(shí)甲狀腺功能正常，病程中有時(shí)也可出現(xiàn)甲亢，繼而功能正常，甲減，再正常，其過(guò)程類(lèi)似于亞急性甲狀腺炎；部分患者表現(xiàn)為假性甲亢，即可以有明顯甲亢的癥狀，但甲狀腺功能檢查結(jié)果卻不支持甲亢，而 anti－TG Ab和anti－TPOAb 檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性；還有表現(xiàn)為突眼型的，甲狀腺功能可正常、亢進(jìn)或減退。研究［4］發(fā)現(xiàn)甲狀腺功能減退HT患者的anti－TG Ab和anti－TPOAb水平顯著高于甲狀腺功能正常HT患者。近年研究［5］發(fā)現(xiàn)，人群中使用碘化鹽后結(jié)節(jié)性甲狀腺腫發(fā)病率降低，但自身免疫性甲狀腺炎發(fā)病率增加3倍，過(guò)量的碘補(bǔ)充一方面增加了酪氨酸的碘化，導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生增加；另一方面過(guò)量碘可誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)黏附分子－1的表達(dá)，促使單核細(xì)胞浸潤(rùn)，而細(xì)胞內(nèi)黏附分子－1在早期的炎性細(xì)胞引起的炎癥反應(yīng)中起著非常重要的作用，可以通過(guò)一系列的作用產(chǎn)生大量的活性氧物質(zhì)，從而引起甲狀腺腺體的破壞。在多種自身免疫性甲狀腺疾病中都可檢測(cè)到 anti－TG Ab和anti－TPOAb 的升高，HT 患者尤為突出，其anti－TG Ab和anti－TPOAb水平為Graves病患者抗體水平的4倍以上，陽(yáng)性率分別高達(dá)84.3%和86.3%。在HT患者中，兩種抗體尤其是anti－TPOAb陽(yáng)性時(shí)，預(yù)示有發(fā)生自身免疫性甲狀腺疾病的危險(xiǎn)［6］。

親和力檢測(cè)技術(shù)最初是由Hedman等［7］建立的，是基于抗原抗體之間的氫鍵在尿素作用下解離的原理而進(jìn)行檢測(cè)的。該技術(shù)建立以來(lái)沿用兩種方法：一種最簡(jiǎn)單的方法是OD值法，樣本不經(jīng)稀釋?zhuān)苯右設(shè)D值計(jì)算RAI值。主要缺點(diǎn)是不能解決RAI值因受特異性IgG濃度高低的影響而出現(xiàn)的明顯變異問(wèn)題，高濃度血清其RAI值偏高，而低濃度血清其RAI值又偏低。另一種是較為準(zhǔn)確的由Jenum等［8］建立的終點(diǎn)滴度法，即將樣本血清稀釋?zhuān)蛊渌禺愋訧gG的OD值處于臨界值附近，在此條件下進(jìn)行該特異性IgG的親和力測(cè)定。缺點(diǎn)是需要進(jìn)行繁瑣的樣本血清的稀釋。在此基礎(chǔ)上Prince等［3］發(fā)現(xiàn)利用定量檢測(cè)的ELISA法，以尿素作用前后特異性IgG濃度的比值作為RAI值，能夠較好地克服上述兩種方法的缺點(diǎn)。因此本實(shí)驗(yàn)采用這一目前較為準(zhǔn)確而又簡(jiǎn)便的方法。

目前國(guó)內(nèi)外檢測(cè)IgG親和力指數(shù)多用于判別諸如巨細(xì)胞病毒、風(fēng)疹病毒、EB病毒、肺炎支原體等的原發(fā)性感染亦或既往感染［9－11］。國(guó)外有關(guān)自身抗體IgG親和力與疾病關(guān)系的研究已見(jiàn)報(bào)道。本文研究所用 anti－TG Ab 試劑盒靈敏度為 10 IU／mL，anti－TPOAb試劑盒靈敏度5 IU／mL。若某一RAI較低（如低至10%）的樣本anti－TG Ab濃度低于100 IU／mL或anti－TPOAb濃度低于50 IU／mL時(shí)則可能會(huì)因敏感度原因?qū)е翿AI的檢測(cè)結(jié)果偏高。本文研究所收集的樣本血清，其兩種抗體均為陽(yáng)性（anti－TG Ab 最低濃度 212 IU／mL，anti－TPOAb 最低濃度133 IU／mL），因此能夠避免這種檢測(cè)誤差的出現(xiàn)。

本文研究為國(guó)內(nèi)首次證實(shí)anti－TG Ab和anti－TPOAb親和力對(duì)于判斷HT患者甲狀腺功能正常與否有一定的臨床價(jià)值。本文研究結(jié)果顯示，甲狀腺功能異常 HT組 anti－TG Ab和anti－TPOAb的 RAI檢測(cè)結(jié)果均高于甲狀腺功能異常HT組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），提示 anti－TG Ab和anti－TPOAb的RAI檢測(cè)結(jié)果可用于判斷HT患者甲狀腺功能正常與否。且本文研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，anti－TG Ab和anti－TPOAb的RAI用于判斷甲狀腺功能正常與否的靈敏度分別為84.8%、81.6%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為 90.0%、91.0%，ROC 曲線下面積分別為0.779、0.730，提示 anti－TG Ab和anti－TPOAb 的 RAI對(duì)甲狀腺功能正常與否有較好的診斷價(jià)值。本文研究結(jié)果還顯示在甲狀腺功能異常組，兩種抗體均以高RAI占優(yōu)勢(shì)，兩種抗體同為高RAI的占54.5%（18／33），而在甲狀腺功能正常組僅占 15.8%（3／19），且兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示高親和力 anti－TG Ab和anti－TPOAb的存在對(duì) HT的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程起著重要的促進(jìn)作用。由于本文研究所收集的病例資料有待豐富，尚不能判斷HT臨床表現(xiàn)和病情與其中哪一種抗體親和力相關(guān)性更加顯著。因此，在后續(xù)試驗(yàn)中，應(yīng)繼續(xù)增大樣本容量，尤其是對(duì)患者兩種抗體親和力動(dòng)態(tài)變化的跟蹤觀察，將會(huì)更加客觀地揭示出其親和力高低與HT發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸之間的內(nèi)在聯(lián)系，從而更好地為臨床診斷、治療等提供準(zhǔn)確的參考依據(jù)。

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