文│李彥芳（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

玉努斯·沙旦（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市天山鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站）

阿吾提·蘇萊曼（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市二堡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站）

哈密市家畜口蹄疫免疫抗體檢測(cè)與分析

文│李彥芳（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

玉努斯·沙旦（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市天山鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站）

阿吾提·蘇萊曼（新疆維吾爾自治區(qū)哈密市二堡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，主要侵害偶蹄獸（牛、羊、豬），臨床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮膚發(fā)生水皰和潰爛為特征。口蹄疫病毒已知有7個(gè)血清型，分別為A、O、C型，南非1、2、3型和亞洲I型（以下簡(jiǎn)稱亞I型），而我國(guó)流行的血清型主要為A、O和亞I型?？谔阋卟《靖餮逍椭g無(wú)交叉免疫性，給該病的防控工作帶來(lái)很大困難。目前，國(guó)內(nèi)外主要采取對(duì)易感動(dòng)物進(jìn)行疫苗免疫的措施來(lái)預(yù)防和控制該病，疫苗免疫效果的好壞直接關(guān)系到口蹄疫的防控效果。本研究利用液相阻斷ELISA試驗(yàn)對(duì)哈密市14個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的存欄家畜進(jìn)行了口蹄疫疫苗免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析，以評(píng)估哈密市的口蹄疫疫苗免疫效果，為本地區(qū)的口蹄疫防控工作提供技術(shù)指導(dǎo)。

一、材料與方法

1.疫苗及主要診斷試劑。牛羊口蹄疫O、A、亞I型三價(jià)滅活苗由金宇保靈生物藥品有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為4235014。豬口蹄疫O型滅活苗由中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為H140319J?？谔阋逴、A和亞I型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所提供，批號(hào)分別為2014052003、2014092301、2014100902。

2.血清。2014年哈密市秋季口蹄疫免疫時(shí)間為9月17日～10月20日，免疫后1個(gè)月左右，哈密市動(dòng)物疫控中心組織鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站在全市14個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)開展免疫家畜采血工作，共計(jì)采集955份血清樣品。其中，牛血清315份，羊血清480份，豬血清160份。

3.檢測(cè)方法。應(yīng)用口蹄疫O、A、亞I型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒分別對(duì)牛、羊血清樣品進(jìn)行口蹄疫各亞型免疫抗體水平檢測(cè)；應(yīng)用口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)豬血清樣品進(jìn)行口蹄疫O型免疫抗體水平檢測(cè)。具體操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

◎圖1 哈密市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛口蹄疫A、O、亞I型抗體檢測(cè)結(jié)果

圖2 哈密市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊口蹄疫A、O、亞I型抗體檢測(cè)結(jié)果

4.結(jié)果判定。以病毒抗原對(duì)照平均OD492值的50%為臨界值，被檢血清稀釋孔OD492值大于臨界值的孔判為陰性，小于臨界值的孔判為陽(yáng)性?？椎腛D492值等于臨界值時(shí)所對(duì)應(yīng)的稀釋度為該份血清的抗體滴度。

當(dāng)待檢牛、羊血清樣品的抗體滴度≥1∶128時(shí)，豬血清樣品的抗體滴度≥1∶64時(shí)，判定該血清樣品為×型口蹄疫抗體效價(jià)合格。

二、結(jié)果與分析

1.牛羊口蹄疫O、A、亞I型抗體檢測(cè)結(jié)果與分析。利用口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)13個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)送檢的795份血清（其中，牛血清315份，羊血清480份）分別進(jìn)行了口蹄疫O、A、亞I型抗體檢測(cè)，具體檢測(cè)結(jié)果見圖1和圖2。哈密市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛、羊口蹄疫A型抗體合格率處于60%～95%，O型抗體合格率處于69.2%～95%，亞I型抗體合格率處于61.5%～100%。由圖1和圖2可知，2014年哈密市牛、羊口蹄疫抗體水平整體較好，13個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的口蹄疫平均抗體合格率均能達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%標(biāo)準(zhǔn)。

50%以上的鄉(xiāng)鎮(zhèn)口蹄疫O型和亞I型的抗體合格率均明顯地高于A型抗體合格率。這表明，與O型和亞I型相比，全市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)牛、羊A型口蹄疫抗體合格率普遍較低。

2.豬口蹄疫O型抗體檢測(cè)結(jié)果與分析。利用口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)及1個(gè)生豬屠宰場(chǎng)送檢的160份豬血清樣品進(jìn)行了口蹄疫O型抗體水平檢測(cè)，具體檢測(cè)結(jié)果見圖3。由圖3可知，陶家宮鎮(zhèn)豬口蹄疫免疫抗體水平最好，其次是西河區(qū)，市生豬屠宰場(chǎng)最差。市生豬屠宰場(chǎng)豬口蹄疫抗體合格率未達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，陶家宮鎮(zhèn)和西河區(qū)在國(guó)家強(qiáng)制免疫的3種豬的重大動(dòng)物疫病免疫程序上有所不同，且差別較大；市生豬屠宰場(chǎng)豬的來(lái)源復(fù)雜，50%以上的豬是從外省、外市調(diào)入，免疫程序執(zhí)行情況無(wú)從得知。

圖3 哈密市各鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬口蹄疫O型抗體檢測(cè)結(jié)果

三、討論

世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）數(shù)據(jù)顯示，近兩年A型血清型感染率呈迅速上升趨勢(shì)，2011年全球A型感染率是2010年的3倍，而O型則呈現(xiàn)遞減趨勢(shì)。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，A型口蹄疫的流行范圍和毒株的復(fù)雜程度僅次于O型口蹄疫；并且A型口蹄疫致病性和抗原變異性普遍強(qiáng)于O型。

本研究發(fā)現(xiàn)，與O型和亞洲I型相比，哈密市A型口蹄疫免疫抗體水平較低。這表明，牛羊口蹄疫O、A、亞I型三價(jià)滅活苗中A型的免疫效果較差，有待于進(jìn)一步優(yōu)化和完善?？谔阋咭呙缪邪l(fā)機(jī)構(gòu)應(yīng)該充分考慮病毒的變異性和流行性，及時(shí)更新疫苗毒株，優(yōu)化各亞型病毒的配比，有效地提高口蹄疫疫苗的免疫效果，最大限度地降低口蹄疫的發(fā)生概率。

疫苗免疫一直是我國(guó)控制重大動(dòng)物疫病發(fā)生、流行的一個(gè)關(guān)鍵措施。當(dāng)前，我國(guó)對(duì)豬群實(shí)施強(qiáng)制免疫的重大動(dòng)物疫病有豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病。目前，國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)這三種疫苗免疫相互干擾的研究較多，但研究結(jié)果差別很大。

本研究發(fā)現(xiàn)，哈密市某些鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬的免疫程序不適合該地區(qū)豬場(chǎng)，還有待于進(jìn)一步優(yōu)化。從流行病學(xué)角度來(lái)看，綿羊是口蹄疫的“貯存器”，豬是“擴(kuò)大器”，牛是“指示器”，由此可見，豬對(duì)于口蹄疫的傳播起著相當(dāng)重要的作用。哈密市50%以上的屠宰生豬是由外省、外市調(diào)入，并且屠宰生豬的口蹄疫抗體水平較低，哈密市生豬輸入性口蹄疫疫病的風(fēng)險(xiǎn)較高。相關(guān)部門應(yīng)加大對(duì)生豬流通環(huán)節(jié)的監(jiān)管力度，有效降低豬口蹄疫的傳入風(fēng)險(xiǎn)。