黃繼康 曹文明 胡寶生 張同平 封士軍 劉光旭 高 楊

(江蘇省灌云縣畜牧獸醫(yī)站,江蘇灌云 222200)

蛋雞禽流感抗體的消長規(guī)律分析

黃繼康 曹文明 胡寶生 張同平 封士軍 劉光旭 高 楊

(江蘇省灌云縣畜牧獸醫(yī)站,江蘇灌云 222200)

為建立并推廣使用禽流感綜合防控技術(shù)，減輕禽流感對家禽業(yè)的危害。使用HA試驗(yàn)或HI試驗(yàn)進(jìn)行免疫抗體檢測，通過建立示范場，進(jìn)行試驗(yàn)和示范，制定免疫程序，并提供相應(yīng)的檢測服務(wù)，通過培訓(xùn)、觀摩，示范帶動項(xiàng)目區(qū)養(yǎng)殖戶應(yīng)用以疫苗預(yù)防、監(jiān)測、科學(xué)管理、生物安全并舉綜合防控措施，促進(jìn)項(xiàng)目區(qū)養(yǎng)禽戶增產(chǎn)增效。為此，縣畜牧獸醫(yī)站承擔(dān)并組織實(shí)施了2014年省農(nóng)業(yè)三新工程項(xiàng)目——禽流感綜合防控技術(shù)項(xiàng)目，通過本項(xiàng)目的實(shí)施，獸醫(yī)站對示范場朝亮蛋雞養(yǎng)殖場、項(xiàng)方蛋雞養(yǎng)殖場禽流感免疫抗體消長情況進(jìn)行跟蹤監(jiān)測，分析評估，摸索蛋雞免疫抗體的消長規(guī)律，制定蛋雞流感免疫程序，推動禽流感免疫科學(xué)化、合理化。

1 試驗(yàn)?zāi)康?/h2>

當(dāng)前灌云縣蛋雞養(yǎng)殖場戶禽流感免疫程序以不同的雞苗供應(yīng)廠商提供建議免疫程序進(jìn)行免疫，H5、H9禽流感免疫程序各自有所不同，給禽流感防控帶來一定影響。本試驗(yàn)就是對不同日齡蛋雞進(jìn)行按各自參考程序免疫后，進(jìn)行免疫抗體跟蹤監(jiān)測，弄清抗體的消長規(guī)律，期望找到更加合理的免疫方法，進(jìn)一步提出種蛋雞合理的禽流感防治方案和措施。

2 試驗(yàn)材料及試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

2.1 試驗(yàn)疫苗

某疫苗廠生產(chǎn)的禽流感H5N1Re-6+7滅活疫苗。

某疫苗廠生產(chǎn)的新城疫+H9禽流感二聯(lián)滅活苗。

2.2 試驗(yàn)抗原

哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的血凝抑制診斷抗原。

禽流感H5N1Re-7診斷抗原，批號2014009。

禽流感H9診斷抗原，批號20140301。

2.3 檢測方法

高致病性禽流感診斷技術(shù)GB/T18936-2003

3 試驗(yàn)方法

3.1 試驗(yàn)蛋雞分組

朝亮蛋雞場1批種蛋苗雞，為第1組；項(xiàng)方雞場共2批蛋雞，其中蛋苗雞為第2組，125日齡青年雞群，為第3組。每組30只。

3.2 試驗(yàn)組免疫

按2個養(yǎng)殖場的原有程序進(jìn)行免疫，并做相關(guān)檢查和統(tǒng)計，結(jié)果詳見表1。

表1 禽流感H5N1Re-6+7、ND+H9二聯(lián)滅活苗疫苗時間

第1組，分別在42、82、140、165、200、230日齡采血監(jiān)測。

第2組，分別在44、70、110、150、180、210日齡采血監(jiān)測。

第3組，分別在150、180、210、240、270、300日齡采血監(jiān)測。

從翅靜脈采血，每只采集1.5-2ml，血清自然析出后離心分離裝入指型管備檢。采用禽流感血凝抑制試驗(yàn)（HA）檢測免疫抗體效價，4HUA為1：256，檢測標(biāo)準(zhǔn)遵照GB/T18936-2003，連續(xù)監(jiān)測6次。

表2 試驗(yàn)1組H5N1Re-7禽流感免疫抗體監(jiān)測結(jié)果匯總（log2）

表3 試驗(yàn)1組H9禽流感免疫抗體監(jiān)測結(jié)果匯總（log2）

4 監(jiān)測結(jié)果與分析

選擇不同疫苗免疫雞群，監(jiān)測不同試驗(yàn)組產(chǎn)生的抗體結(jié)果，結(jié)果詳見表1～表7。

（1）試驗(yàn)1組在苗雞進(jìn)行3次免疫后，首免后第1次監(jiān)測，H5N1免疫抗體均值達(dá)5.4，H9均值4.5，經(jīng)過2次免疫后，82日齡采樣監(jiān)測，H5N1、H9免疫抗體均值達(dá)到7.5左右，隨后經(jīng)3免后，H5N1、H9免疫抗體均值達(dá)到8.0以上，且維持有效保護(hù)滴度約3月，230日齡監(jiān)測還維持在6以上。維持較高保護(hù)水平。

（2）試驗(yàn)2組，H5N1免疫抗體滴度與1組無明顯差異，H9首次監(jiān)測滴度低，是首免后的14天，2次監(jiān)測時，免疫抗體滴度均值4.6，3次監(jiān)測時，抗體滴度只有3.8左右，115日齡2次免疫后抗體達(dá)7.8，并維持3月較高的保護(hù)水平。

（3）試驗(yàn)3組，H5N1在開產(chǎn)前經(jīng)3次免疫后，能達(dá)8.0以上免疫抗體水平，維持有效保護(hù)，約120天左右，H9在2次免疫以后也能達(dá)7.0以上水平。240、270、300日齡檢測結(jié)果表明，免疫120日，免疫抗體已處于不能有效保護(hù)情況，免疫后5月已不能保護(hù)。至300日齡監(jiān)測，抗體已處于不合格狀態(tài)，且離散度大。

5 結(jié)論及建議

（1）H5N1、H9禽流感1次免疫，H5N1免疫抗體均值只能達(dá)5.4左右，H9免疫抗體只有4.6均值，能保護(hù)但是抗體滴度不高，2次強(qiáng)化免疫后，抗體滴度處于7.5左右的較高水平。3次免疫后抗體達(dá)到最高水平，處于8～9之間。

（2）相同免疫次數(shù)，H5N1禽流感免疫抗體比H9抗體滴度相對要高。

（3）從監(jiān)測結(jié)果看，H9禽流感也必須采取開產(chǎn)前3次免疫，才能達(dá)較高的保護(hù)抗體水平，如試驗(yàn)1組的免疫方法，免疫效果較好。2、3組的采取28日、115日2次免疫的方法，雞群H9抗體處于較低的狀態(tài)，抗體滴度沒有試驗(yàn)1組高。

（4）H5N1、H9必須要經(jīng)過多次重復(fù)免疫，才能獲得高水平的免疫保護(hù)力。產(chǎn)蛋期禽流感抗體下降較快，免疫保護(hù)期達(dá)不到6月，4月時抗體水平已明顯偏低，不能提供堅強(qiáng)保護(hù)。建議蛋雞禽流感免疫程序采取試驗(yàn)1組的程序較為合理，以后3～4月加強(qiáng)免疫一次。

表4 試驗(yàn)2組H5N1Re-7禽流感免疫抗體監(jiān)測結(jié)果匯總（log2）

表5 試驗(yàn)2組H9禽流感免疫抗體監(jiān)測結(jié)果匯總（log2）