陳艷瓊

(曲靖市第一人民醫(yī)院腫瘤科，云南 曲靖 655000)

血清EGFR水平檢測(cè)在晚期肺癌中的應(yīng)用價(jià)值

陳艷瓊

(曲靖市第一人民醫(yī)院腫瘤科，云南 曲靖 655000)

[摘要]目的探尋在晚期肺癌的診療中血清表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)水平檢測(cè)起到的作用。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)30例晚期肺癌患者(觀察組)、60例良性肺部疾病患者(良性組)以及50例健康志愿者(健康對(duì)照組)血清EGFR水平。結(jié)果觀察組血清EGFR水平明顯高于良性組及健康對(duì)照組(<0.05)。觀察組血清EGFR檢測(cè)出發(fā)生突變者13例，占43.33%。結(jié)論對(duì)于晚期肺癌患者，通過適當(dāng)方法，能夠檢測(cè)出血清中EGFR基因突變，對(duì)其接受EGFR基因?qū)用娴脑\斷以及進(jìn)行靶向治療均具有良好的臨床價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]血清；表皮生長(zhǎng)因子受體；晚期肺癌；基因突變

肺癌是一種臨床常見的呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率及致死率均較高。據(jù)臨床調(diào)查報(bào)告顯示，近10余年，我國(guó)肺癌患者數(shù)量呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，年平均增長(zhǎng)率約為1.63%。按照組織類型，可將肺癌分為小細(xì)胞肺癌及非小細(xì)胞肺癌。根據(jù)國(guó)際TNM版肺癌分期，Ⅰa～Ⅱb期肺癌中小細(xì)胞肺癌者發(fā)病率約占肺癌患者總數(shù)的1/5左右，可通過根治術(shù)治療，5 a生存率較好[1]，Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者多數(shù)有局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，部分可通過肺癌根治術(shù)進(jìn)行治療，但多數(shù)僅能通過化療改善癥狀，延緩病情發(fā)展，5 a生存率僅為20.00%。約85.00%的肺癌患者屬于非小細(xì)胞肺癌，臨床上可通過第3代化療藥物，如吉西他濱、紫杉醇等，與鉑類藥物聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行治療，以提升患者預(yù)后，僅約35.00%的患者能夠使用本治療方案[2]。近年來，隨著對(duì)腫瘤研究的逐漸深入，通過對(duì)腫瘤細(xì)胞中處于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的部分特異性分子開展靶向治療，開發(fā)抗腫瘤治療新藥，這種治療方式從一定程度上彌補(bǔ)了傳統(tǒng)化療方法的不足或局限性，具有高效低毒的優(yōu)點(diǎn)，以表皮生長(zhǎng)因子受體(epithelial growth factor receptor，EGFR)研究最為深入及廣泛[3]。本次研究目的是探尋在晚期肺癌的診療中血清EGFR水平檢測(cè)起到的作用，現(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料納入2013年2月至2015年3月我院收治的經(jīng)病理學(xué)確診的晚期肺癌患者30例作為觀察組，隨機(jī)選擇同期我院收治的良性肺部疾病患者60例作為良性組，隨機(jī)選擇同期體檢的健康志愿者50例作為健康對(duì)照組。觀察組30例中，男19例，女11例；年齡28～79歲(57.28±10.09)歲；肺癌臨床分期為Ⅲa～Ⅳ期；良性組60例中，男36例，女24例，年齡25～75歲(53.46±9.87)；健康對(duì)照組50例中，男26例，女24例，年齡22～78歲(55.39±11.28)歲。所有納入研究對(duì)象均自愿同醫(yī)院簽訂知情同意書。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)所有研究對(duì)象均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取周靜脈血液4 mL，送檢實(shí)驗(yàn)室后，室溫靜置血液標(biāo)本30 min，待其自然析出血清，經(jīng)離心機(jī)抽取淡黃色血清，分裝后進(jìn)行標(biāo)記并放入低溫冰箱中保存，避免進(jìn)行反復(fù)凍融；按照酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)說明書要求準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)樣品、換沖洗液以及顯色劑等，解凍血清樣本，在微孔反應(yīng)板中加入血清樣本及標(biāo)準(zhǔn)樣品(不同濃度)、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液后，分別甩去孔中液體后加入緩沖洗液進(jìn)行5次洗滌；上述步驟處理結(jié)束后，加入顯色劑，震蕩顯色后，再次加入終止液，震蕩混勻。經(jīng)酶標(biāo)儀于30 min內(nèi)對(duì)不同標(biāo)準(zhǔn)品孔中的相應(yīng)吸光度進(jìn)行檢測(cè)(490 nm)，將數(shù)據(jù)分析后檢測(cè)送檢樣品內(nèi)EGFR水平[4]。

1.2.2DNA提取將觀察組30例患者血清通過專門DNA抽提試劑提取血清中游離DNA，檢測(cè)外顯子19的基因突變率，分析其對(duì)晚期肺癌基于EGFR方面的基因診斷以及進(jìn)行靶向治療中所產(chǎn)生的臨床價(jià)值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用±s表示，多組之間比較采用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

觀察組血清EGFR水平為(17.39±5.78) μg·L-1，明顯高于良性組的(4.55±2.21)μg·L-1及健康對(duì)照組的(3.52±2.30)μg·L-1(<0.05)。

觀察組30例患者血清提取DNA后進(jìn)行EGFR檢測(cè)結(jié)果顯示，發(fā)生突變者13例，檢出其外顯子19發(fā)生基因突變率為43.33%(13/30)，男、女患者的突變率分別為36.84%(7/19)、54.55%(6/11)。吸煙及不吸煙患者的EGFR突變情況見表1。

表1　肺癌患者中吸煙及不吸煙者的EGFR突變情況　%(n/n)

3討論

在非小細(xì)胞肺癌中，選擇EGFR作為基于基因突變腫瘤靶向治療起效的前提條件是比較有效的，總有效率最高可超過80%，但對(duì)同類型未發(fā)生EGFR基因突變腫瘤則效果不大[5]。故在臨床中篩選出EGFR基因突變肺癌患者在肺癌，尤其是晚期肺癌中，具有極高的臨床價(jià)值。因外顯子19發(fā)生基因突變率相對(duì)較高，且90.00%以上的EGFR基因突變發(fā)生于此，故選擇外顯子19作為本次研究重點(diǎn)。而且通過對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者、良性肺疾病患者以及健康志愿者血清EGFR水平進(jìn)行檢測(cè)，分析結(jié)果得知，與非小細(xì)胞肺癌關(guān)系緊密的危險(xiǎn)因素主要包括腫瘤組織分期類型、吸煙史、是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等，能夠?qū)颊呱鏁r(shí)間及生或質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重影響。本次研究中，女性不吸煙非小細(xì)胞肺癌晚期患者中EGFR基因發(fā)生突變率相對(duì)較高，其次為女性及男性吸煙非小細(xì)胞肺癌晚期患者。臨床上一般建議晚期肺癌患者檢測(cè)EGFR基因是否發(fā)生突變，以制定針對(duì)性較強(qiáng)的治療方案。

參考文獻(xiàn)：

[1]賴繁彩，陳龍，王斌.非小細(xì)胞癌EGFR基因突變與擴(kuò)增及下游信號(hào)傳導(dǎo)蛋白磷酸化與臨床病理特征的關(guān)系[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2013,26(5):390-395.

[2]劉海濤.EGFR基因突變檢測(cè)在晚期NSCLC靶向治療中的應(yīng)用研究[D].蚌埠：蚌埠醫(yī)學(xué)院，2012.

[3]王建正，馮笑山，周富有，等.食管癌組織中EGFR和PTEN蛋白的表達(dá) [J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2013,26(2)：100-103.

[4]王勇.血清EGFR檢測(cè)在非小細(xì)胞肺癌中的臨床意義及預(yù)后判斷中的應(yīng)用價(jià)值[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2014.

[5]柯宏剛.新輔助化療與肺腺癌組織中的EGFR基因突變和ERCCI基因的關(guān)系研究[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2013.

作者簡(jiǎn)介：陳艷瓊(1973-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤化療工作。 王學(xué)軍(1972-)，男，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤相關(guān)研究工作。E-mail:hmhfzah@126.com

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.05.025

[中圖分類號(hào)]R734.2；R730.4

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1673-5412(2015)05-0441-02

(收稿日期：2015-05-17)

通信作者：王澤興(1963-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤相關(guān)研究工作。E-mail:wangzx630908@126.com