膿毒血癥老年患者血清中白細胞介素-18、-35和腫瘤壞死因子α表達及意義

楊培雄李琳業(yè)吳占慶韓何武侯明1張呈祥1

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院急診外科，青海西寧810000)

摘要〔〕目的觀察膿毒血癥老年患者血清中白細胞介素(IL)-18、IL-35及腫瘤壞死因子(TNF)-α表達特征，關(guān)注其臨床意義。方法83例診斷為膿毒血癥的老年患者作為觀察組，55例體檢健康老年人的血清樣本作為對照組，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達。結(jié)果兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異顯著。觀察組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達與病變類型、是否伴有并發(fā)癥及預(yù)后密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中IL-18和IL-35、IL-35和TNF-α均呈負相關(guān)性。結(jié)論膿毒血癥老年患者血清中IL-18和TNF-α高表達、IL-35低表達，IL-18、IL-35和TNF-α三者間具有協(xié)同作用，共同促病變的進展。聯(lián)合檢測IL-18、IL-35和TNF-α表達在一定程度上可以判斷預(yù)后。

關(guān)鍵詞〔〕膿毒血癥；白細胞介素(IL)-18；IL-35；腫瘤壞死因子(TNF)-α

中圖分類號〔〕R63〔文獻標(biāo)識碼〕A〔

1青海大學(xué)附屬醫(yī)院急診ICU

第一作者：楊培雄(1966-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腹部創(chuàng)傷及危重病治療研究。

膿毒血癥是危重癥患者臨床較為嚴(yán)重的全身炎癥反應(yīng)，病變嚴(yán)重者可以引起休克和多器官衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥〔1〕?；颊咴谀摱景Y發(fā)生和發(fā)展過程中可以分泌多種細胞因子，對病程的進展影響較大〔2，3〕。白細胞介素(IL)-18作為機體內(nèi)中性粒細胞的趨化和活化因子，可以誘導(dǎo)炎性細胞的形態(tài)改變，釋放超氧化物和溶酶體酶，促進炎癥反應(yīng)〔4〕。腫瘤壞死因子(TNF)-α是急性炎性因子，對炎癥的發(fā)展和機體的免疫反應(yīng)具有促進作用〔5〕。IL-35可以對抗促炎介質(zhì)，維持正常機體的炎性因子平衡〔6〕。本研究關(guān)注膿毒血癥老年患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達及其相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料近3年我院確診為膿毒血癥的老年患者83例作為觀察組。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有惡性腫瘤的患者；②有嚴(yán)重先天性疾病或畸形的患者；③有精神疾病史的患者。其中男43例，女40例；年齡60～85(平均70.4)歲。55例我院經(jīng)體驗證實為健康的老年人血清標(biāo)本作為對照組，其中男28例，女27例；年齡60～67(平均64.3)歲。兩組一般資料無明顯差異(P>0.05)。

1.2IL-18、IL-35和TNF-α檢測方法觀察組在確診后抽取空腹靜脈血5 ml，對照組常規(guī)抽取空腹靜脈血5 ml，分離血清后置于-20℃冰箱中待檢。IL-18、IL-35和TNF-α檢測均應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法。樣本均于2 w內(nèi)集中檢測，并由同一檢驗師完成操作。

1.3病變程度分組依據(jù)按膿毒血癥的嚴(yán)重程度分為膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥和膿毒性休克。判斷標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重膿毒癥為膿毒癥伴有器官功能障礙、組織灌注不良或低血壓。膿毒性休克為嚴(yán)重膿毒癥給予足量的液體復(fù)蘇后仍然伴有無法糾正的持續(xù)性低血壓。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗、方差分析、線性相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1兩組血清IL-18、IL-35和TNF-α的表達比較兩組血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異顯著(P<0.001)。即觀察組中見IL-18和TNF-α高表達，IL-35低表達。見表1。

2.2不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

表1　兩組血清中IL-18、IL-35和

表2　不同病變程度患者血清中IL-18、IL-35和

2.3是否伴有嚴(yán)重并發(fā)癥患者血清IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較觀察組是否伴有嚴(yán)重并發(fā)癥患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表3。

表3　是否伴有嚴(yán)重并發(fā)癥患者血清中IL-18、

2.4隨訪存活組與死亡組患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表達量的比較不同預(yù)后分組患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表達量差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表4。

表4　隨訪存活組與死亡組患者血清中IL-18、IL-35和

2.5觀察組IL-18、IL-35和TNF-α表達的相關(guān)性分析觀察組中IL-18和IL-35(r=-0.49，P=0.041 2)、IL-35和TNF-α(r=-0.46，P=0.038 7)均具有負相關(guān)性。

3討論

膿毒癥是指由感染所誘發(fā)的全身炎癥反應(yīng)，多種細胞因子形成相互作用〔7〕。老年人由于免疫力低下和抵抗力低下，感染時常較重。IL-18是機體中的促炎物質(zhì)，表達升高時可以對NK細胞的增殖有一定影響〔8〕。有觀點認為IL-18可以誘導(dǎo)淋巴細胞的增殖過程，即促進Th0細胞向Th1細胞分化。有學(xué)者認為IL-18可以啟動炎性級聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)淋巴細胞的克隆性增生和活化〔9,10〕。IL-35是IL家族的新成員，主要由Treg分泌，在正常機體中的表達穩(wěn)定，主要發(fā)揮抑制炎性反應(yīng)及免疫因子活性的負向調(diào)節(jié)作用〔11,12〕。有研究認為IL-35可以抑制炎癥反應(yīng)，并防止過度的自身免疫反應(yīng)的發(fā)生〔13〕。動物實驗研究顯示IL-35在經(jīng)樹突細胞刺激后產(chǎn)生，可以抑制外周血中CD4和CD8陽性的T細胞反應(yīng)，抑制過敏性病變的進展〔14〕。TNF-α在炎性病變時可以引起前列腺素和基質(zhì)金屬蛋白酶的增多，促進各器官纖維組織的重塑，同時引起成纖維細胞的增生〔15,16〕。也有觀點認為TNF-α能刺激機體成纖維細胞分泌多種IL，有效降解蛋白多糖，同時刺激血管內(nèi)皮細胞表達黏附分子，加速炎癥的進展〔17〕。

本實驗結(jié)果提示血清中IL-18、TNF-α、IL-35異常表達對促進膿毒血癥病變進展有重要作用。IL-18和TNF-α的高表達是機體炎性高反應(yīng)狀態(tài)的一個指標(biāo)，可以激活細胞因子的“瀑布效應(yīng)”，同時引發(fā)炎癥的進展〔18〕。IL-35正常表達對于免疫系統(tǒng)和免疫反應(yīng)具有負向調(diào)控的作用，可以抑制過度的炎癥反應(yīng)及過度的自身免疫反應(yīng)〔19〕。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)IL-35表達下降的機體Treg 細胞數(shù)量明顯低于正常機體〔20〕，因此膿毒癥患者Treg 細胞量對IL-35表達有直接影響，推測膿毒血癥患者Treg 細胞可能受到一定損傷。IL-18、IL-35和TNF-α的生物活性與宿主感染密切相關(guān)，一方面表現(xiàn)為IL-18和TNF-α 誘導(dǎo)干擾素-γ生成而保護宿主，并在非特異性反應(yīng)中作為免疫刺激因子協(xié)助特異性B淋巴細胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)〔21〕，另一方面IL-35表達下降后，引起相關(guān)抗炎介質(zhì)表達下降，炎性介質(zhì)對機體的損傷加重，同時可以對抗相關(guān)治療〔22,23〕。也有研究認為IL-18和TNF-α的水平是判斷細菌和病毒感染的較好指標(biāo)〔24〕。

綜上，膿毒血癥老年患者血清中IL-18和TNF-α高表達、IL-35低表達，IL-18、IL-35和TNF-α三者間具有協(xié)同作用，共同促病變的進展。聯(lián)合檢測IL-18、IL-35和TNF-α的表達在一定程度上可以判斷預(yù)后。

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〔2014-03-11修回〕

(編輯苑云杰)